P38MAPK在腦梗死和骨質(zhì)疏松中表達(dá)的研究進(jìn)展

歐回韓雨杉趙宏斌錢(qián)傳云

(昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診醫(yī)學(xué)科 云南省骨代謝疾病研究中心 云南省急診醫(yī)學(xué)研究中心，云南昆明650032)

關(guān)鍵詞〔〕絲裂原活化蛋白激酶；P38；腦梗死；骨質(zhì)疏松

中圖分類(lèi)號(hào)〔〕R592〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30860389，81160112)；云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究重點(diǎn)資助項(xiàng)目(2011FA033)；云南省中青年學(xué)術(shù)帶頭人后備人才項(xiàng)目(2010CZ014)

通訊作者：趙宏斌(1967-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事創(chuàng)傷外科及骨質(zhì)疏松的臨床和基礎(chǔ)研究。

第一作者：歐回(1980-)，男，主任醫(yī)師，主要從事重癥及急診醫(yī)學(xué)的臨床和基礎(chǔ)研究。

1p38絲裂原活化蛋白激酶

絲裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是細(xì)胞內(nèi)執(zhí)行信號(hào)級(jí)聯(lián)放大的一種蛋白質(zhì)，可將信號(hào)從細(xì)胞表面?zhèn)鲗?dǎo)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)部的重要介質(zhì)，參與細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育、分裂分化、凋亡等多個(gè)生理過(guò)程〔1〕。MAPKs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路包括4條：細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERKI/2，或P42/44MAPK)；p38MAPK；c-Jun氨基末端激酶(JNK)及 ERK5。MAPK信號(hào)路徑主要通過(guò)保守的三級(jí)酶促級(jí)聯(lián)反應(yīng)來(lái)傳遞細(xì)胞信號(hào)。研究發(fā)現(xiàn)ERKs、JNK/SAPK、ERK5/BMK和P38這四條轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之間存在較大的功能性差異。ERK路徑的蛋白酶是主要的生長(zhǎng)刺激調(diào)控者〔2〕。JNK主要通過(guò)生發(fā)中心激酶(GCK/NIK)激活MEKKI/2/3/4，進(jìn)而激活MKK4/7。p38則主要通過(guò)激活蛋白激酶(PAK)來(lái)激活混合譜系激酶(TAK/ASK/ MLK)，繼而激活MKK3/MKK6〔3〕，作用于細(xì)胞代謝過(guò)程。

P38MAPK是一種脂多糖(LPS)刺激的巨噬細(xì)胞中的酪氨酸磷酸化蛋白〔4〕，包括p38α、p38β、p38δ和p38γ等4種亞型。p38α是在組織內(nèi)表達(dá)最為廣泛的亞型，在白細(xì)胞、肝、骨髓、甲狀腺、小腦中表達(dá)水平比較高，因此，p38α的生物學(xué)功能非常豐富〔5〕。p38β、p38γ及p38δ則分別表達(dá)于心腦、肌肉、垂體和表皮細(xì)胞〔6〕。在具體的作用底物方面，所有的P38亞族成員都有Thr-Gly-Tyr雙位點(diǎn)磷酸化模塊。Perry等〔7〕通過(guò)序列對(duì)比，發(fā)現(xiàn)P38亞族四個(gè)成員之間存在60%左右的相似性，這與其他的絲裂原活化蛋白激酶亞族相比有很大的差異。激活MAPK，需要蘇氨酸(T)、酪氨酸(Y)雙位點(diǎn)同時(shí)磷酸化，這兩個(gè)鄰近的磷酸化位點(diǎn)之間還存在一個(gè)氨基酸，形成三肽結(jié)構(gòu)T-Xaa-Y〔8〕。p38的所有信號(hào)通路都具有“T-G-Y”雙位點(diǎn)磷酸化區(qū)域，與上述兩條通路不同。

