楊 晨，楊志潔，邱余新，蔡寶昌，李偉東（.溧陽市中醫(yī)院藥劑科，江蘇 溧陽 3300；.南京中醫(yī)藥大學藥學院，南京 003）

胃幽康胃漂浮片的處方來源于名老中醫(yī)經(jīng)驗方，由黨參、黃連、黃芩、延胡索、甘草、黃芪和丹參等中藥組成，具有健脾益氣、清熱解毒、活血化瘀的功效，主治胃痛痞滿等證，以及慢性胃炎見上述癥狀者。本處方作為醫(yī)院制劑協(xié)定處方，以湯劑和顆粒劑兩種劑型在臨床使用十多年，總有效率在90%以上。但湯劑臨時煎煮不便，而顆粒劑也存在日服次數(shù)多（4次）和單次服用劑量大（10 g）等缺點，且湯劑和顆粒劑這兩種普通劑型在胃部停留時間短，不利于本處方在胃部發(fā)揮其殺滅胃幽門螺旋桿菌（HP）、抗?jié)儭⒈Ｗo胃黏膜和抑制胃酸分泌等藥理活性。由于本品所治疾病為慢性疾病，需要長期服藥，為了降低給藥次數(shù)、提高患者服藥順應性、延長藥物在胃部停留時間從而提高臨床療效，筆者擬將該處方研制成胃幽康胃漂浮片，并對其體外藥物緩釋特性和體外漂浮性能進行評價。

1 材料

1.1 儀器

RC610 型智能藥物溶出儀（天津醫(yī)療器械研究所）；MJ-500 型電子天平（精度：1 mg，日本Chyo 公司）；Libror AEL型電子天平（精度：0.01 mg，瑞典Shimadzu公司）；DP-30d型單沖壓片機（北京國藥龍立科技有限公司）；PYS-20 型片劑硬度計（上海黃海藥檢儀器有限公司）；Waters 515型高效液相色譜（HPLC）儀（美國Waters公司）。

1.2 藥材與試劑

羥丙基甲基纖維素K15M（HPMC-K15M，批號：RC02012-N07）、HPMC-K4M（批號：RG13011N08）購自上海卡樂康包衣技術有限公司；十八醇、聚乙烯基吡咯烷酮K30（PVP-K30）、碳酸氫鈉（國藥集團化學試劑有限公司）；硬脂酸鎂、微粉硅膠（上海化學試劑公司）。所有藥材均購自安徽省亳州市藥材總公司中藥分公司，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學中藥鑒定教研室吳德康教授鑒定均符合2010年版《中國藥典》（一部）標準。

2 方法與結果

2.1 復方提取精制物的制備

取黃連和延胡索加70%乙醇回流提取2次，第1次10倍量2 h，第2次8倍量1 h。合并2次醇提液，減壓回收乙醇，濃縮至0.5 g（生藥）/ml。另取黨參、黃芩和甘草等10 味藥材，加水煎煮2 次，第1 次加水11 倍量1.5 h，第2 次加水9 倍量1 h。合并水提液，減壓濃縮至0.5 g（生藥）/ml。將乙醇提取濃縮液和水提濃縮液分別采用AB-8大孔樹脂吸附法精制，70%乙醇洗脫有效成分，收集洗脫液，減壓回收乙醇，真空干燥，即得胃幽康提取精制物。

2.2 制劑處方設計

本品原劑型為顆粒劑，單日處方劑量為（按藥材計）92 g，是由處方中藥材經(jīng)水提、減壓濃縮和噴霧干燥得到的浸膏加適量輔料制備。由于未采用分離純化工藝，劑量較大，每日需口服4 次，每次10 g。經(jīng)過提取分離后，本制劑的單日口服劑量（按復方提取精制物計）為4.5 g左右。基于胃漂浮片需要加入大量胃漂浮材料以保證漂浮性能，因此本制劑擬設計成每日口服3次，每次5片的胃漂浮片。為了保證胃漂浮片能達到有效血藥濃度，本制劑的藥材處方日服劑量與原顆粒日服劑量相同；由于胃漂浮片具有緩釋效果，所以將服藥次數(shù)由4 次降低到3次。胃幽康胃漂浮片中每片含復方提取精制物0.3 g，輔料用量控制在0.3 g，片質量控制在0.6 g左右。

