幺 晨 賀 森 曹冠華 顧 雯 陳曉順 趙榮華

云南中醫(yī)學院中藥學院，云南 昆明 650500

鐵皮石斛(Dendrobium of ficinale Kimura et Migo)是我國古文獻中最早記載的蘭科植物之一，具有益胃生津、滋陰清熱的功效［1］。近十年來，相關(guān)的研究工作主要集中在鐵皮石斛的栽培育種、分離提取、藥理作用和指紋圖譜等方面的研究，這些研究為鐵皮石斛進一步地深入研究和產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用提供了一定理論依據(jù)。目前天然藥用植物類化妝品在市場中表現(xiàn)出一定優(yōu)勢。本文通過對鐵皮石斛多糖提取方法、化學成分和藥理作用進行概括，并對市場上已有植物多糖類化妝品的研究現(xiàn)狀進行總結(jié)，旨在為日后鐵皮石斛多糖化妝品的研究開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 鐵皮石斛多糖的提取方法

目前鐵皮石斛多糖提取方法主要為四種:傳統(tǒng)水提法、超聲或微波輔助水提法和酶解法，其中傳統(tǒng)水提法為主要的提取方法。在傳統(tǒng)水提法方面，黃曉君［2］采用響應(yīng)面法優(yōu)化鐵皮石斛多糖的提取工藝，結(jié)果表明:最佳提取工藝條件為料液比1∶30 (g/ml)、提取溫度90℃、提取2h。在此條件下多糖得率為30.56%，鐵皮石斛多糖中糖含量為78.21%。

在超聲輔助及微波輔助水提方面，葉余原［3］認為最優(yōu)的提取工藝條件為料液比1∶30、50℃超聲水浴、超聲頻率45kHz、提取1.5h，在此條件下鐵皮石斛多糖的平均提取率為15.3%。尚喜雨等［4］認為在微波功率400W、pH 值為8、微波6min、料液比1∶50 的條件下多糖提取率為17.48%。分析認為，在超聲波或是微波等物理作用下，鐵皮石斛多糖發(fā)生強烈的振蕩，易于從植物細胞中迅速浸出和擴散，從而提高多糖的提取率。

在酶解法方面，尚喜雨［5］采用4%的酶量在40℃水溫和pH 值為6 的環(huán)境下酶解3h，多糖提取率為26.49%，比采用相同提取條件的水提法提高了119%。因木瓜蛋白酶能有效酶解與多糖結(jié)合的蛋白質(zhì)，且纖維素酶能夠充分溶脹細胞壁，促使多糖在一定條件下的釋放，故認為酶法提取石斛多糖優(yōu)于水提法。胡建楣等［6］認為加熱提取方法耗時長、提取溫度高，易導致多糖釋放不完全、提取率偏低、活性下降。酶解法提取條件溫和，能有效破壞細胞壁，水解植物中的膠質(zhì)、蛋白，促使細胞釋放更多的多糖，且該方法環(huán)保低碳，有利于工業(yè)化。

2 藥理作用

現(xiàn)代科學研究證明，鐵皮石斛中含有的主要活性成分為石斛多糖、石斛堿、芪類及其衍生物以及微量元素等［7］，其中多糖與其藥理活性有著密切的聯(lián)系。多糖含量是判斷鐵皮石斛質(zhì)量的主要依據(jù)，《中國藥典》規(guī)定鐵皮石斛多糖含量不得少于25.0%。根據(jù)中醫(yī)藥古籍中的論述，石斛具有“補五臟虛勞嬴瘦，強陰益精，久服厚腸胃，補內(nèi)絕不足，平胃氣”等功效，現(xiàn)代藥理學認為鐵皮石斛多糖在調(diào)節(jié)機體免疫力、抗腫瘤、抗氧化等方面具有顯著功效［8］。