P38MAPK參與了炎癥細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、死亡的具體過(guò)程〔9〕。研究顯示，炎癥刺激能夠激活P38MARK，激活后的P38MAPK可以調(diào)節(jié)白細(xì)胞介素(IL)-1、IL-6、IL-12、腫瘤壞死因子(TNF)等〔10〕致炎因子的生成，從而影響生物體內(nèi)致炎癥因素和抗炎因素之間的平衡，決定炎癥反應(yīng)的進(jìn)程〔11〕。同時(shí)P38MAPK對(duì)免疫系統(tǒng)細(xì)胞增殖、分化也有調(diào)控作用，這些機(jī)制都促進(jìn)了炎癥的發(fā)展〔12〕。炎癥反應(yīng)是人體防御系統(tǒng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，炎癥反應(yīng)如果失控可能導(dǎo)致骨質(zhì)疏松、動(dòng)脈硬化、哮喘、自身免疫性疾病、心臟疾病、癌癥、膿毒癥等一系列嚴(yán)重疾病的發(fā)生。Thorp等〔13〕證明P38MARK抑制劑在阻斷P38MARK信號(hào)通路后，能夠顯著減輕炎癥反應(yīng)。

2P38MAPK在腦梗死中的表達(dá)研究

腦梗死是由各種原因?qū)е碌木植磕X組織區(qū)域血液供應(yīng)障礙，使得腦組織缺血缺氧性病變或者壞死，最終出現(xiàn)臨床上對(duì)應(yīng)的神經(jīng)功能性損傷。有研究發(fā)現(xiàn)，激活后的P38MAPK能夠通過(guò)很多種的途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)腦缺血后細(xì)胞死亡的調(diào)控，同時(shí)還可以直接通過(guò)炎癥因子與一氧化氮參與到腦缺血損傷之中去〔14〕。Haddad等〔15〕的研究提出，P38MAPK能夠通過(guò)兩種途徑來(lái)發(fā)揮其相關(guān)作用，第一種途徑是其作為炎性細(xì)胞因子的上游調(diào)控者，用于傳遞促進(jìn)發(fā)炎的信號(hào)；第二種途徑則是P38MAPK能夠?qū)⒁扬@示在體外的可磷酸化的神經(jīng)元纖維，造成神經(jīng)元的進(jìn)一步損傷〔16〕。研究發(fā)現(xiàn)，磷酸化P38MAPK的大量表達(dá)會(huì)加重腦缺血再灌注損傷，而減少磷酸化P38MAPK的大量表達(dá)則可顯著減輕腦缺血再灌注造成的損傷〔17〕。腦缺血預(yù)處理改善缺血再灌注損傷引起的形態(tài)學(xué)變化和功能學(xué)改變與其減少缺血再灌注損傷后磷酸化P38MAPK含量有關(guān)〔18〕。Kevin等〔19〕的研究發(fā)現(xiàn)，激活的P38MAPK能夠?qū)е录?xì)胞flou 3/AM熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，換而言之，其會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)部的鈣離子濃度出現(xiàn)顯著的增加。

作為P38MAPK激活路徑的下游，細(xì)胞內(nèi)鈣含量上升乃至于超載最終會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，抑制線(xiàn)粒體功能的發(fā)揮，最終導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡。而且，細(xì)胞內(nèi)鈣上升與炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子的過(guò)度生成也存在著密切的聯(lián)系，因此，P38MAPK最終導(dǎo)致炎性反應(yīng)是一種必然的結(jié)果〔20〕。在腦梗死之后，在腦缺血核心區(qū)域的巨噬細(xì)胞細(xì)胞之中，可以明顯的發(fā)現(xiàn)激活之后的P38MAPK，提示P38MAPK可能會(huì)直接參與到腦缺血損傷之后的炎性反應(yīng)之中來(lái)〔21〕。

