王 彬，韓永龍

上海市第六人民醫(yī)院，上海 200233

腎陰虛證的代謝組學研究

王 彬，韓永龍△

上海市第六人民醫(yī)院，上海 200233

從腎陰虛機理研究現(xiàn)狀及成就探討代謝組學在腎陰虛研究中的意義，為多角度、多視角進一步認識腎陰虛的本質提供了重要的方法基礎和技術條件。

腎陰虛；代謝組學；研究進展

中醫(yī)認為腎在人體是一個極其重要而又包涵多種功能的臟器，內藏元陰元陽(腎之陰陽的別稱)為水火之宅，是先天之本，生命之根。腎陰是一身陰氣之本，具有滋養(yǎng)全身臟腑陰氣的作用，“五臟之陰氣，非此不能滋”，腎陰充足，則全身臟腑之陰皆充足。腎陰虧虛則可導致全身臟腑之陰亦虛。而任何臟腑陰陽的偏衰，日久也會累及腎之陰陽，導致腎之陰陽的不足。近年來，在中醫(yī)證候實質研究中已初步證實腎陰虛證具有現(xiàn)代病理生理學基礎。本文對腎陰虛臨床表現(xiàn)、研究機制及研究方法等進行總結歸納。

1 腎陰虛的癥狀表現(xiàn)

腎陰虛證為中醫(yī)學的基本證型之一，臨床主要表現(xiàn)為干咳少痰、短氣喘息、口燥咽干、五心煩熱、潮熱盜汗、頭暈耳鳴、眩暈目澀、牙齒松動或疼痛、腰膝酸痛、失眠多夢、遺精早泄、性欲亢進、顴紅目赤、大便干結、小便短少等癥狀，在現(xiàn)代醫(yī)學中常見于糖尿病，急、慢性腎炎，高血壓病、結核病、骨質疏松癥、甲狀腺功能亢進等病。腎陰為命門之水，滋養(yǎng)機體五臟六腑之陰，調補腎陰可能通過改善神經內分泌網絡從而對各系統(tǒng)疾病發(fā)揮治療作用。

2 腎陰虛的機制研究

眾多學者運用現(xiàn)代技術和方法對腎陰虛證本質進行研究，現(xiàn)從神經-內分泌、免疫、微量元素和骨密度、血液流變學、能量代謝等生化方面闡釋腎陰虛的發(fā)生機制及其科學性，為腎陰虛證的客觀指標評價提供參考。

2.1 神經-內分泌 腎陰虛與激素和神經肽的關系是眾多學者研究的焦點，研究成果形成了較為一致的結論［1］：1)下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸-胸腺(HP A T)軸上基因組的改變；2)下丘腦-垂體-甲狀腺軸功能的亢進；3)下丘腦-垂體-性腺軸呈現(xiàn)出紊亂狀態(tài)。有報道慢性胃炎腎陰虛證型患者尿中17-羥類固醇(17-O H C S)含量顯著低于正常人［2］；肝腎陰虛證血清中下丘腦TR H、T3、T4分泌增加，游離三碘甲腺原氨酸(F T3)、游離四碘甲腺原氨酸(F T4)、垂體促甲狀腺素(T S H)和血清T S H、血漿內啡肽都降低［3-5］；原發(fā)性骨質疏松腎陰虛證中，女性患者性激素睪酮、T/E2升高、雌二醇逐漸降低，而男性患者正好相反［6-7］；狼瘡性腎炎腎陰虛證患者男女2組E2、黃體生成素及F S H均較對照組升高［8］；左旋單鈉谷氨酸大鼠血漿C O RT、A C T H和下丘腦C R H含量明顯升高，下丘腦單胺類遞質中多巴胺、去甲腎上腺素等含量顯著降低［9］。

