王 荻 韓 冰 李紹戊 盧彤巖

(中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所, 哈爾濱 150070)

研究簡報

伊維菌素對細鱗鮭的毒性效應(yīng)評價

王 荻 韓 冰 李紹戊 盧彤巖

(中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所, 哈爾濱 150070)

伊維菌素(Ivermectin, IVM)是美國Merck公司于1976年研發(fā)的[1], 由阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)發(fā)酵產(chǎn)生的半合成大環(huán)內(nèi)酯類多組分抗生素, 為阿維菌素衍生物, 屬口服半合成的廣譜抗寄生蟲藥。IVM可通過增加細胞膜和其他配體閥門氯離子通透性, 引起神經(jīng)細胞或肌肉細胞超極化, 導(dǎo)致寄生蟲麻痹或死亡, 對各種體外寄生蟲特別是線蟲和節(jié)肢動物具有良好的驅(qū)殺作用[2], 且因難于穿透血腦屏障而對脊椎動物安全性較好, 在農(nóng)、牧產(chǎn)品培植養(yǎng)育過程中被廣泛應(yīng)用。自1990年首次用于大西洋鮭海虱病防治取得良好效果后[3], IVM也開始用于水產(chǎn)動物寄生蟲病的防治, 并取得良好效果。但也有報道指出, IVM安全范圍較窄, 過量用藥有中毒危險[4]。

細鱗鮭(Brachymystax lenok)系鮭形目(Salmoniformes)、鮭科(Salmoninae)、細鱗鮭屬(Brachymystax), 是冰川時期經(jīng)日本海來自北方的殘留魚類, 為我國名貴的土著陸封型鮭科冷水魚品種。由于對生境要求嚴苛, 且遭到過量捕撈等方面的影響, 細鱗鮭已于 1988年底被列為我國二級保護動物, 屬于易危等級[5]。目前, 已有關(guān)于細鱗鮭全人工繁育技術(shù)[6]、雜交育種[7], 生物學(xué)特性[8, 9]及飼料營養(yǎng)[10]等方面的研究報道, 但藥物對細鱗鮭毒性影響方面的研究仍屬空白。

本研究擬通過不同劑量口灌給藥情況下, IVM 對細鱗鮭急性毒性、血液生理生化指標(biāo)及主要組織損傷情況的影響進行測定觀察, 用以評價IVM對細鱗鮭的毒性效應(yīng), 為IVM在細鱗鮭養(yǎng)殖中科學(xué)使用提供理論基礎(chǔ)及科學(xué)數(shù)據(jù), 并對可能經(jīng)由農(nóng)用或畜禽用藥物進入細鱗鮭養(yǎng)殖水環(huán)境對養(yǎng)殖魚類造成的影響進行初步的探索性安全性評價。

1 材料與方法

1.1 實驗魚

實驗用細鱗鮭購自中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所渤海冷水性魚類養(yǎng)殖試驗站, 平均體質(zhì)量為(77.33±2.55) g。實驗魚飼養(yǎng)于自動循環(huán)水魚缸中, 水溫16℃左右, 暫養(yǎng) 7d后, 隨機選取規(guī)格較均一, 健康非免疫狀態(tài)下細鱗鮭進行實驗。

1.2 實驗材料

伊維菌素原粉: 含量99.2%, 購自鄭州天耀科技有限公司, CAS: 70288-86-7。實驗用氰化高鐵血紅蛋白檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所; 紅細胞及白細胞稀釋液自行配制; 實驗所用化學(xué)試劑為分析純, 由國藥集團化學(xué)試劑有限公司提供。

1.3 LD50的測定

按預(yù)實驗摸索劑量, 實驗共設(shè)8個實驗組, 給藥劑量分別為0、1.69、2.19、2.86、3.71、4.83、6.27和8.16 mg/kg (其中 0給藥劑量組為溶劑對照組, 為 50%乙醇溶液), 每組10尾魚。

