■卜遠(yuǎn)富 楊嚴(yán)鷗 萬 全 陳 路 姚 峰

（安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，安徽合肥 230036）

黃鱔(Monopterus albus)是我國常見的一種名優(yōu)淡水養(yǎng)殖魚類，目前市場上的黃鱔主要是依靠人工網(wǎng)箱養(yǎng)殖獲得。在養(yǎng)殖中常使用的飼料為冰鮮魚與黃鱔商品膨化飼料的混合物（質(zhì)量比1∶1），由于商品飼料魚粉含量高，導(dǎo)致其價(jià)格高，在一定程度上制約了黃鱔養(yǎng)殖的發(fā)展，因此，用其它廉價(jià)蛋白原料替代高魚粉的商品飼料成為一種現(xiàn)實(shí)的考慮。大米蛋白粉蛋白含量高，具有低抗原性，而且價(jià)格低廉，在中國稻米產(chǎn)區(qū)已形成一定的產(chǎn)量，因此也可以考慮用來作為替代物。劉堯等曾以復(fù)合植物蛋白替代魚粉飼養(yǎng)凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)，其中混合有部分大米蛋白粉。但以大米蛋白粉作為主要替代物的研究目前還非常缺乏。本試驗(yàn)以大米蛋白粉替代高魚粉含量的黃鱔商品飼料，探討這種替代對黃鱔生長、飼料利用及轉(zhuǎn)氨酶、脂肪代謝酶等生理指標(biāo)的影響，以期為黃鱔配合飼料的研究提供新的資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

循環(huán)水養(yǎng)魚系統(tǒng)主要包括20個(gè)塑料水族箱（60 cm×60 cm×65 cm），水深3～4 cm，水源為曝氣自來水，使用沸石、活性炭凈化水體，真空泵提水，箱內(nèi)放置散氣石，以通風(fēng)管連接羅茨鼓風(fēng)機(jī)間斷性充氧。

試驗(yàn)魚購買自合肥市肥西縣，地籠撲捉。挑選健壯無傷者暫養(yǎng)1周，暫養(yǎng)期間投喂對照組飼料。

試驗(yàn)共5種飼料，每種飼料均含50%魚糜（鮮重），對照組飼料另外的50%為商品飼料，4種試驗(yàn)組飼料則分別以大米蛋白粉替代商品飼料的25%、50%、75%、100%，飼料配方及營養(yǎng)成分見表1。每次使用時(shí)先將新鮮鳙魚切塊，用小型粉碎機(jī)制成魚糜，再按質(zhì)量比例與粉狀黃鱔商品飼料與（或）大米蛋白粉混合，揉搓均勻，捏成面團(tuán)狀使用。

表1 飼料配方與飼料營養(yǎng)成分

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始前，將魚饑餓24 h，然后隨機(jī)取樣稱重，每箱放入試驗(yàn)魚30尾，稱取總重量，每種飼料4個(gè)重復(fù)，共20個(gè)水族箱。試驗(yàn)持續(xù)30 d，每日18:30喂食一次（以30 min內(nèi)吃完為準(zhǔn)）。每天8:00和19:00各換水一次。水溫(24±1.5)℃。節(jié)能日光燈提供照明，光照時(shí)間8:00～20:00，瞬時(shí)斷開。

1.3 樣品采集

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)將黃鱔饑餓24 h，稱取每箱總重量并計(jì)數(shù)每箱尾數(shù)。每箱隨機(jī)取5尾，注射器尾靜脈抽血，4 000 r/min離心，吸取上清液置于液氮罐中保存；試驗(yàn)魚置于冰盤上，毀髓處死，取肝臟保存于液氮罐中，留作后續(xù)分析使用。

1.4 樣品采集測定

測定新鮮魚糜、商品飼料、大米蛋白粉以及4種混合飼料的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪及灰分含量。干物質(zhì)測定在105℃下烘干至恒重，粗蛋白用凱氏定氮法測定，粗脂肪用索氏抽提法測定，灰分通過馬弗爐550℃燃燒測定。

血清葡萄糖、γ-谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶活力、血清總膽固醇含量、血清甘油三酯含量、血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力、血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活力、肝臟總脂酶含量（脂蛋白脂酶、肝脂酶）、脂肪酸合成酶活力等指標(biāo)采用上海江萊生物科技有限公司試劑盒測定，測定步驟見試劑盒說明書。

1.5 數(shù)據(jù)處理

增重率(%，WGR)=(Wt-W0)/W0×100；

飼料系數(shù)（FC)=W/(Wt-W0)；

成活率(%，SR)=Nt/N0×100。

式中：W0——初始黃鱔均重；

Wt——試驗(yàn)結(jié)束時(shí)黃鱔均重；

W——飼料總重；

Nt——終末尾數(shù)；

N0——初始尾數(shù)。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS19.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA)，用Duncan's法多重比較組間差異，差異顯著為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 替代對黃鱔生長及飼料利用的影響（見表2）

