孫忠楊，于 瑩，謝 寧，馬 偉，董培良，張曉燕

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 中醫(yī)藥研究院，哈爾濱 150040；2. 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 附屬第一醫(yī)院，哈爾濱 150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 科技產(chǎn)業(yè)處，哈爾濱 150040)

結(jié)腸靶向滴丸克癌素中槲皮素體內(nèi)藥動學(xué)研究

孫忠楊1，于 瑩1，謝 寧2，馬 偉3，董培良1，張曉燕1

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 中醫(yī)藥研究院，哈爾濱 150040；2. 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 附屬第一醫(yī)院，哈爾濱 150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 科技產(chǎn)業(yè)處，哈爾濱 150040)

評價克癌素結(jié)腸定位包衣滴丸有效成分槲皮素在家兔體內(nèi)的藥代動力學(xué)和相對生物利用度.采用HPLC法測定受試制劑和參比制劑中健康家兔體內(nèi)槲皮素的血藥質(zhì)量濃度，DAS2.1軟件計算主要藥代動力學(xué)參數(shù).結(jié)果表明，槲皮素質(zhì)量濃度在0.004～0.4 μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系.包衣滴丸的體內(nèi)吸收時滯為5 h左右，AUC僅為參比制劑的17.6%，其Cmax為參比制劑的75.6%，二者間均不具生物等效性.該口服結(jié)腸定位制劑符合pH敏感-時間控釋雙重機理，具有良好的靶向結(jié)腸定位效果.

克癌素；結(jié)腸靶向；滴丸；藥動學(xué)

克癌素結(jié)腸定位包衣滴丸是以姜黃中的姜黃素[1]、槐米中的槲皮素[2-3]為原料藥，根據(jù)pH敏感-時間控釋雙重機理制備的新型中藥結(jié)腸靶向給藥系統(tǒng)[4-5]，提高結(jié)腸病變部位藥物濃度，有利于結(jié)腸癌的治療[5].本文主要是對克癌素結(jié)腸定位包衣滴丸受試制劑和參比制劑的藥動學(xué)參數(shù)和在藥時曲線上的差異來評價pH依賴-時間控釋型結(jié)腸定位包衣滴丸制備效果，也為臨床用藥提供指導(dǎo).

1 實驗材料

參比制劑：未包衣滴丸丸芯(自制)，規(guī)格：42 mg/丸，代號為R.

受試制劑：包衣滴丸(自制)，規(guī)格：55 mg/丸，代號為T.

槲皮素對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號：100081-200406，供含量測定用)；烏拉坦Urethane，又名氨基甲酸乙酯(上海山浦化工有限公司)；甲醇、高氯酸、三乙胺、磷酸、磷酸二氫鉀均為分析純，南京化學(xué)試劑廠生產(chǎn)；甲醇(DikmaPure，色譜醇).

2 方法與結(jié)果

2.1 動物分組、給藥方案及給藥時間

參比制劑組R和受試制劑T，每組3只家兔，共6只，隨機分配.將禁食12 h和自由飲水的家兔，分別單次約50 mL水送服受試制劑和參比制劑120丸，按下面所需采樣時間頸動脈取血2.5 mL，離心15 min，分離血漿，用4.0 μg/mL高氯酸沉淀血漿樣品.

T組：給藥后0、1、3、5、6、7、8、10、12、14、16、18、20、22、24、36 h采血.R組：給藥后0、0.5、0.75、1、3、4、5、7、9、1 2 h采血.

2.2 含量測定方法

2.2.1色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性

Diamonsil C18柱(4.6×200 mm，5 μm)，填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相∶甲醇-磷酸(0.2%)=60∶40；柱溫：25 ℃；流速：1.0 mL/min；檢測波長：360 nm.

2.2.2檢測方法的專屬性考察

取空白血漿80 μL，按“血漿樣品預(yù)處理”項下蛋白沉淀法進行處理，溶液濃縮蒸干，加甲醇溶解定容，經(jīng)0.45 μm的微孔濾膜過濾后，進樣20.0 μL，HPLC測定分析，見色譜圖如圖1.

圖1 色譜圖

2.2.3標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密吸取質(zhì)量濃度為20 μg/mL的槲皮素對照品甲醇溶液1 mL，用甲醇稀釋成2.0 μg/mL的槲皮素標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用.

