羅啟翅，左素清，張薇珊

(遂寧市中心醫(yī)院，四川 遂寧629000)

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基于胃癌組織端粒酶活性檢測的臨床病理分析

羅啟翅，左素清，張薇珊

(遂寧市中心醫(yī)院，四川 遂寧629000)

摘要：目的通過檢測胃癌組織中端粒酶活性，探討端粒酶與胃癌的臨床病理關(guān)系。方法選取2012年10月至2013年11月來我院治療的60例胃癌患者為研究對象，采用PCR-TRAP方法檢測胃癌組織及癌旁組織中端粒酶活性。結(jié)果胃癌組織中的端粒酶表達陽性率顯著高于癌旁組織(P<0.05),胃癌不同分期之間端粒酶活性陽性率比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，低分化胃癌組織端粒酶活性陽性率明顯高于高度分化和中度分化胃癌組織(P<0.05)。結(jié)論端粒酶活性上調(diào)可能參與胃癌的病理過程，端粒酶活性與胃癌臨床病理分化程度有關(guān)。

(ChinJLabDiagn,2015,19:1082)

端粒酶(Telomerase)是基本的核蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶，在細(xì)胞中負(fù)責(zé)端粒的延長，可將端粒DNA加至真核細(xì)胞染色體末端。端粒對于保持細(xì)胞活性具有重要作用，端粒酶能延長縮短的端粒(縮短的端粒其細(xì)胞復(fù)制能力受限)，從而增強體外細(xì)胞的增殖能力。端粒酶在保持端粒穩(wěn)定、基因組完整、細(xì)胞長期的活性和潛在的繼續(xù)增殖能力等方面有重要作用。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉(zhuǎn)化。目前對于胃癌的機制研究較多，有研究認(rèn)為[1，2]，端粒酶與細(xì)胞增殖分化有關(guān)，其活性在腫瘤發(fā)展過程中具有重要作用。因此，本研究通過檢測胃癌組織中端粒酶活性，探討端粒酶與胃癌的臨床病理關(guān)系。

1對象與方法

1.1　研究對象

60例胃癌組織及癌旁組織均來自2012年10月至2013年11月在我院治療的胃癌患者手術(shù)切除組織。2位病理醫(yī)師負(fù)責(zé)進行病理分型、分化程度和轉(zhuǎn)移情況認(rèn)定。60例胃癌患者中，男性40例，女性20例，年齡42-75歲，平均年齡(51.4±5.5)歲。按照胃癌TNM分期法[3]：Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期12例；高分化19例，中度分化26例，低分化15例；按照病理類型分為：腺癌40例，粘液癌17例，腺癌+粘液癌 3例。

1.2　方法

采用PCR-TRAP方法檢測胃癌組織及癌旁組織中端粒酶活性。用于端粒酶檢測的組織標(biāo)本冷PBS沖洗3次，標(biāo)本去除血跡后，離體1小時內(nèi)放入-80℃冰箱，統(tǒng)一檢測。PCR擴增儀購自美國PE公司，低溫離心機購自德國Heraeus公司，聚丙烯酰胺單雙體購自Sigma公司。端粒酶引物設(shè)計參考文獻[4]TS：5′-AATCCGTCGAG-CAGAGTT-3′,CX:5′-CCCTTACCCTTACCCTT-ACCCTTA-3′,參考文獻方法[4]TRAP法測定端粒酶活性。先進行蛋白提取，然后進行端粒酶活性測定。

1.3　統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行分析，率的比較用χ2檢驗及χ2校正檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1胃癌組織及癌旁組織端粒酶活性比較胃癌組織端粒酶活性陽性42例，陽性率為70.0%，癌旁組織端粒酶活性陽性4例，陽性率為6.7%，比較兩組端粒酶活性表達陽性率，胃癌組織顯著高于癌旁組織，結(jié)果有顯著性差異(P<0.05)，具體見表1。

表1　胃癌組織及癌旁組織端粒酶活性比較

2.2　端粒酶活性與胃癌病理TNM分期及分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系分析

經(jīng)過χ2檢驗，端粒酶活性陽性率與胃癌TNM不同分期及淋巴轉(zhuǎn)移之間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，端粒酶活性陽性率與不同分化程度之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，見表2。

