張文文 周金慧 郭偉華 李熠 吳黎明 趙靜

2014年國內外蜂產(chǎn)品質量安全研究進展

張文文 周金慧 郭偉華 李熠 吳黎明 趙靜

（中國農(nóng)業(yè)科學院蜜蜂研究所；農(nóng)業(yè)部蜂產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗測試中心，北京100093）

本文總結了2014年國內外蜂產(chǎn)品質量安全研究的最新進展，分析了今年所有文獻的數(shù)據(jù)庫分布和研究領域分布情況。以實例的形式闡述了蜂產(chǎn)品溯源分析的研究方法和研究思路，包括利用液相色譜法、液相色譜串聯(lián)質譜法、氣相色譜法、氣相色譜質譜法，原子熒光法和原子吸收法分析了酚酸類化合物和手性揮發(fā)性化合物等活性組分。這些研究對于蜂產(chǎn)品尤其是蜂蜜、蜂花粉和蜂膠的質量控制起著重要的作用。此外，本文還對今年出版的有關農(nóng)、獸藥殘留檢測的文獻進行分析，發(fā)現(xiàn)其主要特點是利用新的樣品前處理方法提高分析速度和靈敏度，實現(xiàn)高通量。這些研究對以后蜂產(chǎn)品的研究具有重要的借鑒意義。

蜂產(chǎn)品，溯源性分析，麥盧卡蜂蜜，農(nóng)獸藥殘留檢測

1 文獻分布情況

截止至2014年12月初，從美國湯姆森科技信息集團（web of science）、Google Scholar，Sciencedirect、Springerlink、EBSCO、美國分析化學協(xié)會（ACS）、英國分析化學協(xié)會（RSC）和Wiley等數(shù)據(jù)庫搜索結果顯示，今年大約有133篇被SCI期刊收錄的與蜂產(chǎn)品質量安全相關的英文文獻，涉及蜂蜜的有102篇、蜂王漿5篇、蜂膠21篇和蜂花粉5篇。

從中國知網(wǎng)、維普網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)知識服務平臺和國家知識產(chǎn)權局檢索數(shù)據(jù)庫的數(shù)據(jù)顯示，2013年與蜂產(chǎn)品質量安全相關的中文學術文獻約為111篇，涉及蜂蜜的有54篇、蜂王漿11篇、蜂膠35篇、蜂蠟1篇和蜂花粉10篇，主要涉及蜂產(chǎn)品中的獸藥和農(nóng)藥殘留，重金屬以及溯源分析。此外還包括研究專利6項和產(chǎn)品標準2項。

2 研究進展

2.1 獸藥抗生素殘留分析

在養(yǎng)蜂生產(chǎn)中由于環(huán)境因素的變化會導致蜜蜂產(chǎn)生疾病，如細菌性、病毒性和真菌性的幼蟲病和成蟲病。為了防止蜜蜂疾病發(fā)生，危害蜂群健康，蜂農(nóng)通過在蜂飼料中添加或在蜂箱內噴灑的方式給予蜜蜂一定劑量的抗生素。蜂產(chǎn)品中殘留的抗生素可通過食物鏈進入人體并會逐漸地蓄積，給人類健康造成極大威脅，長期使用容易產(chǎn)生耐藥性。近年來由于一些蜂農(nóng)不科學的使用抗生素或含有抗生素的蜂藥來防治蜜蜂幼蟲病，從而導致蜂產(chǎn)品中抗生素頻繁被檢出。因此，研究檢測蜂產(chǎn)品中抗生素殘留量具有很重要的意義。

