李云婷，張雷雷，張巧麗

（1.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院檢驗科，河北 石家莊050000；2.河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院食品部，河北 石家莊050000）

糖尿病腎病是2型糖尿病最常見的并發(fā)癥，是糖尿病主要微血管病變之一。據(jù)統(tǒng)計30%～40%糖尿病患者可能發(fā)生糖尿病腎病，進(jìn)而發(fā)展成為終末期腎臟疾?。?］；因其發(fā)生機制復(fù)雜，早期缺乏明顯的癥狀和體征，容易錯過最佳的治療時間而最終導(dǎo)致腎衰竭，因此臨床早期全面診斷顯得尤為重要。近年有研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病患者血小板活化顯著高于不伴腎病者，且2型糖尿病早期患者開始出現(xiàn)血小板活化，抗血小板活化藥物對2型糖尿病有一定的療效［2］，均提示血小板的活化與糖尿病腎病的形成有關(guān)。本研究觀察2型糖尿病并發(fā)早期腎病患者血小板膜糖蛋白CD62P、CD63的表達(dá)情況，旨在探討其在糖尿病腎病早期微血管病變發(fā)展過程中的臨床價值。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 根據(jù)1999年WHO的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］選擇河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院2013年5月—2014年5月收治的2型糖尿病患者98例，男性47例，女性51例，年齡30～70歲。其中單純糖尿病組48例，男性23例，女性25例，年齡30～65歲，平均（57.56±7.22）歲；早期糖尿病腎病組50例，男性24例，女性26例，年齡40～70歲，平均（59.36±5.73）歲。早期糖尿病腎病入選標(biāo)準(zhǔn)：患者出現(xiàn)微量白蛋白尿（Uaer 20～200μg／min，臨床診斷為早期糖尿病腎?。?，且排除其他腎臟疾病及糖尿病急性并發(fā)癥，近期無糖尿病酮癥酸中毒等。正常對照組為同期來院查體的無糖尿病史的健康體檢者49例，男性27例，女性22例，年齡30～75歲，平均（57.2±5.45）歲。3組性別、年齡差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

所有受檢者在近半個月內(nèi)未服用抗血小板藥物和抗凝藥物。

1.2 研究方法 所有受檢者空腹抽取靜脈血6mL。其中3mL靜脈血，枸櫞酸鈉抗凝，輕輕顛轉(zhuǎn)混勻5次以上，各取5μL全血分別加入CD62PFITC／CD63-FITC單抗10μL，室溫下避光反應(yīng)20min后，立刻加入含1%多聚甲醛1mL固定血小板，應(yīng)用美國BD公司FACSCantoⅡ型流式細(xì)胞儀測定。CD62P、CD63，主要試劑由Bioscience公司提供；另外3mL靜脈血用于β2微球蛋白（β2 microglobulin，β2-MG）的測定，β2-MG 采用膠乳增強免疫比濁法，試劑由北京科美生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義

2 結(jié) 果

早期糖尿病組CD62P、CD63陽性表達(dá)率高于正常對照組和單純糖尿病組；單純糖尿病組CD62P、CD63陽性表達(dá)率高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；早期糖尿病腎病組和單純糖尿病組β2-MG高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

表1 3組CD62P、CD63、β2-MG比較Table 1 CD62P，CD63andβ2-MG levels in three groups（±s）

表1 3組CD62P、CD63、β2-MG比較Table 1 CD62P，CD63andβ2-MG levels in three groups（±s）

＊P＜0.01與正常對照組比較 ＃P＜0.01與單純糖尿病組比較（q檢驗）

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3 討 論

糖尿病腎病主要指糖尿病性腎小球硬化癥，一種以微血管損害為主的腎小球病變。在正常人的循環(huán)血液中，血小板基本處于非活化狀態(tài)，非活化的血小板在受到各種理化因素（如高血糖）的刺激下，可被激活成活化血小板，血小板活化可表現(xiàn)為膜內(nèi)、膜表面及血漿中有一些特定的血小板糖蛋白成分發(fā)生改變，這些糖蛋白即為血小板活化標(biāo)志物。目前，已發(fā)現(xiàn)與糖尿病有關(guān)的血小板活化標(biāo)志物包括CD62P、CD63（又稱α顆粒膜蛋白GMP140）等。

CD63為血小板溶酶體顆粒膜蛋白，活化時經(jīng)脫粒反應(yīng)而表達(dá)于血小板膜表面，介導(dǎo)中性粒細(xì)胞對活化內(nèi)皮的黏附。CD62P屬于選擇素家族黏附分子，表達(dá)于血小板α顆粒膜表面。當(dāng)血小板活化時α顆粒迅速與血小板膜融合而在血小板膜表面表達(dá)成為血小板活化的特異標(biāo)志［4-6］。CD62P、CD63在正常情況下不表達(dá)或低水平表達(dá)，當(dāng)長期處于高血糖等狀態(tài)時，2型糖尿病腎病患者體內(nèi)存在代謝紊亂，體內(nèi)升高的血清同型半胱氨酸通過氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，可致微血管基底膜增厚，增加血小板黏附，易于形成血栓，增加糖尿病血管病變患病率［7-8］。同時也存在炎癥、水腫、硬化、出血、血栓等病理變化。

β2-MG主要由淋巴細(xì)胞分泌，是一種低分子量的蛋白質(zhì)，可自由經(jīng)腎小球濾入原尿，幾乎全部在近端小管被重吸收并分解破壞［9］，可反映腎小球的濾過功能，是早期診斷腎小球病變的敏感指標(biāo)［10］。但特異性差，其他炎癥、中毒等均可升高。有研究顯示DN患者CD62P、CD63陽性率較血清β2-MG陽性率明顯增高，可更敏感地反映腎小管早期損害［11-12］。

本研究結(jié)果表示，單純糖尿病組的CD62P、CD63的陽性表達(dá)率高于正常對照組，早期糖尿病腎病組CD62P、CD63的陽性表達(dá)率高于單純糖尿病組。李穎等［6］研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病患者CD62P、CD63的表達(dá)水平高于正常對照組；血小板活化與糖尿病腎病的形成有關(guān)，其原因可能是在糖尿病腎病中，由于血小板功能亢進(jìn)而誘發(fā)高凝狀態(tài)，血小板功能改變先于微血管病變的發(fā)生且活化程度隨著微血管病變的發(fā)展而加強。糖尿病腎病患者血小板活化顯著高于不伴腎病者。抗血小板活化藥物對糖尿病腎病有一定的療效［2］。均提示血小板的活化與糖尿病腎病的形成有關(guān)［11-12］。

綜上所述，血小板的活化在糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，因此在糖尿病診療中，除積極控制血糖外，還應(yīng)考慮使用抗血小板活化藥物，抑制血小板活化，以阻止細(xì)胞浸潤、炎癥、腎小球病變，改善微循環(huán)障礙，阻止糖尿病的腎臟損害。我們認(rèn)為，CD62P、CD63不僅可早期預(yù)測糖尿病患者腎臟微血管病變的發(fā)生發(fā)展，而且CD62P、CD63可能成為糖尿病早期腎病微血管病變的一個新的檢測及治療靶點。

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