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不同培養(yǎng)基類型對薄荷組織培養(yǎng)的影響

2014-12-23 11:05張倩管遠(yuǎn)清李青
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年11期
關(guān)鍵詞:組織培養(yǎng)薄荷培養(yǎng)基

張倩+管遠(yuǎn)清+李青

摘 要:以薄荷莖段為外植體,研究了4種不同類型培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5、N6)對愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明:1/2MS培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高,為100%,N6培養(yǎng)基愈傷組織的生長量最高;B5培養(yǎng)基芽的誘導(dǎo)率最高,為40%,但1/2MS培養(yǎng)基芽的長勢較好;1/2MS培養(yǎng)基最適合根的誘導(dǎo),誘導(dǎo)率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基,芽分化的最適宜培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基。

關(guān)鍵詞:薄荷;組織培養(yǎng);培養(yǎng)基;誘導(dǎo)率

中圖分類號:S567.23+5.035.3 文獻(xiàn)標(biāo)識號:A 文章編號:1001-4942(2014)11-0030-03

薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性涼,歸肺、肝經(jīng),具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1],在我國自古就有藥食兼用的傳統(tǒng)。目前,薄荷已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、化妝品等工業(yè),具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主,存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點(diǎn)。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可克服薄荷傳統(tǒng)繁殖方式的缺點(diǎn),已有諸多專家進(jìn)行了相關(guān)研究[2~6]。本試驗(yàn)以薄荷的莖段為外植體,研究不同類型培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5、N6)對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響,以利于薄荷組織培養(yǎng)中不同誘導(dǎo)目的適宜培養(yǎng)基的篩選。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試品種為葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體,剪去莖段外層大葉片,用洗衣粉水和清水洗凈,濾紙吸干其表面水分備用。

1.2 試驗(yàn)處理

試驗(yàn)于2013年4月至2013年11月進(jìn)行,選取較常用的4種培養(yǎng)基:MS、1/2MS、B5、N6,培養(yǎng)基加瓊脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導(dǎo)的試驗(yàn)處理見表1,薄荷芽和根誘導(dǎo)的試驗(yàn)處理見表2。

1.3 接種外植體

將薄荷莖段置于干凈燒杯中,先用75%酒精浸泡15 s,無菌水沖洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后,切取0.5 cm長的莖段,接種到培養(yǎng)基上。

4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養(yǎng)基內(nèi),每個處理接種6瓶,每瓶接種5個,共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養(yǎng)基內(nèi),每個處理接種8瓶,每瓶接種5個,共40個外植體。

1.4 培養(yǎng)條件及觀察

保持干球溫度14.8℃,濕球溫度(25±2)℃;光照強(qiáng)度為1 500~2 000 lx,12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況,統(tǒng)計(jì)外植體開始萌動的時間,記錄愈傷組織、芽、根的誘導(dǎo)及生長情況,并進(jìn)行比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表3可以看出,4種培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織的誘導(dǎo)率均在90%以上。其中,以1/2MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高,為100.0%,其次是MS培養(yǎng)基,誘導(dǎo)率為96.7%,N6和B5培養(yǎng)基稍差,誘導(dǎo)率分別為93.3%和90.0%,但1/2MS和MS培養(yǎng)基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養(yǎng)基。

2.2 不同培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表4可以看出,4種培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率的影響差異較大,其中以MS和1/2MS培養(yǎng)基較好,芽誘導(dǎo)率分別為25.0%和27.5%,平均芽重均高于N6和B5培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)率雖高于MS和1/2MS培養(yǎng)基,但芽平均重量低于二者。N6培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)效果最差。

2.3 不同培養(yǎng)基對薄荷根誘導(dǎo)率的影響

由表5可以看出,4種不同類型培養(yǎng)基中,以1/2MS培養(yǎng)基對根的誘導(dǎo)率最高,為82.5%,其次是MS培養(yǎng)基,根誘導(dǎo)率為60.0%,而N6和B5培養(yǎng)基均未誘導(dǎo)出根。

3 結(jié)論與討論

綜合分析本試驗(yàn)結(jié)果,4種不同類型培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果最好,愈傷組織和根的誘導(dǎo)率最高,分別為100%和82.5%,對芽的誘導(dǎo)率也達(dá)27.5%,其次是MS培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基對薄荷芽的誘導(dǎo)率雖高達(dá)40%,但未誘導(dǎo)出根,其它指標(biāo)也低于1/2MS和MS培養(yǎng)基。N6培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最差。

