孫幫燕 何文姬 楊曉紅 張楨

【摘 要】 維生素D是一組具有生物活性的脂溶性類固醇衍生物，25-羥基維生素D3是它的代謝物中較為重要的一種，在兒童保健和多種兒童疾病的診療中具有重要意義。筆者就其含量測定及臨床研究進展作一綜述。

【關鍵詞】 25-羥基維生素D3;含量測定;臨床研究;兒童

【中圖分類號】R446.11 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）15-0037-02

The progress for the determination and clinical study of 25-Hydroxyvitamin D3 in childrens serum

SUN Bang-yan1 HE Wen-ji2 YANG Xiao-hong2 ZHANG Zhen2

（1.Kunming Medical University postgraduate department，Kunming 650500，China;

2.Department of Clinical Laboratory，Children Hospital of Kunming Medical University， Kunming 650228， China

Abstract：Vitamin D is a group of fat-soluble steroid derivatives which have biological activity.25-（OH）-D3 is the relatively important one of the VitDs metabolism substance， playing an critical role in the diagnosis and treatment of children diseases and healthy. This article is a review centering on the progress of determination and clinical study.

Keywords：25-Hydroxyvitamin D3; determination; clinical application; children

維生素D是人體必須的營養(yǎng)素之一，對人體健康有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)[1]，維生素D除具有傳統(tǒng)的調(diào)節(jié)鈣磷代謝和骨骼健康等作用外，還具調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、防治代謝綜合征等骨外生物效應。有研究表明[2]，維生素D還具有抗炎、減少氣道重塑等能力。對于兒童，合理的維生素D濃度對預防兒童佝僂病、腫瘤、1型糖尿病、心臟疾病和骨質(zhì)疏松的發(fā)生有較大作用[3]。因此，實時對體內(nèi)的維生素D進行含量檢測，并適時補充維生素D對兒童的健康尤為重要。

維生素D包括維生素D2（麥角骨化醇）和維生素D3（膽骨化醇）兩者。前者存在于植物中，后者系由人體或動物皮膚中的7-脫氫膽固醇經(jīng)日光中紫外線的光化學作用轉(zhuǎn)變而成。維生素D在體內(nèi)必須經(jīng)過兩次羥基化作用后才能發(fā)揮生物效應。首先，經(jīng)肝細胞發(fā)生第一次羥基化，生成25-羥基維生素D3（25-（OH）D3），然后循環(huán)中的25-（OH）D3 與α-球蛋白結(jié)合被運載到腎臟，在近端腎小管上皮細胞線粒體中的1-α羥化酶的作用下再次羥化，生成有很強生物活性的1，25-二羥維生素D，即1，25-（OH）2D3[2]。雖然其代謝物中1，25-（OH）2D3的生物活性是最強的，但25-（OH）D3是循環(huán)中維生素D的主要形式，其含量在血液中相對較高，半衰期也較長，因此一般認為臨床上可以通過測定血中25-（OH）D3的含量來了解維生素D的營養(yǎng)狀況[3，4]。

目前，國內(nèi)外對25-（OH）D3的含量監(jiān)測和臨床研究越來越多，但由于試劑盒之間的差異和方法不同，實驗室之間結(jié)果也有一定的差異。本文就其研究進展和存在的問題進行綜述。

1 含量測定

25-（OH）D3的經(jīng)典測定法是競爭性蛋白結(jié)合測定法和放免法[5]。目前，國內(nèi)外測定25-（OH）D3的方法主要分兩類：酶聯(lián)免疫法和色譜法。酶聯(lián)免疫法有競爭性蛋白結(jié)合測定法和放免法，色譜法有高效液相色譜法、超高效液相色譜法和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測法。酶聯(lián)免疫法的樣品處理過程較簡單，耗時少，但具有嚴重的交叉反應現(xiàn)象，因此國內(nèi)外已使用較少。色譜法樣品處理過程相對復雜，但具有特異性高、靈敏度高、檢測速度快的優(yōu)點，是目前臨床使用較多的方法[5，6，7，8]。其中，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測法的檢測時間最短，但成本高;高效液相色譜法檢測時間相對較長，成本較前兩者均低;而超高效液相色譜法的成本和檢測速度均介于兩者之間，可以在臨床上推廣使用。

2 臨床應用

2.1 與兒童佝僂病的關系 第七版的《兒科學》中明確提出維生素D的含量檢測和骨骼X線的檢查為診斷維生素D缺乏性佝僂病的金標準，其中血清25-（OH）D3水平為最可靠的診斷標準[2]。王曉燕等[9]的研究中佝僂病患兒血清25-（OH）D3水平明顯低于非佝僂病小兒，證實了它對兒童健康的重要性。