氨基糖胺類藥物是包括蜂產(chǎn)品在內的畜禽產(chǎn)品和水產(chǎn)品中殘留檢測的難題。主要是因為鏈霉素和雙氫鏈霉素為強極性分子，在反相色譜柱上的保留性極差。如果加入庚烷磺酸鈉作為離子對試劑在酸性條件下與鏈霉素形成離子對，能夠增強其在反相色譜柱上的保留，但庚烷磺酸鈉為強陰離子試劑，不僅會在質譜上抑制其他正離子的信號，而且作為難揮發(fā)性鹽也容易在離子源中沉淀從而造成毛細管堵塞。一些方法中加入七氟丁酸作為離子對試劑提高色譜保留，但其酸性很強，對其他采用負離子模式檢測項目的質譜信號具有極強的抑制作用，需用氨水溶液對儀器進行較長時間的清洗才能消除這種抑制效應，此外七氟丁酸作為強酸長時間使用會對儀器的配件造成一定程度的腐蝕。張偉等[1]用庚烷磺酸鈉和磷酸鹽緩沖液提取蜂蜜中的鏈霉素和雙氫鏈霉素，經(jīng)SUPELCO LC-C18固相萃取凈化后，采用Thermo Aquasil-C18色譜柱分離，以含0.3%乙酸的乙腈溶液和0.3%乙酸水溶液為流動相進行梯度洗脫，多反應監(jiān)測模式測定，外標法定量。該方法在復溶液中加入低濃度的庚烷磺酸鈉提高鏈霉素在色譜柱上的保留。黃娟等[2]將蜂花粉樣品經(jīng)提取液提取、三氯甲烷沉淀蛋白后，用C18固相萃取柱進行富集凈化，采用HPLC-MS/MS對目標物進行定性確證和定量分析。在Protemix WCX-NP5色譜柱(100 mm×2.1 mm，5μm)上以5%(v/v)甲酸、20 mmol/L醋酸銨和甲醇為流動相進行梯度洗脫分離；質譜采集模式為電噴霧正離子監(jiān)測模式。鏈霉素和雙氫鏈霉素的檢出限(以信噪比(S/N)=3計)均為5 μg/kg，定量限(以S/N=10計)均為10 μg/kg；在10~200 μg/L的質量濃度范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系，相關系數(shù)(r)大于0.99。

雙水相萃取對于傳統(tǒng)有機相-水相的溶劑萃取來說是個全新的替代品。其原理是某些親水性高分子聚合物的水溶液超過一定濃度后可以形成兩相，并且在兩相中水分均占很大比例，即形成雙水相系統(tǒng)（aqueous two-phase system，ATPS）。利用親水性高分子聚合物的水溶液可形成雙水相的性質，Albertsson于20世紀50年代后期開發(fā)了雙水相萃取法（aqueous two-phase extraction），又稱雙水相分配法。20世紀70年代，科學家又發(fā)展了雙水相萃取在生物分離過程中的應用，為蛋白質特別是胞內蛋白質的分離和純化開辟了新的途徑。Xiao Yang等用基于雙水相萃取的離子液體-陰離子表面活性劑結合高效液相色譜測定蜂蜜中的Na2EDTA水溶液溶解，加入十二烷基硫酸鈉，離子液體1-辛基-3-甲基咪唑溴化物和氯化鈉?；旌衔锍曊鹗帲x心，雙水相形成并且分析物進入上層溶劑中。研究了離子液體的用量，鹽的種類和用量，樣品pH，提取時間和溫度對萃取效果的影響。四環(huán)素、土霉素、氯霉素的檢出限分別為5.8,8.2和4.2 μg/kg。該方法應用于樣品分析中，回收率在85.5~110.9%之間，相對標準偏差低于6.9%[3]。

特異性的吸附劑在復雜基質中待測物的吸附中起到至關重要的作用。Juan Hou等采用十六烷基三甲基溴化胺(α-ZrP-CTMAB)插入α-磷酸鋯作為新型的吸附劑進行固相萃取可以分離提取蜂蜜中的磺胺類藥物。采用輔助表面活性劑方法制備α-ZrP-CTMAB，同時對α-ZrP-CTMAB的吸附特性和提取效率進行了考察。選擇蜂蜜中的4種磺胺類藥物（SAs）作為分析模型，并且最終由液相色譜串聯(lián)質譜測定。SAs在3個添加水平（10,100和1000 ng/g）的回收率為58.7~99.3%，相對標準偏差2.69~7.48%。檢出限0.25~0.5 ng/g。和文獻報道的其他方法相比，該方法減少了有機試劑的耗費，簡化了樣品制備步驟。因此，修飾過的α-ZrP在分析復雜樣品中污染物時顯示了巨大的應用潛力[4]。

