梅小偉　余瑞瑤　王芹　歐陽(yáng)艷

摘要：為了解湖北某地區(qū)豬場(chǎng)內(nèi)豬繁殖與呼吸綜合征的血清抗體狀況，應(yīng)用ELISA試劑盒對(duì)2014年3月至2014年9月來(lái)自10個(gè)規(guī)模場(chǎng)、2個(gè)屠宰場(chǎng)、24個(gè)散戶的豬血清樣品進(jìn)行了檢測(cè)。共檢測(cè)血清732份，檢出陽(yáng)性血清501份，合格率68.44%。數(shù)據(jù)顯示規(guī)模場(chǎng)的豬繁殖與呼吸綜合征抗體合格率明顯高于散養(yǎng)戶，應(yīng)采取多種措施以提高散養(yǎng)戶的抗體合格率。

關(guān)鍵詞：豬繁殖與呼吸綜合征；血清學(xué)調(diào)查；ELISA

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2014）10-0010-02

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是近年發(fā)現(xiàn)的一種新的病毒性傳染病，由動(dòng)脈炎病毒科的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起，臨床上以母豬發(fā)熱、厭食、早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、弱仔等繁殖障礙及各種年齡豬的呼吸系統(tǒng)疾病和高死亡率為特征[1]。國(guó)內(nèi)許多省市已有該病的發(fā)生和流行，且流行的范圍越來(lái)越廣，病情越來(lái)越嚴(yán)重，成為規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)繁殖障礙的主要疫病之一，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展造成了巨大損失[2]。通過(guò)應(yīng)用ELISA方法對(duì)2014年3月至2014年9月期間來(lái)自湖北省某地區(qū)豬場(chǎng)送檢的豬血清進(jìn)行了PRRS抗體檢測(cè)和分析。

1 材料與方法

1.1 被檢血清

2014年3月至2014年9月由湖北省某地區(qū)送檢的732份血樣，其中502份來(lái)自10個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)，34份來(lái)自2個(gè)屠宰場(chǎng)，196份來(lái)自24個(gè)散養(yǎng)戶，被檢血樣按母豬、育肥豬、保育豬、仔豬分類，母豬群不分經(jīng)產(chǎn)初產(chǎn)，血樣經(jīng)離心后分離血清，進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。

1.2 檢測(cè)試劑 豬繁殖與呼吸綜合征ELISA檢測(cè)試劑盒為美國(guó)IDEXX公司產(chǎn)品，購(gòu)自北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司。

1.3 操作方法

（1）取出抗原包被板，在記錄表上記錄樣本的位置。

（2）在包被孔內(nèi)加入100 μL沒(méi)有稀釋的陰性對(duì)照，每次檢測(cè)加兩孔。

（3）在包被孔內(nèi)加入100 μL沒(méi)有稀釋的陽(yáng)性對(duì)照，每次檢測(cè)加兩孔。

（4）在相應(yīng)的孔中加入100 μL已稀釋好的樣本。

（5）18～25 ℃孵育：（30）min。

（6）吸取各孔的液體棄入廢液筒。

（7）用大約300 μL洗滌液洗滌板孔，共洗滌3～5次。每次洗滌后應(yīng)吸去孔內(nèi)的液體（注意：應(yīng)避免包被孔干燥。在最后一次洗滌液吸去后，將每塊板中殘留的洗滌液扣拍到吸水材料上）。

（8）每孔加入100 μL辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗豬IgG 抗體。

（9）18～25 ℃孵育30min。

（10）重復(fù)步驟（6）和（7）。

（11）每孔加入100 μLTMB底物液。

（12）18～25 ℃孵育15min。

（13）每孔加入100 μL 終止液，終止反應(yīng)。

（14測(cè)量并且記錄樣本和對(duì)照的吸光度OD650nm。

（15）計(jì)算結(jié)果。

1.4 結(jié)果判定

檢測(cè)結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照的OD650nm減去陰性對(duì)照的OD650nm必須大于或等于0.150；此外，陰性對(duì)照的平均值（NCx）必須小于或等于0.150，判定為有效，否則判結(jié)果無(wú)效。PRRS抗體的檢測(cè)結(jié)果根據(jù)樣品與陽(yáng)性對(duì)照的比值S/P計(jì)算：S/P=（樣品PRRS孔OD值-樣品NHC孔OD值）/（陽(yáng)性對(duì)照PRRS孔OD值-陽(yáng)性對(duì)照NHC孔OD值），當(dāng)S/P≥0.4時(shí)被檢樣品判為陽(yáng)性，當(dāng)S/P<0.4時(shí)被檢樣品判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 規(guī)模化豬場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)湖北省某地區(qū)送檢的規(guī)?；i場(chǎng)血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果（表1）表明，規(guī)模豬場(chǎng)送檢502份血清，陽(yáng)性血清可達(dá)408份，合格率81.27%，其中有7個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)的合格率達(dá)85%以上。

