袁昌道

MDR水平檢測(cè)篩選食管癌化療藥物的效果分析

袁昌道

【摘要】目的 分析MDR水平檢測(cè)篩選食管癌化療藥物的效果。方法檢測(cè)124例食管癌患者化療藥物處理后MDR基因表達(dá)水平。結(jié)果 食道癌腫瘤組織經(jīng)不同藥物處理后藥組MDR表達(dá)水平高于敏感組。結(jié)論 MDR基因水平可以為個(gè)體化療提供指導(dǎo)。

【關(guān)鍵詞】MDR；食管癌；敏感性

作者單位：462300河南省漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科

Analysis the Effect of MDR Level Detection in Screen Esophagus Cancer of Chemotherapeutics

YUAN Changdao Luohe City Yancheng District The People's Hospital Gastroenterology Department in He’nan Province, Luohe 462300, China

[Abstract]Objective To analysis the MDR level detection of screening of esophageal cancer chemotherapy drugs. Methods Test 124 cases of patients with esophageal cancer after chemotherapy drug treatment of MDR gene expression levels. Results The esophageal tumor treatment group treated with different drugs MDR expression level is higher than sensitive group. Conclusion The MDR gene level can provide guidance for individual chemotherapy.

[Key words]MDR, Esophageal cancer, Sensitivity

食管癌目前治療采用手術(shù)治療和輔助化療，在對(duì)患者進(jìn)行化療前，藥敏試驗(yàn)起著關(guān)鍵作用[1]。MDR水平檢測(cè)能較好的預(yù)測(cè)腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物耐受性[2]。本研究分析MDR水平檢測(cè)篩選食管癌化療藥物的效果，具體報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1 一般資料

選擇2001年1月～2010年1月我院收治食管癌患者124例，均經(jīng)病理、影像學(xué)確診[3]。男81例，女43例，年齡31～72歲，平均年齡（53.2±11.4）歲。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有31例，無(wú)93例。手術(shù)標(biāo)本86例，淋巴結(jié)活檢18例，穿刺標(biāo)本20例。1.2儀器和試劑

選擇性培養(yǎng)基、熒光酶-熒光素凍干品購(gòu)自南京建成生物研究所。逆轉(zhuǎn)錄試劑盒由美國(guó)sigma公司提供。雷勃MK 3熒光測(cè)定儀由美國(guó)賽默飛世爾公司提供。

1.3化療藥物

化療藥物選擇常規(guī)抗癌藥物。唑來(lái)膦酸（江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20113138）、長(zhǎng)春瑞濱（法國(guó)皮爾·法伯制藥公司，H20030660）、表柔比星（山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20123294）。

1.4RT-PCR檢測(cè)MDR基因表達(dá)水平

取新鮮食道癌腫瘤組織和癌旁組織，剪成小塊，加入1 ml Trizol，研磨，4℃裂解，共30 min，按照實(shí)驗(yàn)過(guò)程提取mRNA，試劑盒程序逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。PCR反應(yīng)體系：95℃ 預(yù)變性5 min；95℃變性30 sec，復(fù)性45 sec，72℃延伸1 min，共26個(gè)循環(huán)；72℃延伸10 min。產(chǎn)物采用1.5%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離。實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)MDR水平。

1.5藥物敏感性

IC 50＜25%、PPC及IC 90＜100%，PPC為高度敏感。IC 50＜25%、PPC及IC 90＞100%，PPC為中度敏感；IC 50＞25%、PPC及IC 90＞100%，PPC為輕度敏感。IC 50＞25%、PPC及IC 90＜100% PPC為耐藥；其中體外有效：高度敏感或中度敏感；體外有效：輕度敏感或耐藥[1]。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（x-±s）表示，

采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1患者癌組織及癌旁組織MDR基因表達(dá)水平

癌組織MDR基因表達(dá)水平（2.87±0.81）高于癌旁組織（-1.59±2.33），P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2藥敏結(jié)果

藥敏檢查結(jié)果為：唑來(lái)膦酸、長(zhǎng)春瑞濱、表柔比星、唑來(lái)膦酸＋長(zhǎng)春瑞濱、唑來(lái)膦酸＋長(zhǎng)春瑞濱＋表柔比星耐藥：2.26±0.87）、（2.12±1.26）、（1.69±1.43）、（0.59±2.53）、-0.58±2.69），敏感：（1.58±1.56）、（1.41±1.38）、（1.85±1.53）、（-1.28±2.49）、（-3.12±2.37）。食道癌腫瘤組織經(jīng)不同藥物處理后MDR基因表達(dá)水平對(duì)比，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。耐藥組MDR表達(dá)水平高于敏感組，敏感組MDR表達(dá)水平和耐藥組MDR表達(dá)水平對(duì)比，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同藥物處理后敏感組MDR表達(dá)水平差異明顯，聯(lián)合用藥組更加明顯。

2.3MDR基因表達(dá)與化療藥物敏感性分析

不同化療藥物處理腫瘤細(xì)胞后耐藥情況：唑來(lái)膦酸耐受15例，MDR基因高表達(dá)60.0%，低度敏感22例，中度敏感66例，高度敏感21例；長(zhǎng)春瑞濱耐受9例，MDR基因高表達(dá)66.7%，低度敏感17例，中度敏感80例，高度敏感7例；表柔比星耐受14例，MDR基因高表達(dá)64.3%，低度敏感30例，中度敏感51例，高度敏感29例；唑來(lái)膦酸＋長(zhǎng)春瑞濱耐受6例，MDR基因高表達(dá)66.7%，低度敏感34例，中度敏感45例，高度敏感39例；唑來(lái)膦酸＋長(zhǎng)春瑞濱＋表柔比星耐受8例，MDR基因高表達(dá)75.0%，低度敏感27例，中度敏感33例，高度敏感56例；52例常規(guī)化療藥物耐受，34例MDR基因顯示為高表達(dá)。敏感組聯(lián)合用藥組的高敏感例數(shù)較高。

3　討論

化療是治療惡性腫瘤的有效手段，不同腫瘤患者對(duì)相同的化療藥物表現(xiàn)不同的敏感性，并出現(xiàn)耐藥性，尤其多藥耐藥性對(duì)化療的效果更加明顯。因此，化療藥物的敏感性試驗(yàn)對(duì)患者的藥物的篩選非常重要[3-4]。本研究中，在針對(duì)不同的患者進(jìn)行化療方案設(shè)計(jì)時(shí)，采用腫瘤組織體外細(xì)胞培養(yǎng)，并進(jìn)行相關(guān)的藥敏實(shí)驗(yàn)，通過(guò)檢查MDR的表達(dá)水平來(lái)預(yù)測(cè)癌細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性。通過(guò)RT-PCR檢測(cè)不同患者的MDR基因表達(dá)水平，124例食管癌患者中，有52例常規(guī)化療藥物發(fā)生耐受性，其中34例MDR基因顯示為高表達(dá)，因此，針對(duì)敏感性的患者進(jìn)一步進(jìn)行化療方案的調(diào)整，結(jié)果不同藥物組合中高度敏感例數(shù)有所改變。

總之，采用化療藥物敏感性試驗(yàn)和MDR基因表達(dá)水平檢測(cè)分析效果顯著。

參考文獻(xiàn)

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·技術(shù)應(yīng)用·

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.26.018

【文章編號(hào)】1674-9308（2015）26-0025-02

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【中圖分類號(hào)】R735.1