近幾年來，隨著分子印跡技術飛速發(fā)展，以分子印跡聚合物作為傳感器敏感材料的分子印跡電化學傳感器成為分子印跡技術應用研究的一個重要方向。分子印跡聚合物敏感材料具有耐高溫、高壓、酸、堿和有機溶劑，可用標準化學方法合成，不易被生物降解破壞，可多次重復使用，易于保存等優(yōu)點。Bin Song等采用高選擇性、高靈敏度的基于電化學傳感器的分子印跡（molecularly imprinted polymers，MIPs）技術測定蜂蜜中的紅霉素，MIPs作為選擇性識別元件提高了電化學傳感器的選擇性和靈敏性。首先制備MIPs，隨后用之制備分子印跡修飾碳糊電極（MIPs-CP）。制備的MIPs對于紅霉素表現(xiàn)出很高的吸附能力，最大結合量為93.5 mg/ g，模印因子為2.1。MIPs-CP電極結合示差脈沖伏安法（DPV）定量測定紅霉素。與非分子印跡修飾碳糊（NIPs-CP）電極相比，MIPs-CP電極對紅霉素能產(chǎn)生更好的響應電流，并且對與紅霉素結構相似的化合物具有很高的辨別能力。在優(yōu)化的條件下，線性校正范圍5×10-8~ 1.0×10-5mol/L，傳感器檢測限為1.9×10-8mol/L。這種選擇性好、靈敏度高的傳感器已經(jīng)成功應用于檢測蜂蜜和奶產(chǎn)品的紅霉素，在檢測大宗食品中殘留紅霉素的實際應用方面也展示出潛在的應用價值[5]。

適配體(Aptamer)是一類經(jīng)過指數(shù)富集配體系統(tǒng)進化(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX)技術，從隨機單鏈寡聚核苷酸文庫中得到的能特異性結合蛋白或其他小分子物質的單鏈寡聚核苷酸，可以是DNA也可以是RNA，長度一般為25～60個核苷酸。電化學適配體傳感器因其靈敏度高、專一性強、簡易輕巧、方法靈活多樣、微型化等優(yōu)點備受關注。研究者創(chuàng)建了一種基于間接競爭酶聯(lián)適配體的生物傳感器——一條經(jīng)過指數(shù)富集配體系統(tǒng)進化篩選出的76基體單鏈DNA適配體，用于識別和檢測蜂蜜中的四環(huán)素。檢出限為9.6×103ng/mL，線性范圍為0.01～100 ng/ mL，平均加標回收率為93.23%。這種適配體能夠簡便、高靈敏度地檢測食品中的四環(huán)素殘留，在開發(fā)檢測食品中四環(huán)素的酶聯(lián)適配體檢測試劑盒方面具有良好的應用前景[6]。

2.2 農(nóng)藥殘留分析

蜜蜂幼蟲染病后會大量的死亡，給蜂農(nóng)帶來巨大的經(jīng)濟損失。因此蜂農(nóng)通過對蜂巢噴灑農(nóng)藥以起到預防幼蟲病的作用，氟胺氰菊酯、氟氯苯菊酯、雙甲脒、溴螨酯和蠅毒磷是使用最廣泛的抗螨蟲藥。近些年，蜂農(nóng)開始逐漸使用其他種類的農(nóng)藥以避免耐藥性的產(chǎn)生。蜂花粉由蜜蜂采集環(huán)境中花粉經(jīng)簡單加工而成，花粉及蜜蜂攜帶的各種農(nóng)藥、其他環(huán)境污染物、微生物以及生物毒素等可能會進入蜂花粉中，從而對人類和蜜蜂健康造成潛在威脅，需引起更多關注。王祥云等采用改進的QuEChERS方法提取凈化蜂花粉中的農(nóng)藥等污染物殘留，以氣相色譜串聯(lián)質譜和液相色譜串聯(lián)質譜檢測了9個商品蜂花粉中114種農(nóng)藥等環(huán)境污染物的殘留情況。結果顯示，9個樣品中僅有3個樣品未檢出污染物殘留，殘留檢出率達66.7%，殘留量為2.33～270 μg/kg，檢出率最高的為吡蚜酮，檢出濃度最高的是丁苯嗎啉(270 μg/kg)[7]。克百威對蜜蜂無毒害，從而造成了克百威及其代謝物易在蜂產(chǎn)品中富集。采用超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法對蜂花粉中克百威及其代謝物含量進行了測定。用酸化乙腈作為提取試劑，可盡量少地帶入花粉多糖、蛋白類等化合物，并且使用均質機破碎細胞壁，能最大限度地提取花粉中的克百威及其代謝物。結果顯示，克百威及其代謝物在0.08～100 ng/mL范圍內線性良好（0.9983～0.9997）；在1.0～10.0μg/kg范圍內，平均加標回收率在88.1～97.5%，RSD值在2.2～9.8%。采用該方法測定克百威、3-羥基克百威、3-酮基克百威和呋喃酚的檢出限均為1.0 μg/kg，且該方法快速、準確、靈敏，可用于蜂花粉中克百威及其代謝物殘留量的測定[8]。