2.3 體外釋放度和漂浮性能測定

2.3.1 體外釋放度測定 采用2010年版《中國藥典》（二部）附錄中釋放度測定第一法——轉籃法[1]。溶出介質為脫氣的人工胃液900 ml，溫度（37±0.5）℃。取胃幽康胃漂浮片6片，精密稱定，投入6個干燥的轉籃內(nèi)，調(diào)節(jié)轉籃轉速為100 r/min，待其平穩(wěn)后，將轉籃降入恒溫的溶出杯中，自樣品接觸溶出介質起立即計時，至規(guī)定時間后直接取樣3 ml（每次取樣后補充新鮮介質3 ml），用0.22 μm微孔濾膜濾過。取濾液采用HPLC法分別測定小檗堿、黃芩苷、甘草酸、延胡索乙素含量，計算累積釋放度。

2.3.2 體外漂浮性能測定 通過起漂時間（T1）和持續(xù)漂浮時間（T1）評價制劑的漂浮性能。采用2010年版《中國藥典》（二部）附錄ⅩC溶出度測定法第二法——漿法[1]裝置，轉速為50 r/min，介質為脫氣的0.1 mol/L鹽酸溶液900 ml，溫度為（37±0.5）℃。投入胃幽康胃漂浮片6 片，立即計時，記錄各片上浮到液面所需的時間（T1）和再次下沉所需的時間（T2）。

2.4 正交試驗優(yōu)選輔料用量

要滿足中藥復方胃漂浮片快速起漂、長時間漂浮和緩釋3個條件，需多種藥用輔料協(xié)同作用。前期試驗優(yōu)選出了胃幽康胃漂浮片的輔料為HPMC-K15M（水凝膠骨架材料）、十八醇（低密度助漂劑）、碳酸氫鈉（發(fā)泡劑）、PVP-K30（釋放調(diào)節(jié)劑）和硬脂酸鎂（潤滑劑）。筆者以對制劑漂浮和釋藥性能具有重要影響的HPMC-K15M（A）、十八醇（B）、碳酸氫鈉（C）3 種輔料用量為考察因素（D 為空白對照），設計L9（34）正交試驗，每個處方200 片，另含有藥物浸膏粉60 g、PVP-K30 2 g、硬脂酸鎂1 g，采用全粉末壓片。因素與水平見表1。

本制劑臨床主治為HP感染相關性慢性胃病，其藥效物質基礎主要來源于黃連生物堿，其代表性成分為小檗堿[2]，因此，擬選擇小檗堿在2、4、8 h的累積釋放度（Y2h、Y4h、Y8h）為考察指標。此外，體外漂浮性能（T1應小于3 min，T2應大于8 h）也是本制劑的重要特性，但體外漂浮性能指標不易量化，因此僅作為參考指標。根據(jù)“2.3.1“項下方法測定所制片劑中小檗堿的Y2h、Y4h、Y8h，以2 h釋放30%（評價是否能快速起效和是否突釋）、4 h釋放55%（評價是否具緩釋性）和8 h釋放90%以上（評價生物利用度是否符合要求）為基準，以X值（計算公式如下）為綜合評價指標。X值越小說明釋放越接近設計目標，通常X＜0.2即可[3]。正交試驗設計與結果見表2，方差分析結果見表3。

表1 因素與水平（g）Tab 1 Factors and levels（g）

表2 正交試驗設計及結果Tab 2 Design and results of orthogonal test

表3 方差分析結果Tab 3 Results of variance analysis

方差分析結果表明，因素B 和C 對小檗堿體外累積釋放度的影響不顯著，而因素A 對小檗堿體外累積釋放度的影響具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。直觀分析結果表明，最優(yōu)工藝條件為A3B1C1，即HPMC-K15M 40 g、十八醇14 g、碳酸氫鈉6 g（200片量，片質量約0.6 g）。制劑成型工藝為：取藥物浸膏粉、HPMC-K15M、十八醇、碳酸氫鈉和PVP-K30混勻，加入硬脂酸鎂，全粉末壓片（0.615 g/片）即得。

2.5 驗證試驗

按上述優(yōu)選處方進行3批放大試驗（放大10倍，每批2 000片）。結果顯示，3批制劑（批號：20140518、20140519、20140520）的T1均小于3 min、T2均大于8 h，符合設計要求；2、4、8 h 的平均累積釋放度分別為31.94%、55.88%、93.34%，RSD 分別為1.2%、1.5%、1.5%（n＝3），表明工藝穩(wěn)定，結果見表4。