2.2.4血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別精密吸取的槲皮素標(biāo)準(zhǔn)溶液加入空白血漿80 μL，渦旋混合1 min，按血漿樣品預(yù)處理進行處理后，配制成槲皮素質(zhì)量濃度為0.2、1.0、2.0、4.0、10.0、20.0 μg/mL血漿標(biāo)準(zhǔn)品溶液，經(jīng)0.45 μm的微孔濾膜過濾后，取20 μL進樣測試，得質(zhì)量濃度與峰面積的標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：Y=399 585X+ 0.008 7，相關(guān)系數(shù)r= 0.999，說明槲皮素在0.004～0.4 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好.

2.3 實驗結(jié)果

2.3.1藥時曲線

受試制劑與參比制劑的藥時曲線如圖2所示.

圖2 藥時曲線圖

2.3.2藥動學(xué)參數(shù)

采用DAS2.1.1軟件對每個給藥對象進行數(shù)據(jù)處理，結(jié)果見表1、2.

表1 受試制劑藥動學(xué)參數(shù)

表2 參比制劑藥動學(xué)參數(shù)

續(xù)表2 參比制劑藥動學(xué)參數(shù)

從以上結(jié)果可以看出，家兔單劑量口服未包衣丸芯的槲皮素血藥質(zhì)量濃度顯示，藥物不經(jīng)歷體內(nèi)時滯，而且血藥質(zhì)量濃度上升很快，1 h就達到了最高血藥濃度水平.而當(dāng)家兔單劑量口服等量的結(jié)腸定位包衣滴丸后，藥物的體內(nèi)時滯約5 h，明顯延長.同樣，達峰時間也有顯著性延遲.鑒于人體內(nèi)胃的平均轉(zhuǎn)運時間分別為2 h，小腸轉(zhuǎn)運時間 3～4 h，以及人與家兔在消化道轉(zhuǎn)運方面的種屬差異，此時包衣滴丸可能已在回腸末端或進入結(jié)腸.

3 結(jié) 語

用DAS2.1.1版藥物動力學(xué)程序處理丸芯與結(jié)腸定位包衣滴丸的平均血藥質(zhì)量濃度數(shù)據(jù).結(jié)果表明：丸芯的血藥質(zhì)量濃度數(shù)據(jù)用程序中的一室模型，無滯后時間，權(quán)重為1，進行擬合結(jié)果較好；結(jié)腸定位包衣滴丸用程序中的雙室模型，有滯后時間，為權(quán)重1，進行擬合結(jié)果較好.從實驗結(jié)果可以看出，采用Surlease水分散體[7-9]包衣工藝制備結(jié)腸定位滴丸后，制劑具有典型的緩(控)釋特征，姜黃素、槲皮素類成分結(jié)腸段高度濃集，顯示出理想的結(jié)腸定位能力，這對于今后開展中藥結(jié)腸靶向給藥系統(tǒng)的研究具有重要意義.

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Study on pharmacokinetics of quercetin in anti-cancer medicine colon-specific target dropping pill

SUN Zhong-yang1, YU Ying1, XIE Ning2, MA Wei3, DONG Pei-liang1, ZHANG Xiao-yan1

(1. Research Institute of Traditional Chinese Medicine, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China;2.The First Affiliated Hospital, Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin 150040, China;3. Science and Technology Industry Department, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China)

To study the pharmacokinetics and absolute bioavailability of quercetin in rabbits.A HPLC method was developed for the determination of the experimental and contrastive curcumin in the healthy rabbit plasma. A good linear relationship was obtained in the range of 0.004～0.4 μg/mL.Tmax=5 h, AUC was 17.6% of the reference product, andCmaxwas 75.6%of that. There was no bioequivalence between the experimental and reference product. The oral colon positioning preparation conforms to the dual mechanism of pH sensitive- controlled release time, and had good positioning to colon targeting effect.

anti-cancermedicine; colon targeting; dripping pills; pharmacokinetics

2015-05-17.

黑龍江省博士后科研啟動基金(LBH-Z10029)；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)博士創(chuàng)新基金項目(B201006)；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)優(yōu)秀青年教師科技創(chuàng)新人才支持計劃(051241)

孫忠楊(1989-)，女，碩士，研究方向：中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及新型給藥系統(tǒng)開發(fā).

張曉燕(1978-)，女，博士，副研究員， 研究方向：中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及新型給藥系統(tǒng)開發(fā).

R285

A

1672-0946(2015)05-0516-04