2.1 抗菌、鎮(zhèn)痛和抗炎 張周英等［9］采用濾紙片抑菌圈法考察鐵皮石斛多糖對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎球菌的抗菌作用，結(jié)果顯示有明顯的抑菌作用。侯少貞等［10］取鐵皮石斛鮮汁，通過扭體試驗、熱板法觀察鎮(zhèn)痛作用;通過耳腫脹試驗、腹腔毛細血管通透性試驗及肉芽腫試驗觀察抗炎作用。結(jié)果表明鐵皮石斛鮮汁可減少醋酸致小鼠扭體次數(shù)，能明顯提高熱板法小鼠的痛閾值;明顯減輕二甲苯致小鼠耳廓腫脹程度，抑制醋酸致毛細血管通透性增高及抑制棉球肉芽腫生長。因此認為鐵皮石斛鮮汁具有鎮(zhèn)痛、抗炎的作用。

2.2 抗氧化、抗衰老 鮑素華等［11］對鐵皮石斛總多糖(DSP)進行分離得到DSP1、DSP2、DSP33個多糖片段，并進行抗氧化活性測定，結(jié)果顯示DSP1對DPPH·的清除作用、總抗氧化能力最強，抑制H2O2誘導紅細胞氧化溶血和抑制Fe2+-VC 誘導的小鼠肝勻漿脂質(zhì)過氧化作用效果最佳;對·OH 的清除率強弱依次為DSP＞DSP3＞DSP1＞DSP2。李利娜［12］認為鐵皮石斛多糖能夠改善D-半乳糖誘導衰老小鼠的學習記憶能力，提示其有一定的抗衰老作用，可能的機制與通過增加機體SOD 和GSH·PX 活性、促進氧自由基的清除以及增強機體的免疫功能有關(guān)。

2.3 調(diào)節(jié)免疫 劉亞娟等［13-14］通過MTT 免疫試驗證明，鐵皮石斛多糖在25～200μg·ml-1的濃度范圍內(nèi)可以顯著促進小鼠免疫脾細胞的增殖，特別是對脾細胞相關(guān)的體液免疫有較顯著的增強作用。宋美芳等［15］發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛多糖中劑量組能顯著刺激小鼠脾淋巴細胞的增值，中、高劑量組能促進小鼠脾淋巴細胞中γ-干擾素和白細胞介素-2 的分泌;高劑量組可增加小鼠足趾腫脹度和脾臟指數(shù)。Xia等［16］認為鐵皮石斛多糖體外能促進脾細胞增殖，增加NK細胞和巨噬細胞活性。

2.4 抗腫瘤 劉亞娟等［13］初步證明鐵皮石斛多糖可以抑制A549、HepG2、F9 和NCCIT 的生長，具有一定抗癌活性。鄧鵬［17］認為鐵皮石斛具有抑制人鼻咽癌CNE1 和CNE2細胞增殖和誘導凋亡的作用，能抑制鼻咽癌裸鼠CNE1 和CNE2 移植瘤的成長，其機制可能與Bcl-xl，Mcl-1 蛋白下調(diào)、促進Caspase3 的活化等有關(guān)，并可能與死亡受體通路的細胞凋亡和線粒體通路的細胞凋亡有關(guān)。

2.5 調(diào)節(jié)血糖、血壓 陳泳蓀［18］利用RT-PCR 技術(shù)從分子水平初步表明含不同濃度鐵皮石斛多糖的培養(yǎng)基中ECV304 細胞NF-κB 因子表達均顯著下降，認為鐵皮石斛多糖對高糖誘導的血管內(nèi)皮細胞NF-κB 因子的過量表達有較好的抑制作用。吳人照等［19］通過觀察鐵皮石斛多糖、鐵皮石斛非多糖對易卒中型自發(fā)性高血壓大鼠(SHR-sp)的降低血壓、延長生存期作用，認為多糖為鐵皮石斛降低血壓、預(yù)防中風作用的主要有效成份。

2.6 其他藥理作用 Xiang 等［20］發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛多糖對TNF-α 誘導的人類唾液腺細胞株調(diào)亡具有抑制作用，能增強肖格倫綜合征試驗?zāi)Ｐ偷拿庖哒{(diào)節(jié)功能。Lin 等［21］發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛多糖能夠改善異常水通道蛋白5、促炎細胞因子，并抑制肖格倫綜合征實驗小鼠細胞凋亡，具有治療肖格倫綜合征的潛能。