試驗(yàn)看出,不同類型培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果有較大差異,1/2MS和MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)的各項(xiàng)指標(biāo)比較均衡,而B5培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織和芽的誘導(dǎo)率較多,雖未誘導(dǎo)出根,但可作為薄荷芽誘導(dǎo)的專用培養(yǎng)基。本試驗(yàn)是在基本條件一致的情況下,研究了薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及根誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基類型,在此基礎(chǔ)上,提高其誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基配方,如生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度有待于進(jìn)一步研究。

參 考 文 獻(xiàn):

[1] 李辰飛,劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健,2011(6):5.

[2] 丁琤,徐衛(wèi)紅. 薄荷脫毒苗的離體培養(yǎng)及快速繁殖[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報:自然科學(xué)版,2004,24(6):69-72.

[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導(dǎo)愈傷組織的研究[J].北方園藝,2008(10):163-165.

[4] 錢森和,厲榮玉,王洲,等. 薄荷離體培養(yǎng)及植株再生的研究[J].作物雜志,2008(6):41-44.

[5] 李格,呂國華,賈曉鷹,等. 6-BA、NAA及其組合對誘導(dǎo)薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2004,22(4):305-308.

[6] 張澤宏,王兵麗,陳巧玲. 薄荷組織和細(xì)胞培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J]. 漳州師范學(xué)院學(xué)報:自然科學(xué)版,2013,26(3):93-95. 山 東 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2014,46(11):39~42

摘 要:以薄荷莖段為外植體,研究了4種不同類型培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5、N6)對愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明:1/2MS培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高,為100%,N6培養(yǎng)基愈傷組織的生長量最高;B5培養(yǎng)基芽的誘導(dǎo)率最高,為40%,但1/2MS培養(yǎng)基芽的長勢較好;1/2MS培養(yǎng)基最適合根的誘導(dǎo),誘導(dǎo)率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基,芽分化的最適宜培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基。

關(guān)鍵詞:薄荷;組織培養(yǎng);培養(yǎng)基;誘導(dǎo)率

中圖分類號:S567.23+5.035.3 文獻(xiàn)標(biāo)識號:A 文章編號:1001-4942(2014)11-0030-03

薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性涼,歸肺、肝經(jīng),具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1],在我國自古就有藥食兼用的傳統(tǒng)。目前,薄荷已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、化妝品等工業(yè),具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主,存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點(diǎn)。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可克服薄荷傳統(tǒng)繁殖方式的缺點(diǎn),已有諸多專家進(jìn)行了相關(guān)研究[2~6]。本試驗(yàn)以薄荷的莖段為外植體,研究不同類型培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5、N6)對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響,以利于薄荷組織培養(yǎng)中不同誘導(dǎo)目的適宜培養(yǎng)基的篩選。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試品種為葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體,剪去莖段外層大葉片,用洗衣粉水和清水洗凈,濾紙吸干其表面水分備用。

1.2 試驗(yàn)處理

試驗(yàn)于2013年4月至2013年11月進(jìn)行,選取較常用的4種培養(yǎng)基:MS、1/2MS、B5、N6,培養(yǎng)基加瓊脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導(dǎo)的試驗(yàn)處理見表1,薄荷芽和根誘導(dǎo)的試驗(yàn)處理見表2。

1.3 接種外植體

將薄荷莖段置于干凈燒杯中,先用75%酒精浸泡15 s,無菌水沖洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后,切取0.5 cm長的莖段,接種到培養(yǎng)基上。

4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養(yǎng)基內(nèi),每個處理接種6瓶,每瓶接種5個,共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養(yǎng)基內(nèi),每個處理接種8瓶,每瓶接種5個,共40個外植體。

1.4 培養(yǎng)條件及觀察

保持干球溫度14.8℃,濕球溫度(25±2)℃;光照強(qiáng)度為1 500~2 000 lx,12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況,統(tǒng)計(jì)外植體開始萌動的時間,記錄愈傷組織、芽、根的誘導(dǎo)及生長情況,并進(jìn)行比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表3可以看出,4種培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織的誘導(dǎo)率均在90%以上。其中,以1/2MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高,為100.0%,其次是MS培養(yǎng)基,誘導(dǎo)率為96.7%,N6和B5培養(yǎng)基稍差,誘導(dǎo)率分別為93.3%和90.0%,但1/2MS和MS培養(yǎng)基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養(yǎng)基。