連續(xù)觀察并詳細記錄實驗魚口灌給藥后 96h內(nèi)的行為狀態(tài)及死亡情況, 計算各實驗組實驗魚死亡率, 并采用加權(quán)回歸法計算該實驗條件下IVM對細鱗鮭的LD50。

1.4 血細胞計數(shù)及血紅蛋白含量測定

自實驗魚尾靜脈取血, 并制備抗凝血(0.4 mL全血加入0.1 mL質(zhì)量濃度為3‰的肝素鈉), 用于進行血細胞計數(shù)及觀察。

血紅蛋白測定: 按照試劑盒說明書方法對血紅蛋白進行測定, 血紅蛋白克數(shù)(升)=測得540 nm波長下的吸光度值×367.7。

紅細胞比容: 取抗凝血加入預(yù)先用抗凝劑潤洗并干燥后的微量毛細管中, 至毛細管的2/3處(約50 mm), 石蠟封堵未吸血端, 水平式毛細管離心機12000 r/min離心5min。測量紅細胞柱及全血柱高度, 紅細胞比容=紅細胞柱高度/全血柱高度×100%。

紅細胞計數(shù): 取抗凝血0.02 mL與3.98 mL紅細胞稀釋液混勻, 制備200倍稀釋的紅細胞懸液。取一滴紅細胞懸液加入細胞計數(shù)板, 對紅細胞進行顯微鏡下計數(shù), 重復(fù)計數(shù)3次, 取其均值R。每立方毫米紅細胞數(shù)=(R×200)/ (0.004×5)=R×10000。

白細胞計數(shù): 取抗凝血0.02 mL與0.38 mL白細胞稀釋液混勻, 制備 20倍稀釋的白細胞懸液, 低倍鏡下對白細胞進行計數(shù), 重復(fù)計數(shù)3次, 取其均值W。則每立方毫米白細胞數(shù)=(W×20)/(0.1×4)=W×50。

1.5 血漿生理生化分析

用 3‰肝素鈉潤洗過的注射器自實驗魚尾靜脈取血, 4 ℃ 4000 r/min 離心10min, 取上層血漿儲存待測。采用Beckman公司生產(chǎn)的CYNCHRON CH4PRO全自動生化分析儀對實驗魚血漿生理生化指標(biāo)進行檢測分析。檢測指標(biāo)包括: 總蛋白、白蛋白、鈣離子及總膽紅素。

1.6 組織切片制作

取每組3尾實驗魚(如實驗組存活魚數(shù)小于3尾, 則取實驗中剛剛死亡魚體組織)肝、腎、腸及心相同部位組織, 于Bouin’s液中固定24h, 樣品經(jīng)脫水、透明、石蠟包埋、連續(xù)切片制成5 μm厚的切片, HE染色后, 顯微鏡觀察拍照。

2 結(jié)果

2.1 實驗魚毒性效應(yīng)及行為變化

實驗發(fā)現(xiàn), 對照組實驗魚行為及剖檢均無異常, 亦未見死亡。實驗組隨著給藥劑量的增加, 實驗魚出現(xiàn)行為異常及中毒癥狀的時間越來越早, 且毒性癥狀越來越明顯。

隨著給藥劑量增加, 實驗魚逐步表現(xiàn)為體色變暗至發(fā)黑。1及1.3劑量組實驗魚給藥初期有神經(jīng)中毒癥狀, 身體側(cè)彎, 眼球突出, 身體痙攣, 有失去平衡的趨勢, 鰓蓋張合加速, 游動緩慢, 部分魚浮于水面, 48h后癥狀有所減輕, 解剖無異常; 1.69至2.86 劑量組, 實驗魚體色發(fā)黑,側(cè)臥缸底, 觸動后緩慢游動, 鰓蓋張合加速。24—48h期間開始出現(xiàn)死亡, 解剖后可見腸道充血, 肝臟顏色異常; 3.71劑量組, 17h開始出現(xiàn)死亡, 體表充血, 背鰭尤為嚴重, 肌肉松散有糜爛現(xiàn)象, 腸充血; 4.83及6.27劑量組實驗魚體色烏黑, 死亡魚肝、腸嚴重充血, 肌肉糜爛嚴重, 6.27 劑量組24h內(nèi)實驗魚全部死亡。