分散液液微萃取技術（dispersive liquid╞liquid microextraction，DLLME）作為一種新型液相微萃取模式，具有操作簡單、快速、高效等優(yōu)點，受到分析工作者的高度關注。因其在萃取劑、分散方式、聯(lián)用技術等方面的快速發(fā)展，目前已被廣泛用于不同基質樣品中不同分析對象的分析。唑螨酯是苯氧基吡唑類殺螨劑，唑螨酯結構中含有碳氮雙鍵，存在同分異構體E體和Z體，E體比Z體殺螨活性高。我國尚未在養(yǎng)蜂中批準使用唑螨酯，美國已經(jīng)將其作為臨時登記殺螨劑，用于蜂螨防治。李麗等利用液相色譜-串聯(lián)質譜法測定蜂蜜中(E)-唑螨酯和(Z)-唑螨酯殘留量[9]。蜂蜜樣品用水溶解后，乙腈鹽析提取，高速離心后取有機相濃縮定容。用C18色譜柱，以甲醇和體積分數(shù)0.1%甲酸，乙酸銨(2 mmol/L)溶液作為流動相等度洗脫(90/10,V/V)，電噴霧離子源正離子方式掃描，外標法定量。在1.0，10和20 μg/kg 3個加標水平下(E)-唑螨酯的回收率為75.7～102.3%，相對標準偏差在2.9～8.5%之間；(Z)-唑螨酯的回收率為79.7～108.0%，相對標準偏差在3.4～8.9%之間，方法的檢出限為0.01 μg/kg。

現(xiàn)在已有多種蜂蜜中殺蟲劑的分析方法，但這些方法均未有足夠低的定量限來對蜜蜂低劑量的殺蟲劑進行定量分析。為更準確的評價殺蟲劑的毒性，LOQ至少應為1 ng/g。Paradis等建立蜂蜜中同時測定3類（新煙堿類，擬除蟲菊酯類，吡唑類）22種殺蟲劑的提取和分析方法[10]。樣品用包含一個提取步驟和一個凈化步驟的QuEChERS方法進行前處理，。氣相色譜串聯(lián)質譜分析吡唑和擬除蟲菊酯類，液相色譜串聯(lián)質譜測定新煙堿和乙蟲腈。校正曲線在不同濃度下建立，線性范圍在0.2～5 ng/g；LOD為0.07～0.2 ng/g，LOQ為0.2～0.5 ng/g；平均回收率63～139%；RSD＜25%。

蜂蜜酒是一種以蜂蜜和合適類型烈性白蘭地為原料的傳統(tǒng)酒精飲料。雖然歐盟已經(jīng)規(guī)定了蜂蜜和花粉中新煙堿類殺蟲劑的含量水平，但是其存在于由蜂蜜制得的傳統(tǒng)食品中的風險呈增大趨勢。Jovanov等創(chuàng)建了一種DLLME和QuEChERS前處理方法分別結合高效液相色譜-串聯(lián)二級質譜（LC-MS/MS）測定蜂蜜酒中的7種新煙堿類殺蟲劑（呋蟲胺、烯啶蟲胺、噻蟲嗪、噻蟲胺、吡蟲啉、啶蟲脒和噻蟲啉）的方法。優(yōu)化LC╞MS/ MS條件后獲得了良好的色譜分離效果、選擇性和方法的獨特性。該驗證方法中的兩種前處理方法滿足SANCO/12495/2011要求，實驗結果如下：準確度RDLLME=69.2～113.4%，RQuEChERS=71.8～94.9%；精密度RSDDLLME=3.21～10.20%，RSDQuEChERS=4.19～12.81%，DLLME和QuEChERS實驗間重復性分別為9.11～16.63%和11.32～16.40%；檢測限LODDLLME=0.5～1.5 μg/L，LODQuEChERS= 1.0～2.5 μg/L；定量限LOQDLLME=1.0～5.0 μg/L，LOQQuECh－ERS=2.5~10.0 μg/L?；|效應的影響通過基質匹配校準消除。分析當?shù)厥袌龅姆涿劬茦悠凤@示，4種樣品中含有噻蟲嗪或噻蟲啉，因此持續(xù)控制此類傳統(tǒng)食品中的新煙堿類殺蟲劑污染非常必要[11]。

