徐曉鴻 陳家斌 夏銀穩(wěn)

ERα和ERβ在非小細(xì)胞性肺癌組織中的表達(dá)及與其臨床病理的相關(guān)性研究

徐曉鴻 陳家斌 夏銀穩(wěn)

目的探討雌激素受體(ER)α和β在非小細(xì)胞性肺癌組織中的表達(dá)及與其臨床病理的相關(guān)性。方法選取經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診的非小細(xì)胞肺癌220例患者作為研究對(duì)象。采用免疫組化方法檢測(cè)ERα和ERβ表達(dá)水平。結(jié)果兩種雌激素受體表達(dá)于細(xì)胞核內(nèi)，其中ERα陽(yáng)性表達(dá)率為4．09%，ERβ陽(yáng)性表達(dá)率為86．36%;ERα陽(yáng)性表達(dá)與臨床分期、病理分化程度有關(guān):Ⅰ期患者ERα陽(yáng)性表達(dá)率高于分期晚的患者(9．38%＞0．00%，χ2=12．121，P＜0．01);高分化患者ERα陽(yáng)性表達(dá)率高于中低分化患者(14．29%＞3．00%＞0．00%，χ2=14．756，P＜0．01)。ERβ陽(yáng)性表達(dá)與患者臨床分期、分化程度及病理類型有關(guān):Ⅰ期患者ERα陽(yáng)性表達(dá)率最低(78．12%，χ2=10．732，P=0．01)，腺癌及高分化非小細(xì)胞性肺癌患者ERβ具有更高表達(dá)率(70．7%，χ2=7．749，P=0．02;83．3%，χ2=12．738，P＜0．01)。結(jié)論ERα和ERβ在非小細(xì)胞肺癌患者中表達(dá)情況與其臨床病理特點(diǎn)具有相關(guān)性，提示雌激素受體表達(dá)可能在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

非小細(xì)胞肺癌;雌激素受體β;雌激素受體α

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1119～1122)

非小細(xì)胞性肺癌是1種常見(jiàn)的腫瘤之一，其發(fā)病率及死亡率均較高，近幾年來(lái)隨著新一代藥物如酪氨酸激酶抑制劑等靶向藥物的出現(xiàn)，使患者生活質(zhì)量得到提高，患者生存進(jìn)一步延長(zhǎng)，但患者5年生存率仍較低，故尋找新的靶點(diǎn)成為治療非小細(xì)胞性肺癌的主要研究目標(biāo)。越來(lái)越多國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)［1］，雌激素受體在非小細(xì)胞性肺癌發(fā)生發(fā)展的過(guò)程中起到重要作用，且可能與表皮生長(zhǎng)因子存在相互串?dāng)_的作用，故雌激素有可能成為非小細(xì)胞性肺癌治療、診斷及預(yù)后的新靶點(diǎn)，本研究擬通過(guò)我院220例非小細(xì)胞性肺癌患者的臨床病理資料，探究雌激素受體(ER)α和β在非小細(xì)

胞性肺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理的相關(guān)性。

1 資料與方法

1．1 臨床資料

選取2010年5月-2013年6月期間經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診的非小細(xì)胞肺癌患者，共220例，其中男性145例，女性75例;年齡35～80歲，平均年齡(52．6± 12．5)歲，按照非小細(xì)胞性肺癌臨床TNM分期標(biāo)準(zhǔn)對(duì)腫瘤進(jìn)行分期:Ⅰ期96例、Ⅱ期24例、Ⅲ期63例、Ⅳ期37例。其中腺癌150例、鱗癌55例、大細(xì)胞肺癌6例、腺鱗癌5例、不典型類癌4例。

1．2 研究方法

1．2．1 試劑與設(shè)備一抗兔抗人雌激素受體β多克隆抗體源于中杉金橋公司;一抗兔抗人雌激素受體α單克隆體抗體源于中國(guó)福州邁新試劑公司;Max Vision試劑盒源于中國(guó)福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。

1．2．2 檢查方法將患者病理組織石蠟切片脫蠟進(jìn)水，浸入乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)的修復(fù)液，于高檔微波12 min使抗原熱修復(fù)。為阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性，于室溫滴加100 μL過(guò)氧化氫，孵育10 min。滴加100 μL一抗，于室溫孵育90 min。滴加100 μL二抗，孵育20 min。滴加新鮮配制的100 μL的DAB溶液，于顯微鏡下觀察顯色［2］。采用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照采用明確表達(dá)人雌激素受體α及β的一例乳腺癌患者標(biāo)本。