2.2 屠宰場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)送檢的屠宰場(chǎng)血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明，屠宰場(chǎng)送檢34份血清，陽(yáng)性血清只有8份，合格率僅為23.53%。

2.3 散養(yǎng)戶豬場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)來(lái)自24個(gè)散養(yǎng)戶196份血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)，陽(yáng)性血清有85份，合格率為43.37%。

2.4 不同日齡豬PRRS抗體檢測(cè)結(jié)果

將732份血清按不同年齡分群，不同年齡段的豬血清中PRRS抗體合格率差異較大，母豬、育肥豬、保育豬、仔豬的血清抗體合格率分別為96.55%、61.78%、89.58%、85.42%（表2）。

2.5 某種畜場(chǎng)豬PRRS抗體跟蹤檢測(cè)結(jié)果

從2014年5月到9月，對(duì)來(lái)自某種畜場(chǎng)140份血清進(jìn)行檢測(cè)，其中來(lái)自母豬的血清有44份，保育豬的有48份，仔豬的有48份，合格率分別為100%，79.17%，85.42%（表3）。

3 小結(jié)與討論

本試驗(yàn)采用的進(jìn)口ELISA試劑盒，具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性良好等特點(diǎn)，使檢測(cè)結(jié)果更加可靠準(zhǔn)確，真實(shí)地反映出PRRS抗體水平的高低。

通過(guò)對(duì)來(lái)自10個(gè)規(guī)模場(chǎng)，2個(gè)屠宰場(chǎng)，24個(gè)散戶的732份血清進(jìn)行了檢測(cè)，PRRS抗體合格率為68.44%，稍低于國(guó)家規(guī)定的70%以上的要求。但規(guī)模養(yǎng)殖戶的合格率遠(yuǎn)高于散養(yǎng)戶，達(dá)81.27%，大部分規(guī)模戶抗體合格率達(dá)85%以上，而散養(yǎng)戶抗體合格率僅為43.37%，這可能與規(guī)模戶的重視程度高，免疫規(guī)范，合理養(yǎng)殖有關(guān)。屠宰場(chǎng)34份血清抗體合格率只有23.53%，這可能首免120 d后，抗體水平處于下降期有關(guān)，與田召芳等[3]報(bào)道的結(jié)果相一致。

對(duì)不同年齡段的732份血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)，母豬的抗體合格率最高，其次是仔豬和保育豬，而育肥豬的抗體水平最低。通過(guò)對(duì)某豬場(chǎng)的跟蹤檢測(cè)也得出同樣結(jié)果，且該豬場(chǎng)抗體水平高，抗體滴度均勻度小。特別是母豬，5個(gè)月的檢測(cè)，其抗體合格率始終保持在高水平，與周平等[4]報(bào)道的結(jié)果相符。

血清抗體的監(jiān)測(cè)是目前對(duì)免疫質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)或?qū)σ咔檫M(jìn)行預(yù)警預(yù)報(bào)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的常用方法，定期對(duì)豬場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，對(duì)于了解豬場(chǎng)PRRS抗體水平變化和進(jìn)行免疫效果評(píng)估，制定科學(xué)合理的免疫程序，指導(dǎo)生豬養(yǎng)殖，特別是對(duì)指導(dǎo)散養(yǎng)戶養(yǎng)殖，都是十分有利的。

參考文獻(xiàn)：

[1] 方六榮.豬繁殖與呼吸綜合征“自殺性”DNA疫苗與活病毒載體疫苗研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[2] 范京惠，劉 媛，左玉柱.河北省豬繁殖與呼吸綜合征血清學(xué)調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī)，2011，43（3）： 69-70.

[3] 田召芳，柳 林，李春蕾，等.煙臺(tái)地區(qū)高致病性豬藍(lán)耳病抗體水平及疫苗免疫效果調(diào)查[J].中國(guó)畜牧雜志，2010，46（6）： 68-70.

[4] 周 平，張華全，羅才慶，等. 2011 年龍巖地區(qū)部分豬場(chǎng)豬病血清學(xué)調(diào)查情況[J].養(yǎng)豬，2012 （3）： 116-118.