2.2 IVM對細鱗鮭的急性毒性

隨著給藥劑量增高, 各實驗組 96h累計死亡率分別為0、0、0、10%、30%、50%、80%、100%和100%, 1.69劑量組開始出現(xiàn)死亡, 4.83及 6.27劑量組實驗魚全部死亡。經(jīng)計算, 實驗條件下 IVM對細鱗鮭 96h的 LD50為2.66 mg/kg, 線性回歸方程為y= –2.94607+6.93151x, 95%置信區(qū)間為2.17—3.32 mg/kg。

2.3 血細胞及血紅蛋白變化

將各實驗組細鱗鮭血紅蛋白含量, 紅細胞比容及紅、白細胞數(shù)分別整理如下圖所示。

由圖1可見, 與對照組相比, 各實驗組血紅蛋白濃度,紅細胞比容, 紅、白細胞數(shù)均有所變化, 但變化幅度不大。血紅蛋白濃度最大和最小值分別出現(xiàn)在 1.3和 4.83劑量組, 分別為(83.59±2.92)和(77.7±3.78) g/L。紅細胞比容表現(xiàn)出和紅細胞數(shù)一致的變化趨勢, 1.3和2.197劑量組均較前一劑量組有所上升, 后三個高劑量組表現(xiàn)為較平緩的變化趨勢, 均略低于對照組。實驗魚白細胞數(shù)除 1.3劑量組外, 均低于對照組, 1、4.83及6.27劑量組最低。

2.4 血漿生理生化變化

將測得的實驗魚血漿中各項生理生化指標(biāo)繪制如下圖。

由圖2可見, 隨著給藥濃度增加, 與對照組相比, 實驗魚血漿中總蛋白含量和鈣濃度呈相同變化趨勢, 分別在1.3和2.197劑量組形成峰值, 且三個最高給藥濃度組中的含量均低于對照組; 而血漿中白蛋白濃度隨著給藥濃度增加, 呈先升高后降低趨勢, 在1.3劑量組形成峰值后, 其他各高劑量組均低于對照組; 血漿中總膽紅素含量隨著給藥劑量增加大體呈現(xiàn)先升高后降低趨勢, 在2.197劑量組形成峰值, 隨后略有下降, 但各給藥組均高于對照組相應(yīng)數(shù)值。

2.5 組織切片觀察結(jié)果

采集對照組及給藥組實驗魚肝、腎、心、腸組織進行切片, 觀察結(jié)果如下, 箭頭所指為主要組織變化位置:

肝: 由圖 3可見, 對照組, 肝細胞分布較均勻, 呈多角狀; 而 1.69劑量組肝細胞略有腫脹, 有血細胞浸潤現(xiàn)象, 且有少數(shù)肝細胞出現(xiàn)空泡樣變形, 細胞壞死溶解; 至6.3劑量組, 部分肝細胞變性、壞死直至萎縮、溶解。

腎由圖4可見, 對照組腎小管組織完整, 管壁細胞排列整齊, 無異常; 而6.3劑量組腎間質(zhì)炎癥細胞大量浸潤,且腎小球內(nèi)有大量血細胞出現(xiàn)。

心: 由圖 5可見, 對照組心肌纖維飽滿, 排列有序;而 1.69劑量組心肌纖維間有炎癥細胞浸潤現(xiàn)象出現(xiàn); 至6.3劑量組部分心肌纖維嚴重萎縮、變性。

腸: 由圖6可見, 對照組腸壁形態(tài)完整, 腸絨毛整齊無損傷; 而 3.17劑量組腸壁及絨毛組織中有大量血細胞浸潤; 至6.3劑量組腸絨毛上皮細胞變性、壞死情況嚴重,甚至有腸絨毛溶解、消失現(xiàn)象出現(xiàn)。