P38MAPK究竟通過(guò)何種途徑致使神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)損傷目前還沒(méi)有定論，但是目前研究證實(shí)P38MAPK被磷酸化激活之后，能夠進(jìn)一步的激活其下游的許多種激酶以及轉(zhuǎn)錄因子，如蛋白激酶MAPKAPK2以及轉(zhuǎn)錄因子ATF-2，并且導(dǎo)致一系列的細(xì)胞內(nèi)連鎖反應(yīng)，從而誘發(fā)部分的特定基因的表達(dá)，其中就包括了TNF-α以及IL-1β等，上述的基因表達(dá)產(chǎn)物確實(shí)可能在腦部缺血損傷的過(guò)程中造成神經(jīng)細(xì)胞衰亡，并且還會(huì)直接參與到炎癥反應(yīng)的過(guò)程之中，造成腦梗死或者其他的腦部缺血性損傷病程的進(jìn)一步發(fā)展。

3P38MAPK在骨質(zhì)疏松中的表達(dá)研究

骨質(zhì)疏松(OP)主要是由成骨細(xì)胞的骨形成降低，破骨細(xì)胞的骨吸收增加，導(dǎo)致骨的重建機(jī)制失衡〔22〕。在OP中，P38MAPK能夠通過(guò)磷酸化成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體來(lái)調(diào)控成骨細(xì)胞特異性基因的表達(dá)〔23〕。來(lái)源于骨髓的間充質(zhì)干細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖和多向分化潛能，在不同的誘導(dǎo)條件下可分別向成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞分化〔24〕，P38MAPK在這一過(guò)程中起著重要作用。p38MAPK可影響成骨細(xì)胞的分化、破骨細(xì)胞的生成、凋亡，對(duì)RANKL/ RANK/OPG具有調(diào)控作用〔25〕，是OP發(fā)病的重要信號(hào)途徑。目前的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，破骨細(xì)胞(OC)與OP有著非常密切的關(guān)系。然而，OC前提細(xì)胞分化成為成熟的OC，需要成骨細(xì)胞提供兩個(gè)特殊的信號(hào)，同時(shí)這也是OC分化成熟的必須信號(hào)。其中一個(gè)信號(hào)是通過(guò)RANKL以及RANK進(jìn)行傳遞的〔26〕，它用于表達(dá)OC的前體細(xì)胞、成熟OC以及軟骨細(xì)胞。

Ozlem等〔27〕探討了P38MAPK與骨代謝之間的關(guān)系，認(rèn)為多種細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體以及TNF相關(guān)受體、脂多糖與TGF-1都可以對(duì)P38MAPK信號(hào)通路進(jìn)行直接激活或者間接激活，從而影響RANK、RANKL以及OPG系統(tǒng)，進(jìn)而對(duì)OC分化及其功能進(jìn)行調(diào)節(jié)。同時(shí)，其研究中提到轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-1也是OC的重要調(diào)節(jié)因子。TGF-1能誘導(dǎo)P38MAPK磷酸化，經(jīng)過(guò)信號(hào)級(jí)聯(lián)放大系統(tǒng)活化凋亡途徑，導(dǎo)致OC凋亡〔28〕。P38MAPK不參與成骨細(xì)胞增殖、分化的調(diào)控，與成骨細(xì)胞的凋亡也有關(guān)〔29〕。

綜上所述，P38MAPK在OP中的表達(dá)，主要是作用于RANK、RANKL以及OPG系統(tǒng)〔30〕，從而起到調(diào)節(jié)骨細(xì)胞的分化以及凋亡等作用。然而，目前關(guān)于P38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與OP之間確切關(guān)系的研究還剛剛興起，多種因子對(duì)P38MAPK的激活以及P38MAPK對(duì)非P38MAPK轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響有待進(jìn)一步的研究予以證實(shí)。