摘要：為了解湖北某地區(qū)豬場(chǎng)內(nèi)豬繁殖與呼吸綜合征的血清抗體狀況，應(yīng)用ELISA試劑盒對(duì)2014年3月至2014年9月來(lái)自10個(gè)規(guī)模場(chǎng)、2個(gè)屠宰場(chǎng)、24個(gè)散戶的豬血清樣品進(jìn)行了檢測(cè)。共檢測(cè)血清732份，檢出陽(yáng)性血清501份，合格率68.44%。數(shù)據(jù)顯示規(guī)模場(chǎng)的豬繁殖與呼吸綜合征抗體合格率明顯高于散養(yǎng)戶，應(yīng)采取多種措施以提高散養(yǎng)戶的抗體合格率。

關(guān)鍵詞：豬繁殖與呼吸綜合征；血清學(xué)調(diào)查；ELISA

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2014）10-0010-02

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是近年發(fā)現(xiàn)的一種新的病毒性傳染病，由動(dòng)脈炎病毒科的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起，臨床上以母豬發(fā)熱、厭食、早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、弱仔等繁殖障礙及各種年齡豬的呼吸系統(tǒng)疾病和高死亡率為特征[1]。國(guó)內(nèi)許多省市已有該病的發(fā)生和流行，且流行的范圍越來(lái)越廣，病情越來(lái)越嚴(yán)重，成為規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)繁殖障礙的主要疫病之一，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展造成了巨大損失[2]。通過(guò)應(yīng)用ELISA方法對(duì)2014年3月至2014年9月期間來(lái)自湖北省某地區(qū)豬場(chǎng)送檢的豬血清進(jìn)行了PRRS抗體檢測(cè)和分析。

1 材料與方法

1.1 被檢血清

2014年3月至2014年9月由湖北省某地區(qū)送檢的732份血樣，其中502份來(lái)自10個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)，34份來(lái)自2個(gè)屠宰場(chǎng)，196份來(lái)自24個(gè)散養(yǎng)戶，被檢血樣按母豬、育肥豬、保育豬、仔豬分類，母豬群不分經(jīng)產(chǎn)初產(chǎn)，血樣經(jīng)離心后分離血清，進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。

1.2 檢測(cè)試劑 豬繁殖與呼吸綜合征ELISA檢測(cè)試劑盒為美國(guó)IDEXX公司產(chǎn)品，購(gòu)自北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司。

1.3 操作方法

（1）取出抗原包被板，在記錄表上記錄樣本的位置。

（2）在包被孔內(nèi)加入100 μL沒(méi)有稀釋的陰性對(duì)照，每次檢測(cè)加兩孔。

（3）在包被孔內(nèi)加入100 μL沒(méi)有稀釋的陽(yáng)性對(duì)照，每次檢測(cè)加兩孔。

（4）在相應(yīng)的孔中加入100 μL已稀釋好的樣本。

（5）18～25 ℃孵育：（30）min。

（6）吸取各孔的液體棄入廢液筒。

（7）用大約300 μL洗滌液洗滌板孔，共洗滌3～5次。每次洗滌后應(yīng)吸去孔內(nèi)的液體（注意：應(yīng)避免包被孔干燥。在最后一次洗滌液吸去后，將每塊板中殘留的洗滌液扣拍到吸水材料上）。

（8）每孔加入100 μL辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗豬IgG 抗體。

（9）18～25 ℃孵育30min。

（10）重復(fù)步驟（6）和（7）。

（11）每孔加入100 μLTMB底物液。

（12）18～25 ℃孵育15min。

（13）每孔加入100 μL 終止液，終止反應(yīng)。

（14測(cè)量并且記錄樣本和對(duì)照的吸光度OD650nm。

（15）計(jì)算結(jié)果。

1.4 結(jié)果判定

檢測(cè)結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照的OD650nm減去陰性對(duì)照的OD650nm必須大于或等于0.150；此外，陰性對(duì)照的平均值（NCx）必須小于或等于0.150，判定為有效，否則判結(jié)果無(wú)效。PRRS抗體的檢測(cè)結(jié)果根據(jù)樣品與陽(yáng)性對(duì)照的比值S/P計(jì)算：S/P=（樣品PRRS孔OD值-樣品NHC孔OD值）/（陽(yáng)性對(duì)照PRRS孔OD值-陽(yáng)性對(duì)照NHC孔OD值），當(dāng)S/P≥0.4時(shí)被檢樣品判為陽(yáng)性，當(dāng)S/P<0.4時(shí)被檢樣品判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 規(guī)?；i場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)湖北省某地區(qū)送檢的規(guī)?；i場(chǎng)血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果（表1）表明，規(guī)模豬場(chǎng)送檢502份血清，陽(yáng)性血清可達(dá)408份，合格率81.27%，其中有7個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)的合格率達(dá)85%以上。