3 鐵皮石斛多糖護膚品展望

當下，都市女性十分推崇天然植物配方的護膚品。植物多糖無毒副作用，具有較好的吸濕保濕性能，滿足人們對化妝品天然、營養(yǎng)、無刺激等要求［22］。例如白芨有消腫生肌、抗菌的功效。蘆薈含有大量粘多糖，有很好的潤滑、保濕、防曬及消炎的作用。海藻提取物富含氨基酸、維生素和粘多糖，對皮膚也有保濕、潤滑和防皺的作用［23］。丁慧軍［24］通過研究發(fā)現(xiàn)茶樹菇粗多糖可作為天然美白劑，楊桃粗多糖可作為天然保濕劑。于潔［25］制備了含蘆薈多糖的乳狀化妝品，保濕性超過了70%，能夠屏蔽紫外線，對細菌有一定抑制作用。劉愛萍［29］等人研究發(fā)現(xiàn)，柳茶多糖可以提升超氧化物歧化酶的活性，具有一定的輻射保護作用。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖、人參多糖、當歸多糖等植物多糖［26］同樣具有抗輻射損傷作用，具備開發(fā)相關(guān)護膚品的潛質(zhì)。

在《道藏》中，鐵皮石斛被列為“中華九大仙草之首”，多糖含量明顯高于其他品種石斛［27］，具有滋陰生津等作用。有研究者認為石斛能調(diào)節(jié)新陳代謝和內(nèi)分泌系統(tǒng)，從而達到養(yǎng)顏美容的效果［28］，且多項專利顯示，鐵皮石斛具有修復受損細胞的功效［29-30］。結(jié)合現(xiàn)代藥理學結(jié)果，開發(fā)以鐵皮石斛多糖保濕滋養(yǎng)為基礎(chǔ)功效，同時具備抑菌、抗炎、抗衰老、防曬等作用的多效護膚品前景廣闊。本人還針對鐵皮石斛多糖提取物進行了家兔眼部刺激性實驗，結(jié)果顯示提取物對家兔眼部基本無刺激，故護膚品同樣適用于嬰幼兒或皮膚較為敏感人群。但是，由于市場上鐵皮石斛來源魚龍混雜，護膚品品質(zhì)難以保證，應(yīng)及時建立有效的質(zhì)量控制體系;同時鐵皮石斛多糖的穩(wěn)定性考察及貯存工藝的優(yōu)化也是亟需解決的問題。

［1］中國藥典委員會.中國藥典(一部) ［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［2］黃曉君，聶少平，王玉婷，等.鐵皮石斛多糖提取工藝優(yōu)化及其成分分析［J］.食品科學，2013，34 (22):21-26.

［3］葉余原.超聲法提取鐵皮石斛多糖工藝的研究［J］.中藥材，2009，32(4):617-620.

［4］尚喜雨，王傳銘.正交實驗優(yōu)選鐵皮石斛多糖提取工藝的研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2010，37 (4):708-709.

［5］尚喜雨.水提法·酶法提取鐵皮石斛多糖的比較研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2010，38 (18):9787-9788.

［6］胡建楣，李靜玲，馮鵬，等.Box-Behnken 設(shè)計優(yōu)化鐵皮石斛中多糖復合酶法提取工藝［J］.中藥材，2014 (1):130-133.

［7］陳曉梅，王春蘭，楊峻山.鐵皮石斛化學成分及其分析的研究進展［J］.中國藥學雜志，2013 (19):1634-1640.

［8］蔣玉蘭，羅建平.藥用石斛多糖藥理活性及化學結(jié)構(gòu)研究進展［J］.時珍國醫(yī)國藥，2011，22 (12):2986-2988.

［9］張周英，楊成密，藍忠，等.石斛多糖的抗菌作用研究［J］.中國醫(yī)藥指南，2012，10 (33):439-440.