圖1 血紅蛋白濃度、紅細胞比容及紅、白細胞數(shù)變化Fig. 1 Changes of hemoglobin concentration, cell specific volume, red and white blood cell count

圖2 總蛋白、白蛋白、鈣及總膽紅素濃度變化Fig. 2 Changes of total protein, albumin, calcium and total bilirubin concentration

圖3 肝組織變化Fig. 3 Changes in the liver tissues

圖4 腎組織變化Fig. 4 Changes in kidney tissues

圖5 心組織變化Fig. 5 Changes in heart tissues

3 討論

作為一種新型高效、廣譜抗生素類抗寄生蟲藥物, IVM 在農(nóng)、牧、畜禽及水產(chǎn)動物抗寄生蟲病方面有著廣泛的應(yīng)用。但有報道指出IVM可對水產(chǎn)動物血液指標(biāo)造成影響[11], 特別是冷水性魚類使用IVM后甚至有中毒反應(yīng)出現(xiàn)[12, 13]。因此, 本實驗選取我國土著名優(yōu)冷水性魚類細鱗鮭為實驗對象, 對其使用 IVM過程中可能造成的毒理效應(yīng)進行了研究。

3.1 IVM對細鱗鮭的急性毒性效應(yīng)

本研究結(jié)果表明, 高劑量 IVM口灌給藥后的細鱗鮭表現(xiàn)為體色發(fā)黑、行動遲緩、游動失衡、鰓部呼吸異常等現(xiàn)象與 Palmer等[12]報道低水溫下虹鱒(Oncorhynchus mykiss) IVM中毒現(xiàn)象及Toovey 和Lyndon[13]報道的IVM對大西洋鮭(Salmo salar)鰓呼吸率的影響結(jié)果極為相似,推測IVM對冷水性魚類可能具有相似的神經(jīng)毒性作用。

圖6 腸組織變化Fig. 6 Changes in intestinal tissues

最初 IVM 用于大西洋鮭海虱防治的治療劑量為0.05 mg/kg[14], 而本研究結(jié)果表明 IVM 對細鱗鮭的安全劑量[15]=0.1×LD50=0.266 mg/kg, 遠高于其最初使用劑量。后期研究報道指出, 口灌IVM對11℃和20℃下體質(zhì)量為3 g以及11℃時35 g的歐洲狼鱸(Dicentrarchus labrax)的96h LD50分別為0.335、0.839和0.523 mg/kg[16]; 而對11℃時50 g的大西洋鮭的口灌和浸泡96h LD50和LC50分別為0.5 mg/kg和17 μg/L, 而14℃時50 g褐鱒(Salmo trutta)肌肉注射的96h LD50為0.3 mg/kg[17]。而在16℃水溫下口灌 IVM 對體質(zhì)量為 80 g左右的細鱗鮭 96h LD50為2.66 mg/kg, 高于低水溫下大西洋鮭的相應(yīng)值, 但低于松浦鏡鯉(Cyprinus specularis songpu)的4.04 mg/kg[18], 根據(jù)聯(lián)合國世界衛(wèi)生組織(WHO)公布的外來化合物急性毒性分級標(biāo)準, IVM對細鱗鮭屬高毒化合物。由此可見, 隨著水溫升高和魚發(fā)育程度的增加, IVM 對魚類的毒性有減小的趨勢; 但物種間存在著較大差異, 推測可能是由于生理機能、特點及進化程度不同, 從而導(dǎo)致對同一毒物的敏感性存在差異而造成的[19]。

3.2 IVM對細鱗鮭血細胞及血漿生理生化指標(biāo)的影響

血液是魚體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的重要組成部分, 與機體代謝、營養(yǎng)及疾病狀況密切相關(guān)。當(dāng)魚體受外界影響而發(fā)生生理或病理變化時, 必定會通過血液指標(biāo)反映出來[20]。因而, 魚類血液指標(biāo)被廣泛用于評價魚類的健康、營養(yǎng)以及對環(huán)境的適應(yīng)情況, 是重要的生理、病理和毒理學(xué)觀測指標(biāo)[21]。