2.2 屠宰場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)送檢的屠宰場(chǎng)血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明，屠宰場(chǎng)送檢34份血清，陽(yáng)性血清只有8份，合格率僅為23.53%。

2.3 散養(yǎng)戶豬場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)來(lái)自24個(gè)散養(yǎng)戶196份血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)，陽(yáng)性血清有85份，合格率為43.37%。

2.4 不同日齡豬PRRS抗體檢測(cè)結(jié)果

將732份血清按不同年齡分群，不同年齡段的豬血清中PRRS抗體合格率差異較大，母豬、育肥豬、保育豬、仔豬的血清抗體合格率分別為96.55%、61.78%、89.58%、85.42%（表2）。

2.5 某種畜場(chǎng)豬PRRS抗體跟蹤檢測(cè)結(jié)果

從2014年5月到9月，對(duì)來(lái)自某種畜場(chǎng)140份血清進(jìn)行檢測(cè)，其中來(lái)自母豬的血清有44份，保育豬的有48份，仔豬的有48份，合格率分別為100%，79.17%，85.42%（表3）。

3 小結(jié)與討論

本試驗(yàn)采用的進(jìn)口ELISA試劑盒，具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性良好等特點(diǎn)，使檢測(cè)結(jié)果更加可靠準(zhǔn)確，真實(shí)地反映出PRRS抗體水平的高低。

通過(guò)對(duì)來(lái)自10個(gè)規(guī)模場(chǎng)，2個(gè)屠宰場(chǎng)，24個(gè)散戶的732份血清進(jìn)行了檢測(cè)，PRRS抗體合格率為68.44%，稍低于國(guó)家規(guī)定的70%以上的要求。但規(guī)模養(yǎng)殖戶的合格率遠(yuǎn)高于散養(yǎng)戶，達(dá)81.27%，大部分規(guī)模戶抗體合格率達(dá)85%以上，而散養(yǎng)戶抗體合格率僅為43.37%，這可能與規(guī)模戶的重視程度高，免疫規(guī)范，合理養(yǎng)殖有關(guān)。屠宰場(chǎng)34份血清抗體合格率只有23.53%，這可能首免120 d后，抗體水平處于下降期有關(guān)，與田召芳等[3]報(bào)道的結(jié)果相一致。

對(duì)不同年齡段的732份血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)，母豬的抗體合格率最高，其次是仔豬和保育豬，而育肥豬的抗體水平最低。通過(guò)對(duì)某豬場(chǎng)的跟蹤檢測(cè)也得出同樣結(jié)果，且該豬場(chǎng)抗體水平高，抗體滴度均勻度小。特別是母豬，5個(gè)月的檢測(cè)，其抗體合格率始終保持在高水平，與周平等[4]報(bào)道的結(jié)果相符。

血清抗體的監(jiān)測(cè)是目前對(duì)免疫質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)或?qū)σ咔檫M(jìn)行預(yù)警預(yù)報(bào)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的常用方法，定期對(duì)豬場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，對(duì)于了解豬場(chǎng)PRRS抗體水平變化和進(jìn)行免疫效果評(píng)估，制定科學(xué)合理的免疫程序，指導(dǎo)生豬養(yǎng)殖，特別是對(duì)指導(dǎo)散養(yǎng)戶養(yǎng)殖，都是十分有利的。

參考文獻(xiàn)：

[1] 方六榮.豬繁殖與呼吸綜合征“自殺性”DNA疫苗與活病毒載體疫苗研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[2] 范京惠，劉 媛，左玉柱.河北省豬繁殖與呼吸綜合征血清學(xué)調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī)，2011，43（3）： 69-70.

[3] 田召芳，柳 林，李春蕾，等.煙臺(tái)地區(qū)高致病性豬藍(lán)耳病抗體水平及疫苗免疫效果調(diào)查[J].中國(guó)畜牧雜志，2010，46（6）： 68-70.

[4] 周 平，張華全，羅才慶，等. 2011 年龍巖地區(qū)部分豬場(chǎng)豬病血清學(xué)調(diào)查情況[J].養(yǎng)豬，2012 （3）： 116-118.