4P38MAPK在腦梗死與OP表達(dá)中的相關(guān)性

基于P38MAPK在腦梗死與OP中表達(dá)機(jī)制的研究可以發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是在腦梗死中的表達(dá)上升還是在OP中表達(dá)的上升，可能都與TNF配體超家族及其受體有一定的關(guān)聯(lián)性。比如，在腦梗死病癥中，TNF能夠激發(fā)P38MAPK，并誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，從而推進(jìn)腦梗死病程的發(fā)展。而在OP中，TNF細(xì)胞因子可以通過(guò)激活P38MAPK而發(fā)揮破骨作用〔31〕。Schwarz等〔32〕就對(duì)MAPK誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化的研究中提出，其可以刺激TNF的產(chǎn)生，而TNF又能夠進(jìn)一步激發(fā)P38MAPK，從而誘導(dǎo)破骨細(xì)胞的進(jìn)一步分化。而實(shí)際上，TNF激活P38MAPK，也會(huì)作用于誘導(dǎo)腦梗死區(qū)域炎癥的發(fā)展〔33〕。

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，腦梗死患者的死亡率明顯下降，但后遺癥多，其中可能會(huì)出現(xiàn)全身性的骨疾病，腦梗死患者腰椎中的骨礦物質(zhì)的含量以每周0.9%的速度不斷減少。而當(dāng)骨礦物質(zhì)的含量一直減至30%上下時(shí)，會(huì)形成一個(gè)骨礦物質(zhì)含量的新的穩(wěn)定狀態(tài)，就是負(fù)鈣平衡。P38MAPK可以對(duì)骨髓的間充質(zhì)肝細(xì)胞的分化過(guò)程產(chǎn)生影響，使其更趨向于向成骨細(xì)胞分化。腦梗死患者的廢用性O(shè)P是由于骨骼缺少機(jī)械性的刺激而導(dǎo)致破骨細(xì)胞的相對(duì)活躍，從而使骨消融。而P38MAPK為影響其成骨的信號(hào)之一，其通過(guò)調(diào)控RANKL/ RANK/OPG，對(duì)骨細(xì)胞的分化、破骨細(xì)胞的生成與凋亡均有影響。

另一方面，國(guó)外多項(xiàng)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)骨量與動(dòng)脈粥樣硬化性疾病相關(guān)。Schulz等〔34〕的前瞻性研究發(fā)現(xiàn)主動(dòng)脈鈣化程度與骨密度(BMD)呈負(fù)相關(guān)，臨床研究中低BMD是一個(gè)很好的預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化的指標(biāo)。近期的研究表明，在動(dòng)脈管壁中存在一類(lèi)細(xì)胞，一定條件下可以自發(fā)形成鈣化灶，并表現(xiàn)出成骨細(xì)胞的特性，提示血管鈣化可能是一種“另類(lèi)”的骨化過(guò)程〔35〕。研究發(fā)現(xiàn)OPG/RANKL/RANK通路在OP與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中起重要作用，OPG基因敲除的小鼠不僅表現(xiàn)出骨量的嚴(yán)重丟失，還出現(xiàn)了嚴(yán)重的主動(dòng)脈和腎動(dòng)脈鈣化，再轉(zhuǎn)錄入OPG基因后則可以預(yù)防動(dòng)脈鈣化病變的發(fā)生和骨量的丟失〔36〕。P38MAPK作為OPG/RANKL/RANK信號(hào)通路中的組成部分，對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的心腦血管疾病而言，P38MAPK水平的變化也是有其重要的意義。因此腦梗死患者處于長(zhǎng)期肢體固定或臥床狀態(tài)時(shí)，可導(dǎo)致OP，心腦血管疾病發(fā)病率增加。此時(shí)如果通過(guò)調(diào)節(jié)P38MAPK的表達(dá)，使其一方面誘導(dǎo)間充質(zhì)肝細(xì)胞更多分化為成骨細(xì)胞，另一方面促進(jìn)成骨細(xì)胞在目標(biāo)部位的分化，可能幫助患者患肢的成骨過(guò)程與破骨過(guò)程的平衡得以緩解或恢復(fù)，減少OP的形成，防止心腦血管動(dòng)脈粥樣硬化等的發(fā)生，減少腦梗死或再發(fā)梗死等疾病的出現(xiàn)，從而能夠起到很好的預(yù)防與治療作用，具有很高的臨床價(jià)值。

5參考文獻(xiàn)

1范衡宇，佟超，孫青原.絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)〔J〕.動(dòng)物學(xué)雜志，2002；37(5)：99-101.