本研究結(jié)果表明, 不同給藥劑量組細鱗鮭血液中紅細胞和白細胞數(shù)無明顯變化趨勢, 未形成顯著性差異。這樣的結(jié)果與彭章曉等[11]和 Katharios等[22]對鯽(Carassius carassius)和海鯛(Sparus aurata)進行 IVM 口灌和腹腔注射給藥后報道的結(jié)果一致。而血紅蛋白含量及紅細胞比容變化趨勢與紅細胞數(shù)基本一致, 紅細胞比容雖有一定變化, 但未形成顯著差異。

血漿中生理生化測得結(jié)果表明, 血漿中總蛋白及鈣的含量變化可能是由于藥物刺激機體產(chǎn)生了相應(yīng)的應(yīng)激反應(yīng), 促進了血漿中蛋白合成及鈣的吸收, 而達到高劑量組后, 毒性效應(yīng)嚴重損害了機體機能, 導(dǎo)致其含量逐漸降低。血鈣在魚類生長、發(fā)育及代謝中起著重要的作用[23], 且一般變化幅度較小, 保持著生理生化的穩(wěn)定水平。而血漿中總蛋白及白蛋白的濃度可反映機體的營養(yǎng)和代謝狀態(tài),實驗結(jié)果表明機體對藥物產(chǎn)生應(yīng)答后, 逐步損傷, 進而導(dǎo)致白蛋白濃度下降, 可能會引起營養(yǎng)和代謝障礙。而有報道指出, 血漿中總膽紅素濃度與動物冠狀動脈粥樣硬化有一定關(guān)系[24], 實驗中血漿中總膽紅素含量隨給藥劑量增加逐漸升高, 可能與循環(huán)系統(tǒng)受損有一定聯(lián)系。綜上,高劑量IVM給藥可能對細鱗鮭生長發(fā)育、營養(yǎng)代謝及循環(huán)系統(tǒng)均造成了一定損傷。

3.3 IVM對細鱗鮭組織損傷觀察

經(jīng)組織切片觀察發(fā)現(xiàn), 1.69劑量組細鱗鮭肝組織開始出現(xiàn)細胞腫脹、血細胞浸潤現(xiàn)象, 而心肌纖維也出現(xiàn)了炎癥細胞浸潤現(xiàn)象; 3.17劑量組腸組織有充血現(xiàn)象發(fā)生。至6.3劑量組肝細胞大量變性、壞死; 腎間質(zhì)大量炎癥細胞浸潤, 腎小球充血; 心肌嚴重萎縮、變性; 腸絨毛溶解、消失。

這樣的結(jié)果表明, 藥物對細鱗鮭的泄殖系統(tǒng)(腎), 循環(huán)系統(tǒng)(心), 營養(yǎng)系統(tǒng)(肝、腸)均有一定影響, 與血漿生理生化測定結(jié)果相一致。在較低劑量組細鱗鮭肝及心組織已開始出現(xiàn)損傷, 隨著給藥劑量增加, 對各組織損傷越發(fā)嚴重, 這樣的結(jié)果可能與 IVM易在血液較充沛的組織蓄積有關(guān)。中給藥劑量時, 腸組織出現(xiàn)損傷, 將會影響機體營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收, 導(dǎo)致機體營養(yǎng)、免疫及抗病力等多項指標(biāo)受影響。至高劑量組, 多個組織受損嚴重, 已妨礙正常生理機能的進行, 可能是導(dǎo)致魚死亡的主要原因。