摘要：為了解湖北某地區(qū)豬場(chǎng)內(nèi)豬繁殖與呼吸綜合征的血清抗體狀況，應(yīng)用ELISA試劑盒對(duì)2014年3月至2014年9月來(lái)自10個(gè)規(guī)模場(chǎng)、2個(gè)屠宰場(chǎng)、24個(gè)散戶的豬血清樣品進(jìn)行了檢測(cè)。共檢測(cè)血清732份，檢出陽(yáng)性血清501份，合格率68.44%。數(shù)據(jù)顯示規(guī)模場(chǎng)的豬繁殖與呼吸綜合征抗體合格率明顯高于散養(yǎng)戶，應(yīng)采取多種措施以提高散養(yǎng)戶的抗體合格率。

關(guān)鍵詞：豬繁殖與呼吸綜合征；血清學(xué)調(diào)查；ELISA

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2014）10-0010-02

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是近年發(fā)現(xiàn)的一種新的病毒性傳染病，由動(dòng)脈炎病毒科的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起，臨床上以母豬發(fā)熱、厭食、早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、弱仔等繁殖障礙及各種年齡豬的呼吸系統(tǒng)疾病和高死亡率為特征[1]。國(guó)內(nèi)許多省市已有該病的發(fā)生和流行，且流行的范圍越來(lái)越廣，病情越來(lái)越嚴(yán)重，成為規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)繁殖障礙的主要疫病之一，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展造成了巨大損失[2]。通過(guò)應(yīng)用ELISA方法對(duì)2014年3月至2014年9月期間來(lái)自湖北省某地區(qū)豬場(chǎng)送檢的豬血清進(jìn)行了PRRS抗體檢測(cè)和分析。

1 材料與方法

1.1 被檢血清

2014年3月至2014年9月由湖北省某地區(qū)送檢的732份血樣，其中502份來(lái)自10個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)，34份來(lái)自2個(gè)屠宰場(chǎng)，196份來(lái)自24個(gè)散養(yǎng)戶，被檢血樣按母豬、育肥豬、保育豬、仔豬分類，母豬群不分經(jīng)產(chǎn)初產(chǎn)，血樣經(jīng)離心后分離血清，進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。

1.2 檢測(cè)試劑 豬繁殖與呼吸綜合征ELISA檢測(cè)試劑盒為美國(guó)IDEXX公司產(chǎn)品，購(gòu)自北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司。

1.3 操作方法

（1）取出抗原包被板，在記錄表上記錄樣本的位置。

（2）在包被孔內(nèi)加入100 μL沒(méi)有稀釋的陰性對(duì)照，每次檢測(cè)加兩孔。

（3）在包被孔內(nèi)加入100 μL沒(méi)有稀釋的陽(yáng)性對(duì)照，每次檢測(cè)加兩孔。

（4）在相應(yīng)的孔中加入100 μL已稀釋好的樣本。

（5）18～25 ℃孵育：（30）min。

（6）吸取各孔的液體棄入廢液筒。

（7）用大約300 μL洗滌液洗滌板孔，共洗滌3～5次。每次洗滌后應(yīng)吸去孔內(nèi)的液體（注意：應(yīng)避免包被孔干燥。在最后一次洗滌液吸去后，將每塊板中殘留的洗滌液扣拍到吸水材料上）。

（8）每孔加入100 μL辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗豬IgG 抗體。

（9）18～25 ℃孵育30min。

（10）重復(fù)步驟（6）和（7）。

（11）每孔加入100 μLTMB底物液。

（12）18～25 ℃孵育15min。

（13）每孔加入100 μL 終止液，終止反應(yīng)。

（14測(cè)量并且記錄樣本和對(duì)照的吸光度OD650nm。

（15）計(jì)算結(jié)果。

1.4 結(jié)果判定

檢測(cè)結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照的OD650nm減去陰性對(duì)照的OD650nm必須大于或等于0.150；此外，陰性對(duì)照的平均值（NCx）必須小于或等于0.150，判定為有效，否則判結(jié)果無(wú)效。PRRS抗體的檢測(cè)結(jié)果根據(jù)樣品與陽(yáng)性對(duì)照的比值S/P計(jì)算：S/P=（樣品PRRS孔OD值-樣品NHC孔OD值）/（陽(yáng)性對(duì)照PRRS孔OD值-陽(yáng)性對(duì)照NHC孔OD值），當(dāng)S/P≥0.4時(shí)被檢樣品判為陽(yáng)性，當(dāng)S/P<0.4時(shí)被檢樣品判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 規(guī)?；i場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)湖北省某地區(qū)送檢的規(guī)模化豬場(chǎng)血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果（表1）表明，規(guī)模豬場(chǎng)送檢502份血清，陽(yáng)性血清可達(dá)408份，合格率81.27%，其中有7個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)的合格率達(dá)85%以上。