2Lai CF, Chaudhary L, Fausto A,etal. Erk is essential for growth, differentiation, integrin expression, and cell function in human osteoblastic cells.〔J〕. J Biol Chem, 2001;276(17):14443-50.

3沈逸,何東儀. 調(diào)控破骨細(xì)胞分化發(fā)育的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究進(jìn)展〔J〕. 現(xiàn)代免疫學(xué), 2013;33(4):341-5.

4Sheth K, Friel J, Nolan B,etal. Inhibition of p38 mitogen activated protein kinase increases lipopolysaccharide induced inhibition of apoptosis in neutrophils by activating extracellular signal-regulated kinase〔J〕. Surgery, 2001;130(2):242-8.

5王月平, 武小薇, 張一娜. 心肌缺血耐受保護(hù)機(jī)制研究進(jìn)展〔J〕. 心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志, 2012;21(2):210-3.

6李菲菲, 閻瀟, 王慶, 等. p38 絲裂素活化蛋白激酶信號(hào)通路在應(yīng)力調(diào)控成肌細(xì)胞分化中的作用〔J〕. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2012;30(6): 574-8.

7Perry JJP,Harris RM,Moiani D,etal.p38α MAP kinase C-terminal domain binding pocket characterized by crystallographic and computational analyses〔J〕. J Mol Biol, 2009;391(1):1-11.

8范素芳, 王文雅, 張柳. 絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨的作用〔J〕. 中國(guó)組織工程研究,2012;16(37):7015-9.

9Moran N. p38 kinase inhibitor approved for idiopathic pulmonary fibrosis〔J〕. Nature Biotechnol, 2011;29(4):301.

10Feng X. Regulatory roles and molecular signaling of TNF family members in osteoclasts〔J〕. Gene, 2005;350(1):1-13.

11Schindler JF, Monahan JB, Smith WG. p38 pathway kinases as anti-inflammatory drug targets〔J〕. J Dent Res, 2007;86(9):800-11.

12張勇,馬勇, 朱宇旌, 等. p38 絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)途徑調(diào)節(jié)骨骼肌生長(zhǎng)發(fā)育的機(jī)理〔J〕. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2012;24(1):14-9.

13Thorp E, Vaisar T, Subramanian M,etal. Shedding of the Mer tyrosine kinase receptor is mediated by ADAM17 protein through a pathway involving reactive oxygen species, protein kinase Cδ, and p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK)〔J〕. J Biol Chem,2011;286(38):33335-44.

14Yoo K,Choi JW,Choi MS,etal.Mitogen-activated protein kinases (MAPKs) mediate SIN 1/glucose deprivation induced death in rat primary astrocytes[J].Arch Pharm Res,2005;28(10):942-7.

15Haddad JJ.Mitogen activated protein kinases and the evolution of Alzheimer's:a revolutionary neurogenetic axis for therapeutic intervention[J].Prog Neurobiol,2004;73(4):359-77.

16Pei Z,Cheung RT.Melatonin protects SHSY5Y neuronal cells but not cultured astrocytes from ischemia due to oxygen and glucose deprivation[J].J Pineal Res,2003;34(3):194-201.

17李廣明,李軍,張躍. 缺血預(yù)處理減輕沙土鼠腦缺血再灌注損傷與海馬 CA1 區(qū) p-p38MAPK 表達(dá)的關(guān)系〔J〕. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2010;30(6):801-5.

