索琳娜，王薇

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院內(nèi)分泌科，沈陽 110032）

利拉魯肽對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠血清網(wǎng)膜素1及胰島素抵抗的影響

索琳娜，王薇

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院內(nèi)分泌科，沈陽 110032）

目的研究利拉魯肽對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠血清網(wǎng)膜素1水平及胰島素抵抗的影響。方法雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組（NC組）、高脂飲食組（HF組）、高脂飲食+利拉魯肽低劑量組（HF+Lira 1組）及高脂飲食+利拉魯肽高劑量組（HF+Lira 2組）。分別飼以普通顆粒飼料及高脂飼料，12周后，HF+Lira 1及HF+Lira 2組分別給予利拉魯肽腹腔注射4周。16周各組大鼠稱取體質(zhì)量，心臟取血，分別進(jìn)行血糖、血脂、胰島素、網(wǎng)膜素1水平測(cè)定，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)。結(jié)果16周后，與NC組比較，HF組大鼠體質(zhì)量、甘油三酯（TG）水平明顯升高（P＜0.05），網(wǎng)膜素1水平明顯下降（P＜0.05），胰島素抵抗指數(shù)明顯升高（P＜0.05）；總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇水平有所升高，高密度脂蛋白膽固醇有所下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。與HF組比較，HF+Lira 1及HF+Lira 2組大鼠體質(zhì)量明顯下降（P＜0.05），TG水平顯著下降（P＜0.05），網(wǎng)膜素1水平明顯上升（P＜0.05），胰島素抵抗指數(shù)明顯下降（P＜0.05）；HF+Lira 2組與HF+Lira1組比較，大鼠體質(zhì)量明顯下降（P＜0.05），TG水平顯著下降（P＜0.05），網(wǎng)膜素1水平明顯上升（P＜0.05），胰島素抵抗指數(shù)明顯下降（P＜0.05）。結(jié)論利拉魯肽可減輕高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖，改善胰島素抵抗，可能的機(jī)制之一是與其升高血清網(wǎng)膜素1水平有關(guān)，且這種作用與劑量相關(guān)。

利拉魯肽；肥胖；網(wǎng)膜素1；胰島素抵抗

由于膳食結(jié)構(gòu)以及生活方式的改變，目前超重和肥胖的人口比例在逐年增加，由肥胖引發(fā)的2型糖尿病、血脂異常、脂肪肝等代謝相關(guān)性疾病的發(fā)病率亦逐年增加。因此，減輕體質(zhì)量已成為目前治療代謝性疾病的關(guān)鍵。利拉魯肽是胰高血糖素樣肽1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）類似物，目前已有大量的資料表明，它可以降低體質(zhì)量、改善胰島素抵抗［1，2］。網(wǎng)膜素1是脂肪細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，有研究［3］表明它可改善胰島素抵抗。本研究通過觀察不同劑量利拉魯肽對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠體質(zhì)量、血脂、胰島素抵抗指數(shù)以及網(wǎng)膜素1的影響，探討利拉魯肽減輕體質(zhì)量、改善胰島素抵抗的作用及可能的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

6周齡SPF級(jí)雄性Wistar大鼠40只，由中國醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物部提供，體質(zhì)量140～180 g，分籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)食及攝取水分，明暗周期12 h（8時(shí)～16時(shí)），溫度保持在（23±2）℃，相對(duì)濕度為40%～60%。

1.2 飼料配制及主要藥品、試劑

標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，熱量比：蛋白質(zhì)28%、脂肪12%、碳水化合物60%。高脂飼料的成分為：普通飼料55%、熟豬油30%、奶粉10%、膽固醇粉3%、蛋黃粉2%。將上述原料均勻混合，制成顆粒狀，烘干并經(jīng)鈷60照射滅菌即得高脂飼料。高脂飼料熱量比：蛋白質(zhì)20%、脂肪59%、碳水化合物21%［4］。利拉魯肽購自丹麥諾和諾德公司；網(wǎng)膜素1 ELISA試劑盒購自美國Phoenix公司；大鼠胰島素放免試劑盒購自美國Linco公司；甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）及低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）均由自動(dòng)生化儀完成。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 肥胖大鼠模型的建立：實(shí)驗(yàn)大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，隨機(jī)抽取10只為正常對(duì)照組（NC組），飼以正常飼料，其余30只飼以高脂飼料，共12周，每周固定時(shí)間測(cè)量體質(zhì)量。第12周后高脂飼料喂養(yǎng)的30只大鼠隨機(jī)分為3組：高脂飲食組（HF組，n= 10）、高脂飲食+利拉魯肽低劑量組（HF+Lira 1組，n=10）、高脂飲食+利拉魯肽高劑量組（HF+Lira 2組，n=10）。HF組繼續(xù)飼以高脂飼料，HF+Lira 1組飼以高脂飼料的同時(shí)給予利拉魯肽（0.6 mg·kg-1·d-1）腹腔注射，HF+Lira 2組飼以高脂飼料的同時(shí)給予利拉魯肽（1.2 mg·kg-1·d-1）腹腔注射。