表2　端粒酶活性與胃癌組織分化程度及

2.3　不同病理類型胃癌組織中端粒酶活性檢測結(jié)果

經(jīng)過χ2檢驗，端粒酶活性陽性率與不同病理類型之間無統(tǒng)計學(xué)差異，見表3。

表3　不同病理類型胃癌組織中端粒酶活性檢測結(jié)果

3討論

胃癌發(fā)病在我國各種惡性腫瘤中居首位，胃癌預(yù)后與胃癌的病理分期、部位、組織類型、及治療措施有關(guān)。有研究表明[5，6]，端粒酶活性與腫瘤發(fā)展密切相關(guān)。端粒酶是一種由催化蛋白和RNA模板組成的酶，可合成染色體末端的DNA，在保持端粒穩(wěn)定、基因組完整、細(xì)胞長期的活性和潛在的繼續(xù)增殖能力等方面具有重要作用。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉(zhuǎn)化。

本研究通過檢測不同類型胃癌組織中端粒酶的活性，探討端粒酶與胃癌的臨床病理關(guān)系。端粒酶活性在正常組織中幾乎無表達，在多數(shù)腫瘤組織中陽性表達，胃癌與其他腫瘤中端粒酶活性陽性率較高。本研究比較胃癌組織與癌旁正常組織中端粒酶活性發(fā)現(xiàn)，60例胃癌組織中端粒酶陽性率為70.0%，癌旁組織中端粒酶陽性率為6.7%，胃癌組織中的端粒酶表達陽性率顯著高于癌旁組織(P<0.05),提示端粒酶活性增強可能與胃癌發(fā)生過程有關(guān)，端粒酶活性檢測可聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物作為胃癌診斷的指標(biāo)。降低端粒酶的活性可能為臨床治療胃癌提供依據(jù)。本研究觀察端粒酶活性與臨床胃癌TNM分期、不同分化程度、臨床病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，端粒酶活性與胃癌TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床病理類型之間無統(tǒng)計學(xué)差異，但不同分化程度的端粒酶活性不同，分化程度低，端粒酶活性高。提示端粒酶活化與胃癌的分化、增殖有關(guān)，在胃癌的發(fā)展過程中具有重要作用，端粒酶活性檢測可作為診斷胃癌的方法之一。

胃癌組織端粒酶活性與臨床預(yù)后的關(guān)系尚未研究清楚。有研究表明[7-9]，端粒酶活性可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為判斷預(yù)后的參考；另有研究認(rèn)為[10-12]，端粒酶活性與臨床病理因素?zé)o關(guān)。本研究結(jié)果表明，胃癌不同分期之間端粒酶活性陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),低分化胃癌組織端粒酶活性陽性率明顯高于高度分化和中度分化胃癌組織(P<0.05)，端粒酶表達陽性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。提示端粒酶活性與胃癌分期、胃癌病理類型和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性，但與胃癌組織分化程度有關(guān)，分化程度低，端粒酶活性高。綜上所述，端粒酶活性上調(diào)可能參與胃癌的病理過程,端粒酶活性與胃癌臨床病理分化程度有關(guān)。

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關(guān)鍵詞：胃癌；端粒酶；PCR-TRAP；病理分析

The Cliniopathologjcal Research on Telomerase Activity in Gastric Cancer TissuesLUOQi-chi,ZUOSu-qing,ZHANGWei-shan.(TheCentralHospitalofSuiningCity,Sichuan，Suining629000,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the telomerase activity in gastric cancer tissues,in order to explore the relationship between telomerase and clinical pathology of gastric cancer.Methods60 cases of patients with gastric cancer were select as research subjects in our hospital from October 2012 to November 2013.The telomerase activities in gastric cancer tissue and adjacent cancer tissue were detected by using PCR-TRAP method.ResultsThe positive rate expression of telomerase in gastric carcinoma was significantly higher than those in adjacent tissues (P<0.05),the positive rate of telomerase activity between the different stages of gastric cancer was no significant difference(P>0.05),The positive rate of telomerase in poorly differentiated gastric cancer tissues was significantly higher than the activity of highly differentiated and moderately differentiated gastric cancer tissues (P<0.05).ConclusionTelomerase activation may be involved in the pathological process of gastric cancer,telomerase activity may relate to the degree of differentiation of gastric clinicopathological.

Key words:Gastric cancer;telomerase;PCR-TRAP;pathological analysis

(收稿日期：2014-05-28)

作者簡介：羅啟翅(1971-)，男，本科，副主任醫(yī)師，主要從事病理診斷研究。

文獻標(biāo)識碼：A

中圖分類號：R735.2

文章編號：1007-4287(2015)07-1082-03