18曹紅, 李軍, 李廣明, 等. 姜黃素對(duì)沙土鼠腦缺血/再灌注損傷的海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡和即早基因c-fos, c-jun, NF-κB表達(dá)變化的關(guān)系〔J〕. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志, 2007;23(2)：184-8.

19Kevin MW,Richard D, Becky A,etal.Activation of p38 MAPK in microglia after ischemia〔J〕. Neurochemistry,2005;70(4):1764-7.

20Zayzafoon M. Calcium/calmodulin signaling controls osteoblast growth and differentiation〔J〕. J Cell Biochem, 2006;97(1):56-70.

21莊秋宇,劉俊,韓家淮. p38絲裂原活化蛋白激酶的功能與調(diào)控機(jī)制〔J〕. 中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào),2013;2(15):198-203.

22黃少慧, 李娟, 趙毅, 等. 補(bǔ)腎中藥骨靈片對(duì)人成骨細(xì)胞功能和p38活化原蛋白激酶通路的影響〔J〕. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志, 2007;7(5):418-20.

24Xiao G, Jiang D, Thomas P,etal. MAPK pathways activate and phosphorylate the osteoblast-specific transcription factor, Cbfa1〔J〕. J Biol Chem, 2000;275(6):4453-9.

25Tang CH, Huang TH, Chang CS,etal. Water solution of onion crude powder inhibits RANKL-induced osteoclastogenesis through ERK, p38 and NF-kappaB pathways〔J〕. Osteoporos Int, 2009;20(1):93-103.

26Bai X, Lu D, Bai J,etal. Oxidative stress inhibits osteoblastic differentiation of bone cells by ERK and NF-κB〔J〕. Biochem Biophys Res Commun, 2004;314(1):197-207.

27Ozlem A,Ozcan Er,Neslihan S,etal. Total oxidative/anti-oxidative status and relation to bone mineral density in osteoporosis〔J〕. Rheumat Int,2008;(4):676-81.

28Nakajima A,Sanjay A,Chiusaroli R,etal.Loss of Cbl-b in-creases osteoclast bone-resorbing activity and induces osteopenia〔J〕. J Bone Mineral Res, 2009;24(7):1162-72.

29張莉莉, 李玉坤. 生長(zhǎng)因子對(duì)骨代謝影響的研究進(jìn)展〔J〕. 國(guó)際藥學(xué)研究雜志,2012;39(2):121-6.

30Zhao Y, Li J, Liu Y,etal. Gu Ling Pian, a traditional Chinese medicine, regulates function and OPG/RANKL synthesis of osteoblasts via the p38 MAPK pathway〔J〕. J Pharmacy Pharmacology, 2007;59(8):1167-73.

31Luo XH, Guo LJ, Yuan LQ,etal. Adiponectin stimulates human osteoblasts proliferation and differentiation via the MAPK signaling pathway〔J〕. Exper Cell Res, 2005;309(1):99-109.

32Schwarz EM, Lu AP, Goater JJ,etal. Tumor necrosis factor-α/nuclear transcription factor-κB signaling in periprosthetic osteolysis〔J〕. J Orthopaed Res, 2000;18(3):472-80.

33Yamanaka Y,Abu-Amer Y,Faccio R.Map kinase c-JUN N-terminal kinase mediates PMMA induction of osteoclasts〔J〕. J Orthopt Res,2006;24(7):1349-57.

34Schulz E,Arfai K,Liu XD，etal.Aortic calcification and the risk of osteoporosis and fractures〔J〕.J Clini Endocrinol Metab,2004;89(9)：4246-53.

35Abedin M，Tintut Y，Demer LL，etal.Vascular calcification: mechanisms and clinical ramifications〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2004;24(7)：1161-70.

36Min H，Morony S，Sarosi I，etal. Osteoprotegerin reverses osteoporosis by inhibiting endosteal osteoclasts and prevents vascular calcification by blocking a process resembling osteoclastogenesis〔J〕. J Exp Med，2000;192(4)：463-74.

〔2014-07-10修回〕

(編輯李相軍)