1.3.2 血液標(biāo)本采集及指標(biāo)測(cè)定：16周末各組動(dòng)物禁食12 h，稱取體質(zhì)量，經(jīng)10%水合氯醛（0.4 mL/100 g體質(zhì)量）腹腔注射麻醉后，心臟穿刺取血，離心，置于-20℃保存，用于血糖、血脂、胰島素、網(wǎng)腺素1測(cè)定。應(yīng)用穩(wěn)態(tài)模型評(píng)價(jià)胰島素抵抗指數(shù)（homeostasis model assessment for insulin resistance，HOMA-IR）：HOMA-IR=FPG×FIN/22.5。

1.3.3 內(nèi)臟脂肪標(biāo)本的收集：迅速摘取附睪周圍及腎周脂肪，分別稱濕重，體脂比=腎周脂肪（g）+附睪周圍脂肪（g）/尸重（g）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 2組大鼠體質(zhì)量及體脂比

實(shí)驗(yàn)大鼠喂養(yǎng)12周后，HF組較NC組體質(zhì)量、體脂比明顯升高（P＜0.05），應(yīng)用利拉魯肽后，HF+ Lira 1組與HF+Lira 2組體質(zhì)量、體脂比明顯下降，且2組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），見表1。

2.2 2組大鼠生化指標(biāo)及網(wǎng)膜素1比較

表1 各組大鼠體質(zhì)量及體脂比Tab.1 Weight and fat mass ratio of the rats in four groups

表1 各組大鼠體質(zhì)量及體脂比Tab.1 Weight and fat mass ratio of the rats in four groups

1）P＜0.05 vs NC group；2）P＜0.05 vs HF group；3）P＜0.05 vs HF+Lira 1 group.

Group n Weight（g） Fat mass ratio（%）NC 10 516.42±43.23 2.44±0.26 HF 10 598.74±54.621） 3.83±0.431）HF+Lira 1 10 552.14±41.072） 3.21±0.352）HF+Lira 2 10 530.22±39.912），3） 2.80±0.422），3）

HF組TG較NC組明顯升高（P＜0.05），TC、LDL-C較NC組略升高，HDL-C略下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），F(xiàn)BG、FINS略升高，但差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），HOMA-IR明顯升高（P＜0.05），網(wǎng)膜素1明顯下降（P＜0.05），應(yīng)用利拉魯肽后，HF+ Lira 1組及HF+Lira 2組TG、HOMA-IR較HF組均明顯下降（P＜0.05），網(wǎng)膜素1明顯升高（P＜0.05），且HF+Lira 2組比HF+Lira 1組效果更明顯（P＜0.05），見表2。

3 討論

肥胖引發(fā)的各種代謝性疾病已經(jīng)成為21世紀(jì)對(duì)人類威脅最大的疾病之一。對(duì)于肥胖的研究一直是內(nèi)分泌學(xué)的研究熱點(diǎn)。通過實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)建立肥胖動(dòng)物模型成為肥胖研究的重要方法。高脂飲食導(dǎo)致的肥胖模型，與胰島素抵抗的產(chǎn)生密切相關(guān)［5］，而且更能體現(xiàn)環(huán)境因素對(duì)肥胖的影響，因此，高脂飲食喂養(yǎng)法已成為目前制備肥胖及胰島素抵抗動(dòng)物模型的常規(guī)方法之一［6］。本研究采用的高脂飼料熱量比（脂肪59%、蛋白質(zhì)20%、碳水化合物21%）滿足高脂飼料條件，結(jié)果顯示喂養(yǎng)16周后與NC組對(duì)比HF組大鼠體質(zhì)量明顯升高，體脂比明顯升高，而且TG和HOMA-IR指數(shù)都明顯升高，提示高脂飲食可誘導(dǎo)建立肥胖大鼠模型，而且這種大鼠模型顯示胰島素抵抗的特征。

表2 各組大鼠血脂、胰島素抵抗指數(shù)及網(wǎng)膜素1比較Tab.2 Lipid profile，HOMA-IR，omentin-1 of the rats in the four groups

表2 各組大鼠血脂、胰島素抵抗指數(shù)及網(wǎng)膜素1比較Tab.2 Lipid profile，HOMA-IR，omentin-1 of the rats in the four groups

1）P＜0.05 vs NC group；2）P＜0.05 vs HF group；3）P＜0.05 vs HF+Lira 1 group.TG，triglyceride；TC，total cholesterol；LDL-C，low density lipoprotein cholesterol；HDL-C，high density lipoprotein cholesterol；FBG，fast blood glucose；FINS，fast insulin.