表2 替代對黃鱔的生長及飼料利用的影響

試驗(yàn)期間各組黃鱔無死亡現(xiàn)象，成活率無差異。

由表2可知，隨著大米蛋白粉替代比例的增加，黃鱔增重率顯著下降(P＜0.05)，飼料系數(shù)顯著增加(P＜0.05)。大米蛋白粉替代越多，黃鱔生長效果越差。

2.2 替代對黃鱔相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響(見表3及表4)

表3 替代對黃鱔轉(zhuǎn)氨酶等指標(biāo)的影響

表4 替代對黃鱔脂肪代謝等指標(biāo)的影響

由表3可知，與對照組相比，隨著大米蛋白粉含量的增加，血清葡萄糖含量不斷上升，谷草轉(zhuǎn)氨酶活力下降，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活力和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力呈拋物線變化，在50%組升高顯著(P＜0.05)。

由表4可知，血清總膽固醇含量在100%替代時(shí)顯著升高(P＜0.05)；血清甘油三酯含量、肝臟脂蛋白酶活力、肝脂酶活力以及肝臟總脂酶活力呈拋物線變化，在50%或75%替代水平顯著升高(P＜0.05)。

3 討論

3.1 替代對黃鱔生長的影響

黃鱔屬肉食性魚類，飼料蛋白水平的下降會導(dǎo)致其飼料系數(shù)顯著上升，生長速度顯著下降，飼料中動物性蛋白的比例減少也會導(dǎo)致相同結(jié)果。本研究中，大米蛋白粉替代水平從0%遞增到100%時(shí)，因大米蛋白粉的蛋白含量高于商品飼料，因此飼料蛋白水平?jīng)]有下降，相反有所上升，但隨著替代增加，黃鱔的飼料系數(shù)顯著上升(P＜0.05)，增重率顯著下降(P＜0.05)，這應(yīng)該與不同飼料中蛋白來源不同有關(guān)。黃鱔商品飼料中動物蛋白偏多，大米蛋白粉對其替代越多，整個(gè)飼料中植物蛋白就越多，動物蛋白相應(yīng)就越少，因此出現(xiàn)這種結(jié)果。從生長效果考慮，大米蛋白粉替代部分黃鱔商品飼料的比例應(yīng)小于25%。

3.2 替代對黃鱔相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響

正常情況下，血清中轉(zhuǎn)氨酶活力較小。當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí)，細(xì)胞膜的通透性加大，大量谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶滲入血液，血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活力升高。本試驗(yàn)中，隨著替代比例增加（＜100%），血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力顯著升高，這可能表明替代對肝臟造成了損害。有研究顯示，作為植物蛋白來源的菜粕對魚類的肝組織有損害作用，飼料中菜粕含量越高，肝臟組織結(jié)構(gòu)損害越嚴(yán)重。不過，在完全替代時(shí)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力顯著下降(P＜0.05)，可能與完全替代組的試驗(yàn)魚飼料利用率過低、生長過慢有關(guān)。烏鱧在機(jī)體代謝水平下降時(shí)導(dǎo)致谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力顯著下降，本試驗(yàn)結(jié)果與之類似。

研究顯示，肝臟γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的活力呈中度升高或者高度升高時(shí)，表明肝臟功能異常。Burrells等也指出，高含量的植物蛋白對虹鱒的肝臟造成損傷。本試驗(yàn)中，25%與50%替代組的肝臟γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活力顯著上升，這可能表明替代對魚體肝臟產(chǎn)生了負(fù)面影響，但隨著替代升高，75%、100%組的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活力反而下降，原因可能與上段的分析相似，可能與這兩組黃鱔生長過慢有關(guān)，這一問題還有待進(jìn)一步研究。

血清甘油三酯是反映體內(nèi)脂肪代謝水平的重要生化指標(biāo)。翹嘴紅鲌（Erythrocutler ilishaeformis Bleeker）攝食高碳水化合物飼料后，血清甘油三酯濃度顯著升高。本試驗(yàn)中，黃鱔在75%替代組血清甘油三酯含量顯著升高(P＜0.05)，與翹嘴紅鲌的研究結(jié)果相似。但是，完全替代時(shí)該指標(biāo)出現(xiàn)下降趨勢，這也可能與黃鱔生長速度過慢有關(guān)。

脂蛋白脂酶是甘油三酯降解的限速酶，參加各種脂蛋白的代謝，肝脂酶主要參與高密度脂蛋白的代謝，脂蛋白脂酶與肝脂酶活性的降低會引發(fā)高脂血癥。本試驗(yàn)中，隨著替代水平升高，兩種酶的活力顯著升高，分別在50%與75%替代水平達(dá)到最大(P＜0.05)，總脂酶（脂蛋白脂酶與肝脂酶的合稱）也呈相似的變化趨勢，這可能是機(jī)體對碳水化合物水平升高的一種適應(yīng)性反應(yīng)，以避免高血脂癥的發(fā)生。對雞的研究結(jié)果也顯示，其血液中總脂酶的濃度也隨大米蛋白粉肽含量的升高而顯著升高。但本試驗(yàn)中，完全替代組這些指標(biāo)呈現(xiàn)下降趨勢，這同樣可能與黃鱔生長速度過慢有關(guān)。

（參考文獻(xiàn)19篇，刊略，需者可函索）