1．3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

病理組織切片由兩位病理科醫(yī)師單獨(dú)進(jìn)行閱片;陽(yáng)性信號(hào)為胞核或胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色的顆粒［3］;陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞百分比評(píng)分方法:陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞數(shù)在68%～ 100%為3分、34%～67%為2分、1%～33%為1分;染色強(qiáng)度評(píng)分方法:未著色0分、淺棕黃色1分、中度著色2分、深棕黃色3分;綜合評(píng)分上述兩項(xiàng)得分相加:0分為(-)、1～2分為(+)、3～5分為(++)，6分為(+++);低表達(dá)強(qiáng)度為(-)或(+)，高表達(dá)強(qiáng)度為(++)或(+++)。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 13．0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，性別、吸煙與否、各臨床分期、組織類型、分化程度雌激素受體表達(dá)差異等計(jì)數(shù)資料行卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2．1 雌激素受體α和β的表達(dá)結(jié)果

雌激素受體α和β均表達(dá)于非小細(xì)胞肺癌組織細(xì)胞胞核，雌激素受體α表達(dá)強(qiáng)度弱，9例患者表達(dá)(+)，陽(yáng)性率為4．09%;雌激素受體β受體表達(dá)強(qiáng)度強(qiáng)，表達(dá)陽(yáng)性患者190例，總體陽(yáng)性率為86．36%，見(jiàn)表1、2。

2．2 雌激素受體α(ERα)表達(dá)與其臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系

男性與女性患者ERα表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1．924，P=2．477);吸煙與不吸煙患者ERα表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0．17，P=0．12);各臨床分期患者ERα表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12．121，P＜0．01);不同組織學(xué)類型者ERα表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0．954，P=0．38);不同組織分化程度者ERα表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14．756，P＜0．01)，見(jiàn)表1。

表1 ERα表達(dá)與其臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系/例

2．3 雌激素受體β(ERβ)表達(dá)與患者臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系

男性與女性患者ERβ表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0．103，P=0．75);吸煙與不吸煙患者ERβ表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1．063，P=0．30);各臨床分期患者ERβ表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10．732，P= 0．01);不同組織學(xué)類型患者ERβ表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5．409，P=0．06);不同組織分化程度者ERβ表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3．804，P=0．15)，見(jiàn)表2。

表2 ERβ表達(dá)與患者臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系/例

2．4 雌激素受體β(ERβ)表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤病理類型及分化程度的關(guān)系

與鱗癌及其他組織學(xué)類型比較，腺癌患者ERβ高表達(dá)比率更高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7．749，P= 0．02);與中、低分化程度患者比較，高分化程度患者ERβ高表達(dá)比率更高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 12．738，P＜0．01)，見(jiàn)表3。

表3 ERβ表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤病理類型及分化程度的關(guān)系(例，%)

3 討論

3．1 雌激素受體結(jié)構(gòu)及功能

雌激素受體不僅存在與子宮、乳腺等雌激素的靶組織，在非雌激素靶器官的組織如肺組織中也廣泛存在，雌激素受體有兩個(gè)亞型，即ERα和ERβ，ERα的基因位于染色體的6q24區(qū)段，ERβ的基因位于染色體的14q22～24區(qū)段［4］，2種受體都是依賴性類膽固醇激素核受體家族配體反式轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白，可根據(jù)氨基酸序列分為6個(gè)區(qū)(A～F)，包含3個(gè)主要的功能域:C末端區(qū)、DNA結(jié)合區(qū)及N末端區(qū)，C末端區(qū)是配體結(jié)合域及依賴配體轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能域，N末端區(qū)為不依賴配體轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)功能域，兩者之間為DNA結(jié)合域［5］。位于肺組織的雌激素受體可影響信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控及細(xì)胞生存［6］。