3.4 外源IVM對細鱗鮭養(yǎng)殖的安全性評價

作為一種農(nóng)、牧、畜禽及水產(chǎn)動物通用的抗寄生蟲類藥物, 除了通過常規(guī)病害防治途徑進入養(yǎng)殖水環(huán)境及魚體外, IVM還可通過農(nóng)作物用藥殘留、畜禽排泄物、水源藥物污染等多種途徑進入水產(chǎn)動物的養(yǎng)殖水體, 從而影響到水生生物的生長或生存[24]。有報道指出斑馬魚(Brachydanio rerio)、食蚊魚(Gambusia affinis)和鯽魚苗暴露于 IVM 水體中的 96h LC50分別為 40.48、34.81和13.79 μg/L[25]; 而虹鱒, 雜色 鳉(Cyprinodon variegatus)和斑點叉尾(Ietalurus Punetaus)的96h LC50分別為3.2、15和24 μg/L[17]。由此可見, 冷水性魚類對IVM的耐受性較差, 易產(chǎn)生毒性效應(yīng), 這樣的結(jié)果與Palmer等[13]報道的低水溫下IVM的毒性反應(yīng)與治療有一定聯(lián)系相一致。

IVM是一類難降解、極難溶于水的藥物, 常溫下溶解度僅為4 mg/kg[26], 25℃時, 70d僅降解了28.3%[25]; 因而,天然水體中如長期含有殘留的 IVM, 經(jīng)底泥及水體不斷蓄積, 仍會對細鱗鮭健康養(yǎng)殖仍有較大影響。故而, 在注意嚴格控制藥物用量的同時, 應(yīng)對含有 IVM的廢棄物排放進行嚴格的監(jiān)控, 并定期對養(yǎng)殖水體進行藥物殘留監(jiān)測, 以保障細鱗鮭綠色養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。

綜上所述, 高濃度IVM雖對細鱗鮭具有較強毒性效應(yīng),但其安全劑量0.266 mg/kg與正常治療劑量0.3 mg/kg[29]極其相近, 因而, 在嚴格按照指導(dǎo)科學(xué)用藥, 注意養(yǎng)殖水體藥物殘留控制的情況下, IVM 仍可作為有效藥物用于細鱗鮭養(yǎng)殖中的寄生蟲病防治。

[1] Zhu X J, Li Y Q, Hou B, et al. Preparation and quality evaluation of ivermectin liposome [J]. Journal of Northwest A&F University (Nature Science Edition), 2010, 38(4): 24—30 [朱曉娟, 李引乾, 侯勃, 等. 伊維菌素脂質(zhì)體的制備及其質(zhì)量評價. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2010, 38(4): 24—30]

[2] Chen Z L. Veterinary pharmacology [M]. Beijing: China Agriculture Press. 2002, 268 [陳杖榴. 獸醫(yī)藥理學(xué). 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社. 2002, 268]

[3] Hoy T, Horsberg T E, Nafstad I. The disposition of ivermectin in Atlantic salmon (Salmo salar) [J]. Pharmacology & Toxicology, 1990, 67(4): 307—312

[4] Fu H L, Wu L. Studies on preparation and quality control of ivermectin liposomes [J]. Progress in Veterinary Medicine, 2005, 25(6): 102—104 [符華林, 吳蕾. 伊維菌素脂質(zhì)體的制備及質(zhì)量控制研究. 動物醫(yī)學(xué)進展, 2005, 25(6): 102—104]

[5] Wang S. China endangered animal Redbook – Fish [M]. Beijing: Science Press. 1998, 35—38 [汪松. 中國瀕危動物紅皮書-魚類. 北京: 科學(xué)出版社. 1998, 35—38]

[6] Mou Z B, Li Y F, Xu G F, et al. A technique of artificial reproduction and culture in Manchurian trout Brachymystax lenok [J]. Chinese Journal of Fisheries, 2013, 26(1): 15—18[牟振波, 李永發(fā), 徐革鋒, 等. 細鱗魚全人工繁育技術(shù)的研究. 水產(chǎn)學(xué)雜志, 2013, 26(1): 15—18]

[7] Xu G F, Yin J S, Liu Y, et al. Intergeneric hybridizations between Hucho taimen and Brachymystax lenok [J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2009, 16(6): 959—966 [徐革鋒, 尹家勝, 劉洋, 等. 哲羅鮭與細鱗鮭屬間遠緣雜交的初步研究. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2009, 16(6): 959—966]