Group TG（mmol/L） TC（mmol/L） LDL-C（mmol/L） HDL-C（mmol/L） FBG（mmol/L） FINS（mIU/L） HOMA-IR Omentin-1（ng/mL）NC 0.34±0.08 1.68±0.13 0.96±0.07 0.67±0.12 6.28±0.30 5.66±0.87 1.58 68.23±5.17 HF 0.68±0.131） 1.82±0.16 1.01±0.10 0.64±0.11 7.04±0.46 12.01±1.32 3.761） 42.33±6.241）HF+Lira1 0.51±0.112） 1.80±0.12 0.98±0.09 0.65±0.08 6.62±0.29 10.80±1.17 3.182） 50.68±7.682）HF+Lira 0.42±0.102），3） 1.77±0.11 0.97±0.05 0.63±0.13 6.37±0.33 9.61±1.03 2.742），3） 56.27±7.942），3）

網(wǎng)膜素與瘦素、抵抗素、脂聯(lián)素等一起構(gòu)成了脂肪組織參與內(nèi)分泌調(diào)節(jié)的細(xì)胞因子［7］。網(wǎng)膜素1是網(wǎng)膜素在血中的主要表現(xiàn)形式。有研究表明［8］，肥胖患者血中網(wǎng)膜素1水平下降，體質(zhì)量減輕后網(wǎng)膜素1水平升高，胰島素抵抗改善。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)［9］也顯示，高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖胰島素抵抗大鼠，血清網(wǎng)膜素1水平下降。本研究中高脂飲食喂養(yǎng)16周后，HF組與NC組對(duì)比網(wǎng)膜素1水平明顯降低，與之前的報(bào)道一致。

利拉魯肽是GLP-1類似物，目前已應(yīng)用于臨床，與傳統(tǒng)的降糖藥物相比，它不但能夠降低血糖，對(duì)體質(zhì)量、體脂有很好的控制作用［10］，而且可以顯著降低TG［11］。本研究中將不同劑量的利拉魯肽腹腔注射到高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠體內(nèi)，4周后大鼠的體質(zhì)量、體脂比明顯下降，血TG水平明顯降低，HOMA-IR明顯下降，同時(shí)血網(wǎng)膜素1水平明顯升高，說明利拉魯肽可改善肥胖帶來的胰島素抵抗，其機(jī)制可能與其升高血網(wǎng)膜素1水平有關(guān)，且高劑量利拉魯肽組效應(yīng)強(qiáng)于低劑量組，說明其效應(yīng)與劑量相關(guān)。本研究樣本量有限，利拉魯肽作為一種新型的降糖藥物，其減輕體質(zhì)量、改善胰島素抵抗的機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。

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（編輯 武玉欣）

Effects of Liraglutide on Omentin-1 and Insulin Resistance in High-fat Diet Obese Rats

SUOLin-na，WANGWei

（Department of Endocrinology，The Fourth Affiliated Hospital，China Medical University，Shenyang110032，China）

ObjectiveTo investigate the effects of liraglutide on omentin-1 and insulin resistance in high-fat diet rats.MethodsForty male Wistar rats were randomly divided into four groups，and respectively fed with normal diet（NC group），high-fat diet（HF group），high-fat diet with small doses of liraglutide injected intraperitoneally（HF+Lira 1 group），and high-fat diet with large doses of liraglutide injected intraperitoneally（HF+Lira 2 group）.After 16 weeks，the body weight，serum lipid levels，omentin-1 and insulin were measured，and then the insulin resistance index were calculated.ResultsThe body weight，the levels of TG，and the insulin resistance index in HF group were higher than NC group，omentin-1 was lower，and the differences were statistically significant（P＜0.05）.TC，LDL-C were elevated，HDL-C was reduced，but there were no statistically differences（P＞0.05）.Compared with HF group，the body weight，the levels of TG，and the insulin resistance index in HF+Lira 1 group and HF+Lira 2 group were lower，omentin-1 was higher，the differences were statistically significant（P＜0.05）.Furthermore，the effects of HF+Lira 2 group were more pronounced.ConclusionLiraglutide can restrain high-fat diet induced obesity，and improve insulin resistance through elevated the level of omentin-1 in dose-dependent manner.

liraglutide；obese；omentin-1；insulin resistance

R587.1

A

0258-4646（2015）12-1129-03

索琳娜（1978-），女，主治醫(yī)師，博士. E-mail：281778315@qq.com

2015-01-26

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