2.2 屠宰場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)送檢的屠宰場(chǎng)血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明，屠宰場(chǎng)送檢34份血清，陽(yáng)性血清只有8份，合格率僅為23.53%。

2.3 散養(yǎng)戶豬場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果

對(duì)來(lái)自24個(gè)散養(yǎng)戶196份血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)，陽(yáng)性血清有85份，合格率為43.37%。

2.4 不同日齡豬PRRS抗體檢測(cè)結(jié)果

將732份血清按不同年齡分群，不同年齡段的豬血清中PRRS抗體合格率差異較大，母豬、育肥豬、保育豬、仔豬的血清抗體合格率分別為96.55%、61.78%、89.58%、85.42%（表2）。

2.5 某種畜場(chǎng)豬PRRS抗體跟蹤檢測(cè)結(jié)果

從2014年5月到9月，對(duì)來(lái)自某種畜場(chǎng)140份血清進(jìn)行檢測(cè)，其中來(lái)自母豬的血清有44份，保育豬的有48份，仔豬的有48份，合格率分別為100%，79.17%，85.42%（表3）。

3 小結(jié)與討論

本試驗(yàn)采用的進(jìn)口ELISA試劑盒，具有靈敏性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性良好等特點(diǎn)，使檢測(cè)結(jié)果更加可靠準(zhǔn)確，真實(shí)地反映出PRRS抗體水平的高低。

通過(guò)對(duì)來(lái)自10個(gè)規(guī)模場(chǎng)，2個(gè)屠宰場(chǎng)，24個(gè)散戶的732份血清進(jìn)行了檢測(cè)，PRRS抗體合格率為68.44%，稍低于國(guó)家規(guī)定的70%以上的要求。但規(guī)模養(yǎng)殖戶的合格率遠(yuǎn)高于散養(yǎng)戶，達(dá)81.27%，大部分規(guī)模戶抗體合格率達(dá)85%以上，而散養(yǎng)戶抗體合格率僅為43.37%，這可能與規(guī)模戶的重視程度高，免疫規(guī)范，合理養(yǎng)殖有關(guān)。屠宰場(chǎng)34份血清抗體合格率只有23.53%，這可能首免120 d后，抗體水平處于下降期有關(guān)，與田召芳等[3]報(bào)道的結(jié)果相一致。

對(duì)不同年齡段的732份血清進(jìn)行PRRS抗體檢測(cè)，母豬的抗體合格率最高，其次是仔豬和保育豬，而育肥豬的抗體水平最低。通過(guò)對(duì)某豬場(chǎng)的跟蹤檢測(cè)也得出同樣結(jié)果，且該豬場(chǎng)抗體水平高，抗體滴度均勻度小。特別是母豬，5個(gè)月的檢測(cè)，其抗體合格率始終保持在高水平，與周平等[4]報(bào)道的結(jié)果相符。

血清抗體的監(jiān)測(cè)是目前對(duì)免疫質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)或?qū)σ咔檫M(jìn)行預(yù)警預(yù)報(bào)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的常用方法，定期對(duì)豬場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，對(duì)于了解豬場(chǎng)PRRS抗體水平變化和進(jìn)行免疫效果評(píng)估，制定科學(xué)合理的免疫程序，指導(dǎo)生豬養(yǎng)殖，特別是對(duì)指導(dǎo)散養(yǎng)戶養(yǎng)殖，都是十分有利的。

參考文獻(xiàn)：

[1] 方六榮.豬繁殖與呼吸綜合征“自殺性”DNA疫苗與活病毒載體疫苗研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[2] 范京惠，劉 媛，左玉柱.河北省豬繁殖與呼吸綜合征血清學(xué)調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī)，2011，43（3）： 69-70.

[3] 田召芳，柳 林，李春蕾，等.煙臺(tái)地區(qū)高致病性豬藍(lán)耳病抗體水平及疫苗免疫效果調(diào)查[J].中國(guó)畜牧雜志，2010，46（6）： 68-70.

[4] 周 平，張華全，羅才慶，等. 2011 年龍巖地區(qū)部分豬場(chǎng)豬病血清學(xué)調(diào)查情況[J].養(yǎng)豬，2012 （3）： 116-118.