[8] Wang D, Xu G F, Liu Y, et al. Assessing genetic diversity of the Brachymystax lenok and Brachymystax tumernsis populations in Ussuri River [J]. Journal of Shanghai Ocean University, 2010, 19(1): 19—23 [王荻, 徐革鋒, 劉洋, 等. 烏蘇里江流域尖吻細鱗鮭及鈍吻細鱗鮭群體遺傳多樣性分析. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報, 2010, 19(1): 19—23]

[9] Zhang Y P, Wang T, Du Y Y, et al. Analysis of the genetic diversity of cultured and wild Brachymystax lenok tsinlingensis populations based on mtDNA D-loop and cyt B [J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2014, 38(5): 828—833 [張艷萍,王太, 杜巖巖, 等. 秦嶺細鱗鮭人工繁育群體與野生群體遺傳變異分析. 水生生物學(xué)報, 2014, 38(5): 828—833]

[10] Liu Y, Xu G F, Mou Z B, et al. Evaluation of nutritiver quality and nutritional components of muscle of Brachymystax lenok [J]. Acta Nutrimenta Sinica, 2010, 32(1): 99—100 [劉洋, 徐革鋒, 牟振波, 等. 黑龍江水系細鱗魚肌肉營養(yǎng)成分分析與品質(zhì)評價. 營養(yǎng)學(xué)報, 2010, 32(1): 99—100]

[11] Peng Z X, Jiang M, Wu H, et al. Preliminary study on the influence of ivermectin on blood component of Carassius auratus [J]. Freshwater Fisheries, 2012, 42(1): 93—96 [彭章曉, 江敏, 吳昊, 等. 伊維菌素對鯽血液成分影響的初步研究. 淡水漁業(yè), 2012, 42(1): 93—96]

[12] Palmer R, Coyne R, Daney S, et al. Case notes on adverse reactions associated with ivermectin therapy of Atlantic salmon [J]. Bulletin of the European Association of Fish Pathologists, 1996, 17(2): 62—67

[13] Toovey J P G, Lyndon A R, Duffus J H. Ivermectin inhibits respiration in isolated rainbow tout (Oncorhynchus mykiss Walbaum) gill tissue [J]. Bulletin of the European Association of Fish Pathologists, 1999, 19(4), 149—152

[14] Johnson S C, Kent M L, Whitaker D J, et al. Toxicity and pathological effects of orally administered ivermectin in Atlantic, Chinook, and coho salmon and steelhead trout [J]. Diseases of Aquatic Organisms, 1993, 17: 107—112.

[15] Zhao L, Cao H P, Chen H, et al. Acute toxicity of enrofloxacin to Carassius auratus gibelio and its effects on blood biochemical indexes [J]. Chinese Journal of Zoology, 2013, 48(3): 446—450 [趙蕾, 曹海鵬, 陳輝, 等. 恩諾沙星對銀鯽急性毒性及血液生化指標(biāo)的影響. 動物學(xué)雜志, 2013, 48(3): 446—450]

[16] Athanassopoulou F, Ragias V, Roth M, et al. Toxicity and pathological effects of orally and intraperitoneally administered ivermectin on sea bass Dicentrarchus labrax [J]. Diseases of Aquatic Organisms, 2002, 52(1): 69—76

[17] Kilmartin J, Cazabon D, Smith P. Investigations of the toxicity of ivermectin for salmonids [J]. Bulletin of the European Association of Fish Pathologists (United Kingdom), 1996, 17(2): 58—62

[18] Han B, Wang D, Lbu T Y. Acute toxicity and tissue injury studies of ivermectin for Songpu mirror carp (Cyprinus specularis songpu) [J]. Journal of Fishery Sciences of China,2015, 22(4): 687—697. [韓冰, 王荻, 盧彤巖. 伊維菌素對松浦鏡鯉的急性毒性與組織損傷. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2015, 22(4): 687—697]