3．2 ERα表達(dá)與患者臨床病理特點(diǎn)、病理分型及分化程度的關(guān)系

本研究發(fā)現(xiàn)ERα于細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率為4．09%，而ERα在細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)陽(yáng)性表達(dá)于國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)均有報(bào)道［7-8］，我們推測(cè)表達(dá)的差異可能與各實(shí)驗(yàn)室技術(shù)條件不同及使用的抗體不同有關(guān)［9］;本研究發(fā)現(xiàn)ERα陽(yáng)性表達(dá)與患者臨床疾病分期、病理分化程度有關(guān):Ⅰ期患者陽(yáng)性表達(dá)率高于分期晚的患者，高分化的患者陽(yáng)性表達(dá)率高于中低分化患者，我們推測(cè)這可能與ERα隨著非小細(xì)胞性肺癌發(fā)生發(fā)展而發(fā)生變化有關(guān)［10］:在非小細(xì)胞性肺癌由高分化向低分化或早期向中晚期發(fā)展過(guò)程中，基因結(jié)構(gòu)發(fā)生缺失變異使完整結(jié)構(gòu)的雌激素受體α演變成非完整結(jié)構(gòu)剪切的變異體，我們研究所采用的抗體為識(shí)別ERα的C末端區(qū)，低分化及相對(duì)分期較晚患者的ERα的C末端區(qū)發(fā)生缺失變異，故檢測(cè)不到ERα的表達(dá)，故下次研究可以選擇識(shí)別ERα不同位點(diǎn)抗體進(jìn)行免疫組化，證實(shí)我們的推測(cè)。

3．3 ERβ表達(dá)與患者臨床病理特點(diǎn)、病理分型及分化程度的關(guān)系

本研究發(fā)現(xiàn)ERβ于細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率為86．36%，其表達(dá)與患者性別、吸煙狀況無(wú)相關(guān)性，與病理特點(diǎn)有相關(guān)性:腺癌及高分化的非小細(xì)胞性肺癌患者ERβ具有高表達(dá)率更高。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)ERβ與ERα在疾病分期陽(yáng)性表達(dá)率相反，Ⅰ期患者的ERβ陽(yáng)性表達(dá)率低，疾病分期較晚陽(yáng)性表達(dá)率更高，筆者推測(cè)這與雌激素在非小細(xì)胞性肺癌轉(zhuǎn)移擴(kuò)散起作用有關(guān):通過(guò)刺激尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator，UPA)產(chǎn)生，促進(jìn)纖維蛋白溶酶的形成，降解細(xì)胞外的基質(zhì)，從而使癌細(xì)胞向周圍組織的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移［11］。

總體來(lái)說(shuō)，ERα和ERβ在非小細(xì)胞肺癌患者的表達(dá)情況與患者的病理及臨床特點(diǎn)具有相關(guān)性，提示雌激素受體表達(dá)可能在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程中起到重要作用，有可能成為治療非小細(xì)胞性細(xì)胞癌新靶點(diǎn)，為探索新治療提供進(jìn)一步線索及依據(jù)。

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Correlation between ERα and ERβ Expression and Clinicopathological Characteristics in Non-small Cell Lung Cancer

XU Xiaohong，CHEN Jiabin，XIA Yinwen．The People＇s Hospital of Hanchuan，Hanchuan，431600

ObjectiveTo explore the correlation between estrogen receptor α(ERα)and estrogen receptor β(ER β)expression and clinicopathological characteristics in non-small cell lung cancer．Methods220 cases who were confirmed by histopathology to be non-small cell lung cancer were selected as study objects．The expressions of ER α and ER β were detected by immunohistochemistry．ResultsBoth ER α and ER β were expressed in nucleus．The positive expression rate of ER α and ER β were 4．09%and 86．36%，respectively．There was correlation between ER α expression and tumor stage，pathology differential degree．ER α expression in stageⅠ(9．38%)was higher than that in later stage(0．00%)(χ2=12．121，P＜0．01)，and ER α expression in in patients with high pathological degree(14．29%)was higher than that in middle and low pathological degree (3．00%，0．00%)(χ2=14．756，P＜0．01)．Positive expression of ERβ was associated with tumor stage，histology type and pathology differential degree．Positive expression of ER β was lowest in stageⅠpatients(78．12%，χ2=10．732，P=0．01)，ER β expression was much stronger in adenocarcinoma(70．7%，χ2=7．749，P=0．02)and high pathological degree patients(83．3%，χ2=12．738，P＜0．01)．ConclusionER α and ER β expression are correlated with clinicopathological characteristics in nonsmall cell lung cancer．It indicates that expressions of ER α and ER β may play an important role in the occurrence and development of non-small cell lung cancer．

Non-small cell lung cancer;Estrogen receptor β(ER β);Estrogen receptor α(ER α)

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．004

R734．2

A

1001-5930(2015)08-1119-04

2014-10-27

2015-03-16)

(編輯:吳小紅)

431600漢川市人民醫(yī)院，武漢大學(xué)人民醫(yī)院漢川醫(yī)院