董元煥，楊　靜，羅彥英

胃腸道間質(zhì)瘤相關(guān)分子標(biāo)記物的研究進(jìn)展

董元煥1，楊靜1，羅彥英2

胃腸道間質(zhì)瘤（GIST）是消化道最常見的間葉源性腫瘤，年發(fā)病率為2/(10萬)，無明顯種族及性別差異。目前公認(rèn)胃腸道間質(zhì)瘤起源于cajal間質(zhì)細(xì)胞分化的未定型的間充質(zhì)細(xì)胞，具有與胃腸道典型平滑肌腫瘤和神經(jīng)鞘瘤、神經(jīng)纖維瘤不同的特點(diǎn)。隨著免疫組化及分子生物學(xué)的發(fā)展，GIST成為消化道腫瘤的研究熱點(diǎn)之一。因此，尋找靈敏特異的診斷標(biāo)記對于GIST診斷、預(yù)后、發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)均有重要意義。

胃腸道間質(zhì)瘤；診斷；分子標(biāo)記物

胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumor，GIST)是一組由未分化或多潛能的梭形或上皮樣細(xì)胞組成的消化道間葉源性腫瘤[1]，無明顯種族及性別差異[2]。GIST被認(rèn)為起源于cajal間質(zhì)細(xì)胞及其前體細(xì)胞，85%～95%的病例具有c-kit或PDGFRA活化因子突變[3-4]，具有廣譜的生物學(xué)行為。此類腫瘤對傳統(tǒng)放療、化療高度耐受，發(fā)病率大約為（10～20）/ (100萬)[5-6]，不同于典型的平滑肌和神經(jīng)源性腫瘤。目前較公認(rèn)的GIST定義是，胃腸道間質(zhì)瘤是胃腸道除平滑肌腫瘤、神經(jīng)鞘瘤及神經(jīng)纖維瘤以外，富于表達(dá)CD117的梭形、上皮樣或多形性細(xì)胞的間葉源性腫瘤。臨床可以表現(xiàn)從良性到惡性[7]。隨著免疫組化及分子生物學(xué)的發(fā)展，GIST成為消化道腫瘤的研究熱點(diǎn)之一。因此，尋找靈敏特異的診斷標(biāo)記對于GIST診斷、預(yù)后、發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)均有重要意義?，F(xiàn)就胃腸道間質(zhì)瘤診斷相關(guān)的分子標(biāo)記物做一綜述。

1　CD117

CD117是一種由c-kit原癌基因編碼的相對分子質(zhì)量為145 kDa的跨膜蛋白受體，是酪氨酸激酶受體家族Ⅲ型成員，其配體為干細(xì)胞因子(SCF)。CD117與配體SCF結(jié)合后，可激發(fā)酪氨酸激酶磷酸化，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長。而KIT介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)對造血祖細(xì)胞、Cajal間質(zhì)細(xì)胞、黑色素細(xì)胞等的正常發(fā)育和存活起關(guān)鍵作用。CD117基因發(fā)生突變可刺激腫瘤細(xì)胞的持續(xù)增殖和抗凋亡信號的失控，有利于腫瘤的惡性克隆。CD117常表達(dá)于造血干細(xì)胞、生殖細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、胃腸道cajal細(xì)胞及其對應(yīng)腫瘤[8]。CD117蛋白檢測是目前GIST診斷的特異性標(biāo)記物，但仍有5%左右CD117蛋白陰性表達(dá)的GIST診斷存在困難。CD117不僅是GIST高敏感性和高特異性的診斷標(biāo)志，而且以CD117為靶點(diǎn)的抑制物格列衛(wèi)已經(jīng)應(yīng)用于胃腸道間質(zhì)瘤的臨床治療，并取得良好療效[9]。僅少數(shù)病例經(jīng)靶向治療后在免疫表型和鏡下形態(tài)上可有所改變，包括CDll7失表達(dá)[10]，可發(fā)生橫紋肌肉瘤樣分化[11]或去分化[12]等。

2　DOG1

DOG1蛋白是由DOGl基因編碼的分子質(zhì)量為114 kDa的蛋白質(zhì)，DOGl基因定位于人類染色體11q13，包含26個外顯子，編碼蛋白產(chǎn)物含986個氨基酸，具有8個跨膜區(qū)段的膜蛋白，是一種鈣離子激活的氯離子通道。它可以選擇性地表達(dá)在GIST中，DOG1在GIST中敏感性為96.9%，半數(shù)以上為彌漫性、強(qiáng)陽性表達(dá)，重復(fù)性好，可靠程度高。在CD117散在、灶性弱陽性的組織中，DOG1多數(shù)為明顯的陽性或強(qiáng)陽性表達(dá)，使免疫組化結(jié)果的判讀更加客觀。Abdel-Hadi等[13]采用免疫組化研究DOG1蛋白在47例GIST中的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，原發(fā)于胃的GIST組織中DOG1表達(dá)(62.1%)明顯高于腸道GIST(22.2%)。