[19] Wang X Z, Lu H D. Acute toxic effect of abamectin on fresh-water aquatic animals [J]. Journal of Environment and Health, 2009, 26(7): 593—597. [王錫珍, 陸宏達. 阿維菌素對幾種淡水水生動物的急性毒性作用. 環(huán)境與健康雜志, 2009, 26(7): 593—597]

[20] Zhang G S. Effect of dehp on non-specific immune function and genetic toxicity of Cyprinus carpio Linnaeus [J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2014, 38(4): 729—736 [張貴生. 鄰苯二甲酸二乙基己酯對鯉非特異性免疫的影響及遺傳毒性. 水生生物學(xué)報, 2014, 38(4): 729—736]

[21] Yan Q G, Zhu X M, Yang Y X, et al. Effect of replacement of fish meal with cottonseed meal on growth, hematological physiology, and body composition of grass carp [J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2014, 38(2): 362—369 [嚴全根, 朱曉鳴, 楊云霞, 等. 飼料中棉粕替代魚粉蛋白對草魚的生長、血液生理指標(biāo)和魚體組成的影響. 水生生物學(xué)報, 2014, 38(2): 362—369]

[22] Katharios P, Iliopoulou-Georgudaki J, Kapata-Zoumbos K, et al. Toxicity of intraperitoneally injected ivermectin in sea bream, Sparus aurata [J]. Fish Physiology and Biochemistry, 2001, 25(2): 99—108

[23] Feng J, Liu Y J, Tian L X, et al. The effect of experimental cadmium poisoning on hepatopancreas, kidney, skeleton in Ctenopharyngodon idella [J]. Journal of Fisheries of China, 2004, 28(2): 195—200 [馮健, 劉永堅, 田麗霞, 等. 草魚實驗性鎘中毒對肝胰臟、腎臟和骨骼的影響. 水產(chǎn)學(xué)報, 2004, 28(2): 195—200]

[24] Schwertner H A, Jeckson W G, Tolan G. Association of low serum concentration of bilirubin with increased risk of coronary heart disease [J]. Clinical Chemistry, 1997, 43(1): 18—23

[25] Wu H, Jiang M, Peng Z X. Research on the degradation of ivermectin and its acute toxicity to seven aquatic organisms [J]. Acta Hydrobiologica Sinaca, 2012, 36(5): 965—970 [吳昊, 江敏, 彭章曉, 等. 伊維菌素在環(huán)境中的降解及其對七種水生生物的急性毒性研究. 水生生物學(xué)報, 2012, 36(5): 965—970]

[26] USFDA. Environmental assessment of ivermectin. NADA, 1996, 140—988 (http://www.fda.gov/cvm/FOI/140-998EA. pdf)

[27] Li J H, Yang X L, Lu C P, et al. Newly Compiled Fishery Drugs Manuals [M]. Beijing: China Agriculture Press. 2005, 252 [李健華, 楊先樂, 陸承平, 等. 新編漁藥手冊. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社. 2005, 252]

TOXICITY EVALUATION OF IVERMECTIN TO BRACHYMYSTAX LENOK

WANG Di, HAN Bing, LI Shao-Wu and LU Tong-Yan
(Heilongjiang River Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China)

伊維菌素; 細鱗鮭; 急性毒性; 生理指標(biāo); 組織損傷

Ivermectin; Brachymystax lenok; Acute toxicity; Physiological index; Tissue damage

S948

A

1000-3207(2015)06-1248-07

10.7541/2015.163

2015-01-20;

2015-04-25

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項經(jīng)費 (201203085)資助

王荻(1980—), 女, 遼寧省阜新人; 碩士; 主要研究方向為魚類病害及免疫學(xué)。Email: wangdi_2014@163.com

盧彤巖(1967—), 女, 吉林省長春人; 博士; 主要研究方向為魚類病害研究。E-mail: lutongyan@hotmail.com