2.2 不同培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表4可以看出,4種培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率的影響差異較大,其中以MS和1/2MS培養(yǎng)基較好,芽誘導(dǎo)率分別為25.0%和27.5%,平均芽重均高于N6和B5培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)率雖高于MS和1/2MS培養(yǎng)基,但芽平均重量低于二者。N6培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)效果最差。

2.3 不同培養(yǎng)基對薄荷根誘導(dǎo)率的影響

由表5可以看出,4種不同類型培養(yǎng)基中,以1/2MS培養(yǎng)基對根的誘導(dǎo)率最高,為82.5%,其次是MS培養(yǎng)基,根誘導(dǎo)率為60.0%,而N6和B5培養(yǎng)基均未誘導(dǎo)出根。

3 結(jié)論與討論

綜合分析本試驗(yàn)結(jié)果,4種不同類型培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果最好,愈傷組織和根的誘導(dǎo)率最高,分別為100%和82.5%,對芽的誘導(dǎo)率也達(dá)27.5%,其次是MS培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基對薄荷芽的誘導(dǎo)率雖高達(dá)40%,但未誘導(dǎo)出根,其它指標(biāo)也低于1/2MS和MS培養(yǎng)基。N6培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最差。

試驗(yàn)看出,不同類型培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果有較大差異,1/2MS和MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)的各項(xiàng)指標(biāo)比較均衡,而B5培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織和芽的誘導(dǎo)率較多,雖未誘導(dǎo)出根,但可作為薄荷芽誘導(dǎo)的專用培養(yǎng)基。本試驗(yàn)是在基本條件一致的情況下,研究了薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及根誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基類型,在此基礎(chǔ)上,提高其誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基配方,如生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度有待于進(jìn)一步研究。

參 考 文 獻(xiàn):

[1] 李辰飛,劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健,2011(6):5.

[2] 丁琤,徐衛(wèi)紅. 薄荷脫毒苗的離體培養(yǎng)及快速繁殖[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報:自然科學(xué)版,2004,24(6):69-72.

[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導(dǎo)愈傷組織的研究[J].北方園藝,2008(10):163-165.

[4] 錢森和,厲榮玉,王洲,等. 薄荷離體培養(yǎng)及植株再生的研究[J].作物雜志,2008(6):41-44.

[5] 李格,呂國華,賈曉鷹,等. 6-BA、NAA及其組合對誘導(dǎo)薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2004,22(4):305-308.

[6] 張澤宏,王兵麗,陳巧玲. 薄荷組織和細(xì)胞培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J]. 漳州師范學(xué)院學(xué)報:自然科學(xué)版,2013,26(3):93-95. 山 東 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 2014,46(11):39~42

摘 要:以薄荷莖段為外植體,研究了4種不同類型培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5、N6)對愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明:1/2MS培養(yǎng)基愈傷組織誘導(dǎo)率最高,為100%,N6培養(yǎng)基愈傷組織的生長量最高;B5培養(yǎng)基芽的誘導(dǎo)率最高,為40%,但1/2MS培養(yǎng)基芽的長勢較好;1/2MS培養(yǎng)基最適合根的誘導(dǎo),誘導(dǎo)率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導(dǎo)的最適宜培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基,芽分化的最適宜培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基。

關(guān)鍵詞:薄荷;組織培養(yǎng);培養(yǎng)基;誘導(dǎo)率

中圖分類號:S567.23+5.035.3 文獻(xiàn)標(biāo)識號:A 文章編號:1001-4942(2014)11-0030-03

薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性涼,歸肺、肝經(jīng),具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1],在我國自古就有藥食兼用的傳統(tǒng)。目前,薄荷已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、食品、化妝品等工業(yè),具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主,存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點(diǎn)。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可克服薄荷傳統(tǒng)繁殖方式的缺點(diǎn),已有諸多專家進(jìn)行了相關(guān)研究[2~6]。本試驗(yàn)以薄荷的莖段為外植體,研究不同類型培養(yǎng)基(MS、1/2MS、B5、N6)對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化以及根誘導(dǎo)的影響,以利于薄荷組織培養(yǎng)中不同誘導(dǎo)目的適宜培養(yǎng)基的篩選。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試品種為葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體,剪去莖段外層大葉片,用洗衣粉水和清水洗凈,濾紙吸干其表面水分備用。