2.2 與兒童肥胖的關系 國內(nèi)外研究均表明，兒童肥胖與體內(nèi)缺乏25-羥基維生素有關，尤其是腹部脂肪積聚。分析其原因，一是肥胖兒童的戶外活動時間少，皮膚暴露于紫外線中的時間亦少，其體內(nèi)合成的25-（OH）D3相應減少;二是維生素D作為一種脂溶性分子，它在脂肪中的溶解和儲存也可能影響了循環(huán)水平，從而導致兒童體重增加。但目前對于補充維生素D是否改善肥胖及其合理劑量尚無定論，肥胖與維生素D的關系及前瞻性研究值得進一步探討[10，11]。

2.3 與兒童免疫性疾病的關系 研究證實，25-（OH）D3可影響多種細胞的生長和分化，是一種重要的免疫調(diào)節(jié)劑，是類固醇激素超家族中的一員。研究發(fā)現(xiàn)維生素D受體的多樣性與T輔助淋巴細胞的發(fā)育失衡有關，從而引起免疫系統(tǒng)代謝性疾病，如兒童呼吸系統(tǒng)感染疾?。ㄈ缰夤苎譡12]，支氣管哮喘[15，17]和肺炎[16]）、Ⅰ型糖尿病[13]、白癜風[18]等。

2.3.1 與兒童Ⅰ型糖尿病的關系 王凌飛等[13]的研究表明，Ⅰ型糖尿?。═1dM）患兒體內(nèi)的血清25-羥基維生素D的水平明顯低于正常健康兒童?；谔悄虿〉牧餍胁W及對T1dM動物模型的研究表明，T1dM的發(fā)生、發(fā)展與Th1/Th2平衡狀態(tài)密切相關，而25-羥基維生素D可以糾正T1dM的這種免疫失衡狀態(tài)。這些研究預示，維生素D可能成為T1dM早期預防、干預的新手段[13，14]。

2.3.2 與人博卡病毒感染肺炎的關系 萬國鳳等[16]的研究表明，人博卡病毒感染肺炎患兒體內(nèi)的血清25-（OH）D3水平明顯低于正常健康兒童。25-（OH）D3對免疫系統(tǒng)有著重要的調(diào)節(jié)作用，其機制是維生素D的受體在體內(nèi)分布較廣，免疫細胞中均有表達，它作為一種調(diào)節(jié)劑，抑制炎性細胞因子及刺激抗微生物多肽的產(chǎn)生，從而發(fā)揮預防肺部感染的作用。

2.3.3 與兒童患白癜風的關系 楊蘇等[18]的研究結(jié)果表明，白癜風患兒體內(nèi)的25-（OH）D3含量顯著低于正常健康兒童。由于維生素D影響新陳代謝，尤其對免疫系統(tǒng)具有廣泛作用，且參與黑素合成，而白癜風的發(fā)病與自身免疫及黑素細胞破壞有關，因此推測兒童白癜風的發(fā)病可能與維生素D含量低有關，維生素D缺乏可能參與了白癜風發(fā)病的某個環(huán)節(jié)，如免疫功能失調(diào)，黑色素合成障礙。但該研究樣本數(shù)尚小，有待于擴大樣本數(shù)進一步研究，對維生素D與疾病的嚴重性、活動性的關系以及補充維生素D是否有助于白癜風臨床改善尚有待于進一步探討。

2.4 與兒童缺鐵性貧血的關系 缺鐵性貧血為兒童常見的營養(yǎng)缺乏性疾病之一，尤其是嬰幼兒期。黃梅等[19]的研究表明缺鐵也可能削弱腸道對維生素D的吸收而導致維生素D的缺乏。補充鐵劑能促進維生素D在腸道的吸收，提高血清維生素 D水平，改善維生素D缺乏狀況。

3 25-羥基維生素D3的正常值范圍

到目前為止，國內(nèi)關于25-（OH）D3的正常值范圍暫無統(tǒng)一標準，表1為部分文獻中25-羥基維生素D3的正常值范圍。究其原因，兒童體內(nèi)25-（OH）D3的值與年齡、居住環(huán)境、喂養(yǎng)方式、飲食習慣、戶外活動、反復呼吸道感染有關，且個體差異較大[20，21，22，23]。如年齡越小越易發(fā)生維生素D缺乏，紫外線較強的地區(qū)維生素D吸收較多，夏秋季節(jié)25-（OH）D3含量的均值高于春冬。

綜上所述，25-（OH）D3的含量檢測及臨床研究對兒童的健康有重要意義，但仍有許多問題需要進一步研究、探討，以便在臨床上為患兒的診治提供重要的理論依據(jù)。

參考文獻

[1]陳海燕， 陳夢瑩， 彭璐婷， 等. 肥胖兒童血清25羥維生素D水平及其臨床意義[J].中國兒童保健雜志， 2013， 3（21） ：247-250.

[2]王劍， 朱瑋琪， 沈立松， 等. 高效液相色譜法測定血清中25-羥基維生素D3 [J].檢驗醫(yī)學， 2008， 4（23）：380-383.

[3]沈曉明， 王衛(wèi)華.兒科學[M] .7版.人民衛(wèi)生出版社，2008：65-70.