2.2 免疫功能 陰虛影響免疫功能，研究表明陰虛陽盛患者機體的免疫功能下降，I g M、I g G顯著升高［10］，出現(xiàn)各種類型的免疫缺陷病或容易產生自身免疫性疾病。陳小鋒等［11］采用酶聯(lián)免疫法測定腎虛患者的血清，發(fā)現(xiàn)白細胞介素-2(I L-2)低于正常對照組，而白細胞介素-6(I L-6)高于正常對照組；徐俊等［12］運用紅細胞C3b受體花環(huán)實驗和125I標記的方法，檢測了67例腎虛患者的紅細胞免疫功能和補體C R A，顯示腎虛患者紅細胞免疫功能和補體C R A均降低。

2.3 微量元素、骨密度 研究發(fā)現(xiàn)［13］腎陰虛證患者血漿中鋅銅含量均較同齡健康組明顯升高，說明鋅銅含量同時升高是腎陰虛的辨證指標之一；朱秀英等［14］的陰虛小白鼠實驗也支持此觀點。郭金瑞等［15］發(fā)現(xiàn)腎陰虛患者唾液中K+濃度高于正常人，Na+濃度明顯低于正常人，腎陰虛證患者Na+/K+明顯低于正常人。相關研究［16］檢測了319例青少年屈光不正患者頭發(fā)中微量元素含量，發(fā)現(xiàn)肝腎陰虛者占51.40%，多與缺鈣相關；原發(fā)性骨質疏松癥也表現(xiàn)腎陰虛癥狀，腎虛證骨密度明顯低于正常值，趙詠芳指出［17］應按“腎主骨”的理論論治；也有研究提示［18］腎陰虛患者骨密度較腎陽虛、腎氣虛低，較正常人更低。

2.4 血液流變學 “腎虛則精虧”“精血同源”，腎陰虛起初表現(xiàn)為紅細胞變形能力減弱，隨之出現(xiàn)腎虛衰退表現(xiàn)。血液屬陰，腎陰虛則化生血液功能失常。研究發(fā)現(xiàn)腎陰虛患者紅細胞變形能力受到嚴重損傷［19］；腎陰虛證患者紅細胞變形指數(shù)明顯低于正常人［15］。

2.5 能量代謝 能量代謝是生物體內物質代謝過程中所伴隨的能量釋放、轉移和利用等的變化反應。腎陰虛影響能量代謝，從代謝產物中反向分析疾病或藥物對機體的作用機制。腎陰虛證患者［20］血清中異檸檬酸脫氫酶活性明顯升高，乳酸脫氫酶活性明顯降低，此結果吻合了中醫(yī)理論“陰虛生內熱”的理論，腎陰虛證患者有氧代謝增強、無氧酵解反應減弱、機體能量代謝增加。朱方石［22］研究發(fā)現(xiàn)腎陰虛證患者血清T G、LDL-C h含量升高，紅細胞和血漿超氧化物歧化酶、全血谷胱甘肽過氧化物酶活力降低，而血中丙二醛含量升高，進一步證明腎陰虛者機體抗氧化能力減弱；肝腎陰虛型肝硬化患者血清總蛋白、白蛋白及白球蛋白比例顯著低于正常人［22］。腎陰虛與腎氣虛、腎陽虛、脾虛證組比較，顯示腎陰虛證組患者甘油三酯、膽固醇、收縮壓、舒張壓、脈壓差、平均動脈壓增高最顯著，高密度脂蛋白膽固醇降低顯著［23］。王彬等［24］研究甲亢陰虛大鼠尿液發(fā)現(xiàn)大鼠體內三羧酸循環(huán)發(fā)生障礙，糖、脂質、氨基酸等物質能量代謝出現(xiàn)紊亂。