綜合以上兩種抗體，多組大宗病例報道顯示CD117和DOG1在GIST中的表達(dá)具有高度一致性[14-16]。但有少數(shù)病例可表達(dá)不一致：（1）免疫表型為CD117（-）/DOG1（+）者在組織學(xué)上多為上皮樣型，分子檢測常顯示PDGRFA基因突變，并可為D842V突變。（2）免疫表型為CD117（+）/DOG1（-）的病例須排除其他腫瘤，如惡性黑色素瘤、副神經(jīng)節(jié)瘤和精原細(xì)胞瘤等。對于免疫表型為CD117（-）/DOG1（-）的病例，如仍考慮為GIST時，需加做分子檢測，如有c-kit或PDGFRA基因突變時則可診斷為GIST，如無c-kit或PDGFRA基因突變時則需考慮是否有其他類型腫瘤的可能性，不可輕易診斷為野生型GIST。對于CD117和DOG1陽性，但分子檢測無c-kit或PDGFRA基因突變者，應(yīng)考慮是否有野生型GIST的可能性。需注意，一些非GIST腫瘤也可表達(dá)CD117或DOG1[17]，判斷時應(yīng)注意加以鑒別。

3　CD34

CD34是人造血前體細(xì)胞抗原，是相對分子質(zhì)量約11 500的高度糖基化的Ⅳ型跨膜蛋白，存在于人體造血干細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中，臨床上廣泛用于血管內(nèi)皮標(biāo)記及一些腫瘤的診斷。CD34在GIST中陽性表達(dá)率為50%～80%，亦多為彌漫性強(qiáng)表達(dá),其特異性較CD117差，但CD34與CD117和DOG1配伍使用時在GIST的診斷和鑒別診斷中仍具有較高的價值。

4　Ki-67

Ki-67抗體由Gerds等用霍奇金瘤系L428細(xì)胞的粗核成分免疫鼠后首次制備。Ki-67是由兩條分子量為345kDa和395kDa的多肽鏈組成的核蛋白，具有非組蛋白的特點(diǎn)，可能是為DNA復(fù)制提供場所的核基質(zhì)及染色體支架的一種組分。研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67是與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的核抗原，于細(xì)胞周期G1期開始表達(dá)，S期及G2期表達(dá)增加，M期達(dá)高峰，在細(xì)胞分裂晚期很快消失，G0期則無表達(dá)[18]。由于其半衰期短，能可靠而迅速地反映惡性腫瘤增殖率，現(xiàn)已成為檢測腫瘤細(xì)胞增殖活性簡潔和最可靠的指標(biāo)之一[19]。研究表明，Ki-67的陽性表達(dá)提示腫瘤侵襲性大、生長速度快、發(fā)生轉(zhuǎn)移的概率高[20]。有報道[21]稱Ki-67基因在結(jié)腸癌中與p53抑癌基因關(guān)系密切，P53目前被認(rèn)為是在腫瘤發(fā)生中最大的抑癌基因之一，該基因的缺失或表達(dá)下降均可促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，Ki-67基因的高表達(dá)與p53基因的下降呈正比關(guān)系，證明了ki-67與腫瘤發(fā)展的密切關(guān)系。Selz等[22]對699例病理淋巴結(jié)陰性均行乳腺癌改良根治術(shù)的乳腺癌患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67高表達(dá)(臨界值為20%)是獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)，該蛋白高表達(dá)增加局部復(fù)發(fā)風(fēng)險。

5　S-100

S-100蛋白最初從牛腦中分離出的一種可溶性酸性蛋白因其能溶于100%硫酸銨溶液而得名，是一個酸性的鈣離子結(jié)合蛋白家族，主要存在于脊椎動物中，相對分子質(zhì)量為(1.0～1.2)×104，具有EF手型結(jié)構(gòu)，具備細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外調(diào)節(jié)活性，參與多種細(xì)胞活動。S-100蛋白是一種神經(jīng)元周圍成分的標(biāo)志物,在先天性巨結(jié)腸活檢標(biāo)本中，神經(jīng)纖維及Schwann細(xì)胞對S-100均呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。在胃腸道間質(zhì)瘤中S-100也有很好的特異性，特別是在CD117陰性表達(dá)的間質(zhì)瘤中，聯(lián)合檢測DOG1及S-100可以提高CD117陰性GIST的敏感性及特異性，可降低GIST患者的誤診率，尤其可利用在某些與神經(jīng)鞘瘤難以鑒別的GIST中。聯(lián)合檢測DOG1和S-100更加有利于CD117陰性GIST的診斷和鑒別診斷。對患者是否行靶向治療（格列衛(wèi)）提供了可靠的依據(jù)。

6　α-SMA、MSA、蛋白基因產(chǎn)物9.5

GIST亦可有肌源性標(biāo)記物的表達(dá)如α平滑肌肌動蛋白(smooth muscle actin，α-SMA)、肌特異性肌動蛋白(muscle specific action，MSA)、蛋白基因產(chǎn)物9.5(protein gene product 9.5，PGP 9.5)等。但這些標(biāo)記物大多在腫瘤中呈局灶弱陽性，偶爾范圍較廣，而肌間蛋白(desmin)幾乎均為陰性。

7　展望

近年來腫瘤分子標(biāo)記物的研究越來越多，不僅有助于提高腫瘤的正確診斷率，而且在疾病治療中能夠及時發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)，以利進(jìn)行生物治療或新藥研發(fā)。因此，選擇特異的分子生物學(xué)標(biāo)記，對于胃腸道間質(zhì)瘤的早期診斷、治療方式和預(yù)后均有重要意義。

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（收稿：2014-10-06修回：2015-06-12）

（責(zé)任編輯周振理）

R730.262

A

1007-6948(2015)04-0429-03

10.3969/j.issn.1007-6948.2015.04.032

1.天津市寧河縣醫(yī)院病理科（天津 301500）

2.天津市南開醫(yī)院病理科（天津 300100）

董元煥，E-mail：dongyuanhuan1@163.com