2.6 多成分體外藥物釋放度研究

本制劑中黃連、延胡索、黃芩和甘草是主要臣藥，現(xiàn)代研究表明，其具有明確的殺滅HP 和保護胃黏膜等藥理作用[4-5]，因此選擇其代表性活性成分小檗堿、延胡索乙素、黃芩苷和甘草酸評價所制制劑的體外釋藥規(guī)律。按“2.3.1”項下方法測定釋放度。所制制劑中各有效成分體外釋藥具有明顯的緩釋特性，結果見表5。

表4 驗證試驗結果Tab 4 Results of verification test

表5 4種有效成分不同時間的體外累積釋放度Tab 5 Cumulative release rate of four active ingredients at different time

2.7 體外多成分釋藥規(guī)律研究

2.7.1 釋放模型擬合 將小檗堿、延胡索乙素、黃芩苷和甘草酸的體外釋放百分率（F）和時間（t）分別按Higuchi 方程、零級釋放模型和一級釋放模型進行擬合，求出釋放方程，以相關系數(shù)r最大者為最優(yōu)釋放模型。所制制劑中小檗堿等4種指標成分的釋放規(guī)律均以Higuchi釋放模型為最佳擬合模型，結果見表6。

表6 4種有效成分的釋藥模型擬合結果Tab 6 Fitting results of release kinetic modeling for four active ingredients

2.7.2 釋藥機制 采用Peppas 方程Ft/F∞＜ktn[或lg（Ft/F∞）＝nlgt+lgk]探討釋放機制。式中Ft/F∞是t時刻的累積釋放百分率，k為骨架結構的幾何特征常數(shù)，n為釋放參數(shù)。當0.45≤n＜0.89時，藥物釋放機制為非Fick’s擴散，即擴散與骨架溶蝕協(xié)同作用；當n＜0.45 時，藥物釋放機制為Fick’s 擴散；當n≥0.89時，藥物釋放機制為骨架溶蝕作用[5]。胃幽康胃漂浮片中小檗堿等4 種指標成分的釋放機制均為擴散協(xié)同骨架溶蝕作用，結果見表7。

表7 4種有效成分的釋藥機制Tab 7 Release mechanism of four active ingredients

2.8 4種成分釋藥曲線相似性評價

采用Kok.K.P提出的相似因子（f2）法[6]分別判斷兩條釋藥曲線的相似性。下列公式中Xti和XTi分別表示兩條釋放曲線在同一時間的累積釋放百分率。如果f2大于50，則認為兩條曲線是相似的。

結果表明，所制制劑中小檗堿等4種指標成分的體外釋放曲線兩兩比較f2均大于80，說明各成分均衡釋放，釋放相似性結果見表8。

表8 4種有效成分體外釋藥曲線的相似因子Tab 8 f2of in vitro cumulative release curve of four active ingredients

3 討論

中藥復方胃內(nèi)漂浮給藥系統(tǒng)是根據(jù)流體動力學平衡原理制備的口服后可長期漂浮在胃液之上的一種特殊緩釋制劑，是當前中藥新劑型研究的熱點和難點之一[7-10]。筆者將治療HP感染相關性慢性胃炎的臨床有效驗方制劑“胃幽康顆粒”研制成胃漂浮片，對提高胃幽康的臨床療效、促進中藥新型給藥系統(tǒng)的研究具有重要意義。研制的胃幽康胃漂浮片達到了設計要求，其體外漂浮性能良好，可快速起漂（起漂時間在3 min以內(nèi)）和長時間漂?。ǔ掷m(xù)漂浮時間大于8 h）。體外釋放度研究結果顯示，本制劑具有良好的緩釋特性：各成分能在2 h 釋放30%左右，提示本制劑可保證快速起效且無突釋現(xiàn)象；4 h釋放55%左右，提示本制劑具有緩釋特性；8 h釋放90%以上，提示本制劑的生物利用度可符合要求。此外，各成分的釋放模型均以Higuchi方程為最佳擬合模型，釋放機制均為擴散協(xié)同骨架溶蝕作用，以上結果說明胃幽康胃漂浮片的劑型選擇與制備工藝是科學合理的。在此基礎上，筆者將進一步開展胃幽康胃漂浮片的藥動學及臨床應用等研究，并探討體外釋藥曲線與體內(nèi)藥動學的相關性，為臨床應用提供參考。

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