[4]Paul Glendenning ， Gerard T，Chew ， Hannah M，et al.Serum 25-hydroxyvitamin D levels in vitamin D-insuf？cient hip fracture patients after supplementation with ergocalciferol and cholecalciferol[J].bone， 2009，45：870-875.

[5]Amy K， Saenger， PhD， Thomas J，et al.Quantification of Serum 25-Hydroxyvitamin D2 and D3 Using HPLC-Tandem Mass Spectrometry and Examination of Reference Intervals for Diagnosis of Vitamin D Deficiency[J].Clinical Chemistry，2006，125：914-920.

[6]F. Ortiz Boyer，J.M. Ferna′ndez Romero，M.D. Luque de Castro，et al.Determination of vitamin D3 hydroxymetabolites in plasma at the sub-part per trillion levels using on-line cleanuppreconcentration and HPLC-？uorimetric post-column derivatisation[J]. Talanta，1999，50：57-66.

[7]徐軍， 張慧芬， 王玨， 等. HPLC法測定血中25-羥基維生素D3的含量[J]. 兒科藥學雜志， 2001， 1（7）：11-13.

[8]張榮， 顧景凱， 尹磊， 等.HPLC-MS/MS法檢測吉林省427例兒童血漿25（OH）D的水平[J].中國婦幼保健， 2013， 28：320-322.

[9]王曉燕， 金春華， 吳建新， 等. 血清25-羥維生素D在佝僂病診斷中的應用價值[J]. 中國當代兒科雜志， 2012， 10（12）： 767-770.

[10]肖玉聯(lián)， 都萍， 譚美珍， 等. 單純性肥胖兒童血清維生素D水平檢測及干預效果觀察[J]. 廣東醫(yī)學院學報， 2012， 3（30）：270-271.

[11]王欲琦，王云雙，靳艷茹，等.學齡前兒童身體質(zhì)量指數(shù)和維生素D水平的關系[J].中國婦幼健康研究，2012，6（23）：709-834.

[12]江志貴，吳潔，劉玲，等.毛細支氣管炎患兒血清25-（OH）D3與免疫球蛋白水平的變化[J]. 中國當代兒科雜志，2012，8（14）：578-580.

[13]王凌飛， 羅淑穎， 陳永興， 等. 1型糖尿病患兒血清25-羥基維生素D濃度變化[J]. 中國實用醫(yī)藥， 2013， 4（8）：60.

[14]高真.25-羥維生素D與兒童1型糖尿病及酮癥酸中毒的相關性研究[J]. 中國現(xiàn)代應用藥學， 2012， 5（29）：466-468.

[15]趙雪琴， 吳震， 張嫻， 等. 哮喘患兒25-羥基維生素D3與部分Th1/Th2因子相關性探討[J]. 安徽醫(yī)學， 2013， 2（34）：154-156.

[16]萬鳳國， 邵雪軍， 季正華， 等. 人博卡病毒感染肺炎患兒25羥基維生素D水平及免疫功能變化[J].實用醫(yī)學雜志， 2013，13（29）：2160-2162.

[17]王焱.維生素D缺乏與嬰幼兒哮喘發(fā)病的關系[J].貴陽醫(yī)學院學 報，2012，5（37）：523-525.

[18]楊蘇， 楊瀟， 李敏， 等.兒童白癜風患者血清中25-羥維生素D水平的檢測[J].南京醫(yī)科大學學報（自然科學版）， 2012， 10（32）：1436-1438.

[19]黃梅，錢幼瓊.缺鐵性貧血患兒血清25-羥膽骨化醇濃度變化[J].中華兒科雜志，1995，6（33）：355-357.

[20]Alexandra Jungert， Monika Neuh？user-Berthold.Dietary vitamin D intake is not associated with 25-hydroxyvitamin D3 or parathyroid hormone in elderly subjects， whereas the calcium-to-phosphate ratio affects parathyroid hormone[J].Nutrition research，2013，33：661-667.

[21]陳志興，胡國華.小兒反復呼吸道感染與血清25羥基維生素D3、免疫球蛋白的關系[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥雜志，2013，8（20）：27-28.

[22]盛曉陽.中國兒童維生素D、鈣營養(yǎng)的流行病學資料[J].Chinese Joumal of Practical Pediatrics Mar，2012，3（27）：180-182.

[23]于艷.周口市240名0～3歲兒童佝僂病患病情況調(diào)查及血25（OH）D3水平分析[J].中國婦幼保健，2013， 28：2756-2758.

[24]莫麗亞，黃彩芝，鄧永超，等. 湖南地區(qū)少年兒童維生素D營養(yǎng)狀況分析[J].中國婦幼保健，2012，27：4926-4928.

[25]侯雅萍，陳勁，俞菁，等. 上海長寧區(qū)15306例0～2歲兒童25羥基維生素D檢測值分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2013，7（34）：814-815.

（收稿日期：2014.05.13）