1.2 試驗(yàn)處理

試驗(yàn)于2013年4月至2013年11月進(jìn)行,選取較常用的4種培養(yǎng)基:MS、1/2MS、B5、N6,培養(yǎng)基加瓊脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導(dǎo)的試驗(yàn)處理見表1,薄荷芽和根誘導(dǎo)的試驗(yàn)處理見表2。

1.3 接種外植體

將薄荷莖段置于干凈燒杯中,先用75%酒精浸泡15 s,無菌水沖洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后,切取0.5 cm長的莖段,接種到培養(yǎng)基上。

4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養(yǎng)基內(nèi),每個處理接種6瓶,每瓶接種5個,共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養(yǎng)基內(nèi),每個處理接種8瓶,每瓶接種5個,共40個外植體。

1.4 培養(yǎng)條件及觀察

保持干球溫度14.8℃,濕球溫度(25±2)℃;光照強(qiáng)度為1 500~2 000 lx,12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況,統(tǒng)計(jì)外植體開始萌動的時間,記錄愈傷組織、芽、根的誘導(dǎo)及生長情況,并進(jìn)行比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表3可以看出,4種培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織的誘導(dǎo)率均在90%以上。其中,以1/2MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高,為100.0%,其次是MS培養(yǎng)基,誘導(dǎo)率為96.7%,N6和B5培養(yǎng)基稍差,誘導(dǎo)率分別為93.3%和90.0%,但1/2MS和MS培養(yǎng)基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養(yǎng)基。

2.2 不同培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率和生長量的影響

由表4可以看出,4種培養(yǎng)基對薄荷芽誘導(dǎo)率的影響差異較大,其中以MS和1/2MS培養(yǎng)基較好,芽誘導(dǎo)率分別為25.0%和27.5%,平均芽重均高于N6和B5培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)率雖高于MS和1/2MS培養(yǎng)基,但芽平均重量低于二者。N6培養(yǎng)基芽誘導(dǎo)效果最差。

2.3 不同培養(yǎng)基對薄荷根誘導(dǎo)率的影響

由表5可以看出,4種不同類型培養(yǎng)基中,以1/2MS培養(yǎng)基對根的誘導(dǎo)率最高,為82.5%,其次是MS培養(yǎng)基,根誘導(dǎo)率為60.0%,而N6和B5培養(yǎng)基均未誘導(dǎo)出根。

3 結(jié)論與討論

綜合分析本試驗(yàn)結(jié)果,4種不同類型培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果最好,愈傷組織和根的誘導(dǎo)率最高,分別為100%和82.5%,對芽的誘導(dǎo)率也達(dá)27.5%,其次是MS培養(yǎng)基。B5培養(yǎng)基對薄荷芽的誘導(dǎo)率雖高達(dá)40%,但未誘導(dǎo)出根,其它指標(biāo)也低于1/2MS和MS培養(yǎng)基。N6培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最差。

試驗(yàn)看出,不同類型培養(yǎng)基對薄荷莖段的誘導(dǎo)效果有較大差異,1/2MS和MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)的各項(xiàng)指標(biāo)比較均衡,而B5培養(yǎng)基對薄荷愈傷組織和芽的誘導(dǎo)率較多,雖未誘導(dǎo)出根,但可作為薄荷芽誘導(dǎo)的專用培養(yǎng)基。本試驗(yàn)是在基本條件一致的情況下,研究了薄荷愈傷組織誘導(dǎo)、芽分化及根誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基類型,在此基礎(chǔ)上,提高其誘導(dǎo)率的培養(yǎng)基配方,如生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度有待于進(jìn)一步研究。

參 考 文 獻(xiàn):

[1] 李辰飛,劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健,2011(6):5.

[2] 丁琤,徐衛(wèi)紅. 薄荷脫毒苗的離體培養(yǎng)及快速繁殖[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報:自然科學(xué)版,2004,24(6):69-72.

[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導(dǎo)愈傷組織的研究[J].北方園藝,2008(10):163-165.

[4] 錢森和,厲榮玉,王洲,等. 薄荷離體培養(yǎng)及植株再生的研究[J].作物雜志,2008(6):41-44.

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