2.3 真實性鑒別

蜂產(chǎn)品的真實性鑒別主要包括蜜源植物和產(chǎn)地的鑒別以及摻假的鑒別?？梢曰谑中該]發(fā)性化合物的對應異構鑒別蜂蜜產(chǎn)地。Ivan Spánik等利用固相微萃取-多維氣相色譜測定油菜、板栗、橙花、洋槐、向日葵和椴樹蜂蜜的手性揮發(fā)性化合物的對映體比。在所有的樣品中檢測出了高濃度的芳樟醇氧化物、芳樟醇和脫氫芳樟醇，而α-松油醇，4-松油醇和紫丁香醇的所有同分異構體的含量則顯著降低。此外，不同產(chǎn)地的蜂蜜中一些手性化合物的對映體分布也有很大的不同。油菜蜜中芳樟醇的對映體比的顯著差別可以鑒別油菜蜜和其他的蜂蜜。紫丁香醇的對映體比可以將柑橘蜜和洋槐蜜與雜花蜜區(qū)分開來。與之相似的是向日葵蜜中4-松油醇的對映體比也有所不同[12]。

Marc Spiteri等利用核磁共振信息結合適當?shù)亩糠治龊蛿?shù)據(jù)模型定性分析能夠檢測單花蜜和雜花蜜的真實性[13]。對來自世界上超過800個蜂蜜樣品，覆蓋最有經(jīng)濟效益的蜜源種類和產(chǎn)地進行研究。典型的花蜜標記物可用來鑒別單花蜜，光譜特征和自然變異用來鑒別雜花蜜，糖漿的標志物信號通過與一個200個蜂蜜樣品的商業(yè)數(shù)據(jù)集進行統(tǒng)計比較測定。盡管僅是定性的結果，但是添加實驗確保了檢測糖摻假低于10%水平的可能性。運用相同的核磁共振實驗，定量檢測葡萄糖、果糖、蔗糖和羥甲基糠醛（常規(guī)指標），同時描述了顯示開始發(fā)酵時的標記物。

三維熒光法是近20多年發(fā)展起來的一門新的熒光分析技術，這種技術能夠獲得激發(fā)波長與發(fā)射波長或其他變量同時變化時的熒光強度信息，將熒光強度表示為激發(fā)波長-發(fā)射波長或波長-時間、波長-相角等兩個變量的函數(shù)。三維熒光光譜分別被稱作三維熒光光譜。通常，三維熒光的三個維度是指熒光激發(fā)、發(fā)射波長和熒光強度，它表現(xiàn)的是熒光強度隨激發(fā)和發(fā)射波長同時變化的信息。一般獲取三維熒光數(shù)據(jù)的方法是在不同激發(fā)波長位置上連續(xù)掃描發(fā)射光譜，并利用各種繪圖軟件將其以等角三維熒光投影圖或等高線光譜等形式圖象化表現(xiàn)。三維熒光光譜(3DFS)技術和多元校正快速有效的鑒別出蜂蜜中的摻假物[14]。3DFS的數(shù)據(jù)經(jīng)特征提取和主成分分析進行壓縮，然后用偏最小二乘(PLS)和反向傳播神經(jīng)網(wǎng)絡(BP-ANN)算法建模。模型通過交叉驗證進行優(yōu)化，通過預測均方根誤差(RMSEP)和相關系數(shù)進行評價。結果顯示BP-ANN模型優(yōu)于PLS模型，混合蜜（向日葵、龍眼、蕎麥和油菜）在預測組中的最佳預測模型如下：RMSEP=0.0235和R= 0.9787。本研究證明3DFS技術結合多元校正方法在快速，無損，準確定量分析蜂蜜摻假中具有良好的前景。