［10］侯少貞，李煥彬，郭建茹，等.鐵皮石斛鎮(zhèn)痛與抗炎作用研究［J］.動物醫(yī)學進展，2012，33 (10):49-52.

［11］鮑素華，查學強，郝杰，等.不同分子量鐵皮石斛多糖體外抗氧化活性研究［J］.食品科學，2009，30 (21):123-127.

［12］李利娜.鐵皮石斛多糖改善D-半乳糖誘導小鼠衰老作用研究［D］.江蘇:蘇州大學，2012.

［13］劉亞娟，王詩豪，張銘，等.鐵皮石斛多糖抗癌及免疫活性研究［J］.廣州化工，2014，42 (10):58-60，65.

［14］Liu X F，Zhu J，Ge S Y，et al.Orally administered Dendrobium officinale and its polysaccharides enhanceimmune functions in BALB/c mice［J］.Natural Product Communications，2011，6 (6):867-870.

［15］宋美芳，李光，陳曦，等.兩種石斛多糖提高小鼠免疫活性的初步研究［J］.中國藥學雜志，2013，48 (6):428-431.

［16］Xia L J，Liu X F，Guo H Y，et al.Partial characterization and immunomodulatory activity of polysaccharides from the stem of Dendrobium officinale (Tiepishihu)in vitro ［J］.Journal of Functional Foods，2012，4:294.

［17］鄧鵬.鐵皮石斛抗鼻咽癌的作用研究［D］.廣西:廣西醫(yī)科大學，2010.

［18］陳泳蓀，劉文洪.鐵皮石斛多糖提取工藝及其對高糖誘導血管內(nèi)皮細胞NF-κB 表達干預(yù)的研究［J］.山西中醫(yī)學院學報，2011，12 (2):28-31.

［19］吳人照，楊兵勛，李亞平，等.鐵皮石斛多糖對SHR-sp 大鼠抗高血壓中風作用的實驗研究［J］.中國中醫(yī)藥科技，2011，18 (3):204.

［20］Xiang L，Stephen Sze CW，Ng TB，et al.Polysaccharides of Dendrobium officinale inhibit TNF-α-induced apoptosis in A-253 cell line ［J］.Iinflammation Research，2013，62 (3):313-324.

［21］Lin X，Shaw PC，Sze SC.Dendrobium officinale polysaccharides ameliorate the abnormality of aquaporin 5，pro-inflammatory cytokines and inhibit apoptosis in the experimental Sj gren＇s syndrome mice ［J］.Iinternational Immunopharmacology，2011，11 (12):2025-2032.

［22］劉敏，張云，崔巖.多糖—一種新型的化妝品保濕劑［J］.中國洗滌用品工業(yè)，2010 (1):69-71.

［23］賴勁東.中藥在保濕化妝品中的應(yīng)用前景［J］.醫(yī)學信息，2011，24(3):1846-1848.

［24］丁慧軍.天然化妝品功能性成分的分離提取及其化妝品功效檢測［D］.福建:廈門大學，2012.

［25］于潔，李威.含蘆薈多糖與維生素E 乳狀化妝品的制備及其性能［J］.日用化學工業(yè)，2007，37 (4):281-282.

［26］劉愛萍.植物多糖抗輻射效果的Meta 分析及柳茶抗輻射損傷實驗研究［D］.甘肅:蘭州大學，2014.

［27］魯芹飛，黃松，林培，等.5 種不同石斛的多糖與氨基酸及甘露糖的含量比較［J］.中國實驗方劑學雜志，2014，20 (2):59-62.

［28］湯興華.一種養(yǎng)顏美容石斛沖劑:中國，201410365041.0 ［P］.2014-12-10.

［29］張建民.一種石斛降糖固體飲料及其制備方法:中國，201410207431.5 ［P］.2014-08-27.

［30］高觀世，劉蓓，桂明英，等.提高人體免疫及促智健腦的保健食品及其制備方法:中國，200810058322.6 ［P］.2009-02-04.