3 腎陰虛代謝組學研究成果

代謝組學是20世紀90年代中期發(fā)展起來的一門新興學科，在生命活動的動態(tài)過程中，搜集代謝產物的變化資料，考察生物體受刺激或擾動后其代謝產物的變化規(guī)律，從而揭示機體生命活動本質。代謝組學采用全面、系統(tǒng)的研究方法，與中醫(yī)“整體觀念”思想和“司外揣內”思維模式有諸多相通之處，可實現(xiàn)中醫(yī)藥生物效應的整體性和動態(tài)性評價［25］。很多研究工作人員將代謝物組學方法引入腎陰虛證的現(xiàn)代研究，根據腎陰虛證目前研究進展和存在的問題，著重從動物模型著手，選用病證結合的動物模型，采用的技術有色譜［26］、質譜［27］、核磁共振［28］、毛細管電泳［29］、紅外光譜［30］對血樣或尿樣等代謝產物進行檢測(最常用NM R和L C-M S方法)，根據代謝產物標記物(b i om a r k e rs)了解和發(fā)現(xiàn)代謝產物變化與臟腑生理、病理的相互關系，使治療腎陰虛的中藥或中成藥的整體性作用機制和療效得到充分的展示和“挖掘”［31］。

3.1 NMR方法的應用及其成果 NM R方法對于樣品的前處理較為簡單和便捷，分析時間周期短，無損傷，不破壞樣品的結構和性質，能完成代謝產物中大多數(shù)化合物的檢測，能滿足代謝組學對盡可能多的化合物進行檢測的目的［32］。高崗［33］采用NM R方法對氫化可的松導致的腎陰虛模型大鼠尿液分析發(fā)現(xiàn)肌氨酸酐、琥珀酸含量升高，二甲胺、天冬氨酸、牛黃酸、馬尿酸含量降低；對其血漿分析發(fā)現(xiàn)乳酸、醋酸、丙酮、膽堿、酪氨酸含量升高，琥珀酸、檸檬酸、甲酸含量降低。李英帥［34］采用NM R研究陰虛體質患者的尿液，其中尿肌酰、二甲胺、檸檬酸、氧化三甲胺濃度降低，甘氨酸，葡萄糖濃度升高；血漿中乳酸、丙氨酸、葡萄糖、脂類化合物濃度降低。

3.2 LC-MS方法的應用及其成果 L C-M S技術法具有更低的檢測限，更高的靈敏度，適合于生物樣本中復雜代謝產物的檢測和潛在標記物的鑒定，對含量低的代謝產物研究具有獨特優(yōu)勢，被越來越多地用于代謝組學研究［35-36］。高崗［33］采用L C-Q T O F-M S分析手段對氫化可的松導致大鼠腎陰虛模型進行研究，根據化合物的準確質量數(shù)在H M D B，K E GG，M E T L IN，L I P I D M A P S，P u b C h e m等數(shù)據庫中查詢可能的化合物結構，對標記物進行分析。尋找到馬尿酸、色胺酸、N1-Met h y l-2-p yr i do n e-5-c a rbo x a mi d e(C7H8N2O2)、芥子醇等4種標志物。采用相同方法對血漿研究尋找到1-棕櫚酰-s n-甘油-3-磷酸膽堿，L yso P C［18∶1(9Z)］兩種脂類標志物。

綜上所述，代謝組學研究從整體角度對腎陰虛的生物特征進行了探索，腎陰虛與機體的各項活動有密切關系，影響了人體生物功能的調節(jié)，使代謝產物發(fā)生潛移默化的變化，尋找腎陰虛的指標性物質對腎陰虛的治療也有一定的重要意義。

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M etabonom icsResearch Progresson the Syndrom e of K idney-Yin Deficiency

WANG Bin,HAN Yonglong△
The Shanghai Sixth People′s Hospital,Shanghai200233,China

Themeaning ofmetabonom ics in the researchesof the syndrome of kidney-Yin deficiency wasexplored by concluding the current research situation and achievements ofmechanisms of kidney-Yin deficiency syndrome,which provides importantmethodology bases and technical conditions for the further know ledge of the essentiality of kidney-Yin deficiency syndrome from themultiple pointsof view.

kidney-Yin deficiency;metabonomics;research progress

R289

A

1004-6852(2015)03-0143-03

2014-02-27

王彬（1986—),女,碩士學位,藥師。研究方向：代謝組學研究。

△通訊作者：韓永龍（1975—),男,博士學位,副主任藥師。研究方向：臨床藥學。