建立分析方法的目的是為了獲得一致、可靠、準確的數(shù)據(jù)，而分析方法的驗證在實現(xiàn)這個目標中發(fā)揮了重要作用。盡管已經(jīng)有很多關于蜂蜜同位素的研究報道，但是幾乎沒有關于這些方法的驗證研究。Mehmet Fatih Cengiz等從選擇性、穩(wěn)定性、線性、準確度、重復性、靈敏度和回收率七個方面對檢測蜂蜜摻假的同位素比值-質譜（Isotope Ratio Mass Spectrometry，IR-MS）法進行了驗證，并首次嘗試描述了IR-MS一些重要的方法驗證參數(shù)，如檢出限（limit of detection，簡稱LOD）、定量限（limit of quantification，LOQ）和回收率?；趽郊侔俜致实腖OD為0.11%，LQD為0.38%，加標回收率為98.57%。為了驗證該方法的實用性，在土耳其市場采集了13個不同品牌的蜂蜜樣品用于分析，結果顯示，δ13C值范圍為－12.87±0.01~－25.56±0.08‰，蛋白質組分范圍為－23.77±0.09~－25.98±0.06‰，一個蜂蜜樣品確定為摻假蜂蜜[15]。有研究報道，采用二極管陣列檢測器液相色譜和質譜檢測器氣相色譜檢測16種羅馬新鮮蜂花粉總脂質和主要脂質中類胡蘿卜素和脂肪酸的總量和單一含量以及組成[16]。分析樣品均富含葉黃素，而β-隱黃素和β-胡蘿卜素的含量則由于植物源的不同而含量變化較大。葉黃素含量高與Callendula officinalis,Taraxacum officinale and Anthylis sp.相關。以甘藍屬花粉為主的樣品中總脂肪含量最高。測得脂類中以多不飽和脂肪酸為主，同時含有不定量的飽和脂肪酸。脂肪和類胡蘿卜素含量的巨大差異主要是由于樣品的植物源不同。

2.4 麥盧卡蜂蜜研究

麥盧卡蜂蜜是新西蘭特有的一種珍貴蜜種，是蜜蜂采集新西蘭特有的一種紅茶樹—Manuka(Leptospermum scoparium)的花蜜釀造而成的。它區(qū)別于其他蜂蜜之處在于麥盧卡蜂蜜有強大而獨特的抗菌活性。蜂蜜一般都具有抗菌活性，這是由蜂蜜本身的高滲透性、較強的酸度并且一般含有過氧化物造成的。而麥盧卡蜂蜜的抗菌活性則不依賴于過氧化物，因此被稱為非過氧化抗菌活性。丙酮醛(methylglyoxal,MGO)被認為是麥盧卡蜂蜜的一種標志性成分,也是非過氧化抗菌活性的功能性成分。因此開展丙酮醛檢測對于麥盧卡蜂蜜的真?zhèn)舞b別具有重要意義。目前國內外對麥盧卡蜂蜜丙酮醛的研究主要是將丙酮醛衍生化后,采用液相色譜和氣相色譜質譜檢測。陳磊等采用乙酸鈉緩沖溶液直接提取蜂蜜中的丙酮醛,提取液與2,4-二硝基苯肼溶液室溫避光衍生20 h后，經(jīng)C18色譜柱分離，最后采用二極管陣列檢測器(PDA)檢測，外標法定量。結果丙酮醛的檢出限為10.0 mg/kg，定量限為25.0 mg/kg，在1.0～60 mg/L之間線性關系良好，相關系數(shù)為0.9982，在蜂蜜中添加25.0、500、1000 mg/L三個水平的回收率在93.9～97.8%之間，相對標準偏差在1.8～5.4%之間。該分析能夠滿足麥盧卡蜂蜜中丙酮醛的快速測定要求[17]。此外，將蜂蜜溶于水后加入鄰苯二胺水溶液，在室溫、避光條件下衍生化反應8 h以上，產(chǎn)物過0.22 μm濾膜后用HPLC檢測。以Kromasil反相色譜柱為分析柱；甲醇和0.1%(v/v)乙酸水溶液為流動相，梯度洗脫；檢測波長為318 nm；外標法定量。甲基乙二醛在1～50mg/L范圍內線性良好，相關系數(shù)為0.9999；檢出限(S/N=3)為0.02 mg/L，定量限(S/N=10)為0.06 mg/L；在50、100、200 mg/kg添加水平下的回收率為98.3～101.5%，相對標準偏差(n=5)小于5%；衍生化產(chǎn)物在24 h內穩(wěn)定。實驗結果表明，該方法前處理過程簡單，具有良好的靈敏度，回收率和重復性，可用于新西蘭Manuka蜂蜜的質量控制，該方法也適用于中國蜂蜜中甲基乙二醛的檢測[18]。

利用碳同位素比研究蜂產(chǎn)品尤其是蜂蜜的摻假是近年來研究者關注最多的方法之一。Karyne M Rogers等研究了15種不同花粉類型的1023個新西蘭蜂蜜中的碳同位素（蜂蜜和蛋白質中的δ13C），從而調查各種新西蘭蜂蜜是否符合AOAC 998.12 C-4糖檢測試驗，評估了其發(fā)生假陽性結果的概率。333種蜂蜜樣品C-4糖閥值超出7%，其中有324種新西蘭麥盧卡蜂蜜（占總不合格樣品的97.2%），3種單一花種蜂蜜（ling, kamahi和tawari）中的9個樣品（占總不合格樣品的2.8%），其他花粉類型的蜂蜜C-4糖閥值均在允許范圍內。假陽性結果顯示，高活性的新西蘭麥盧卡蜂蜜和一些ling,kamahi和tawari蜂蜜中的丙酮醛含量大于250 mg/kg,非過氧化氫活性大于10+。Karyne M Rogers等還研究建立了一種驗證AOAC 998.12 C-4糖測試的新方法[19]。實驗顯示，非過氧化活性麥盧卡蜂蜜中“表觀”C-4糖含量增大，主要是由于二十二碳六烯酸（dihydroxyacteone，DHA）向甲基乙二醛（methylglyoxal，MGO）的轉化。此轉化機制可以被加熱和貯藏時間促進，同時與首次向三葉草蜂蜜中摻入人工合成DHA有關。DHA和MGO原本天然存在于麥盧卡蜂蜜中。未添加DHA的純三葉草蜂蜜在37℃條件下加熱83天后“表觀”C-4糖含量不變，而相同條件下?lián)饺牒铣蒁HA的相同樣品C-4含量從2.8%增大到5%。4種非過氧化活性麥盧卡蜂蜜加熱241天后C-4糖含量增大到280%。這項研究有力地表明，在應用AOAC 998.12方法時，非過氧化活性很高的麥盧卡蜂蜜中DHA向MGO轉化時發(fā)生蛋白質蒸餾效應，從而使δ13C蛋白質剩余值錯誤的顯示出C-4糖含量增大[20]。

3 總結

今年已經(jīng)正式出版的文獻主要側重于基于蜂產(chǎn)品中的蜜源植物種類鑒別，產(chǎn)地鑒別和真實性鑒別研究，還對某些國家特有的蜂產(chǎn)品品種進行了真實性的分析，以區(qū)別其他國家的其他蜜種；此外利用新的提取方法，特殊的吸附基質吸附待測物，凈化雜質是研究蜂產(chǎn)品中污染物分析的一個特點；麥盧卡蜂蜜的研究這也是最近幾年蜂產(chǎn)品研究的重點，主要側重于抗菌物質分析以及原有的其他蜜種中的研究方法是否適合對麥盧卡蜂蜜進行分析。

本文僅列舉了部分具有代表性的相關文獻，希望對以后研究內容的范圍和深度都有所幫助。

[1]張偉，盛永剛，古淑青，等.鰻魚、蜂蜜中鏈霉素、雙氫鏈霉素殘留量的液相色譜-串聯(lián)質譜法測定[J].分析測試學報,2014,(06): 688-692.

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A review of 2014：International and domestic research on quality safety of bee products

Zhang Wenwen,Zhou Jinhui,Guo Weihua,Li Yi,Wu Liming,Zhao Jing
(Institute of Apicultural Research,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100093,P.R.China；Bee Product Quality Supervision and Testing Center,Ministry of Agriculture,Beijing 100093,P.R.China)

國家蜂產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金資助(CARS-45)和國家自然科學基金(Project No.31201859)

趙靜，研究員，從事蜂產(chǎn)品質量安全研究與評價工作，E-mail∶zhaojingjun@sina.com