王佳蓉，吳瑞珊，曾冰微

（1.福建醫(yī)科大學第二臨床醫(yī)學院耳鼻咽喉科，福建 泉州362000；2.福建醫(yī)科大學第二臨床醫(yī)學院病理科，福建 泉州362000）

下咽癌是頭頸部常見的惡性腫瘤，且多表現(xiàn)為鱗狀細胞癌，病因尚未完全闡明。該疾病往往分化低，早期難于發(fā)現(xiàn)，且早期即可轉(zhuǎn)移，惡性程度較高，臨床治療困難，患者預后較差。部分研究顯示，腫瘤細胞的侵襲與轉(zhuǎn)移，起于對細胞外基質(zhì)的降解，基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinases 2，MMP-2）是參與該過程的主要酶［1-2］。環(huán)氧化酶2（cyclooxygenase 2，Cox-2）則在結(jié)直腸癌、宮頸癌等惡性腫瘤中具有高表達［3-4］。如果能證實兩類酶也與下咽癌的轉(zhuǎn)移有一定的聯(lián)系，必然有助于疾病的治療。本研究對伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移下咽癌、未伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移下咽癌和聲帶息肉3組患者的MMP-2和Cox-2表達進行了對比分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年9月—2013年9月我院收治的下咽癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者21例為觀察組，男性13例，女性8例，年齡44～77歲，平均（55.7±3.2）歲，已排除術前有放療史、長期服用糖皮質(zhì)激素等可能干擾研究的患者標本，國際抗癌聯(lián)盟（union for international cancer control，UICC）分期Ⅰ期3例，Ⅱ期3例，Ⅲ期6例，Ⅳ期9例。選擇同期聲帶息肉患者20例為對照A組，男性12例，女性8例，年齡44～69歲，平均（54.6±2.5）歲。選擇同期下咽癌但無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者20例為對照B組，男性13例，女性7例，年齡45～71歲，平均（55.1±1.9）歲。3組性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法 主要試劑包括兔抗人抗體Cox-2、鼠抗人抗體MMP-2等，試劑盒購自北京華夏遠洋科技有限公司。檢測方法一般流程如下：首先，對載玻片進行肥皂水浸泡、酸性液浸泡等常規(guī)處理，備用；隨后，取出標本，置于切片機上，設定厚度為3 μm進行連續(xù)切片，挑選合適樣本各2片，預處理，備用；接下來行EnVision免疫組織化學檢測，經(jīng)過脫蠟、水化、抗原修復、酶活性阻斷、一抗及二抗孵育、顯色及染色、脫水等處理過程后，以中心樹膠封片；最后由2名經(jīng)驗豐富的病理科醫(yī)師分別獨立閱片、評分。

1.3 評分標準 對每個組織標本隨機選擇5個高倍視野，做半定量積分。針對于細胞組織著色面積，以面積超過2／3為3分，以面積在1／3～2／3之間為2分，以面積不超過1／3為1分，以無著色為0分；針對于著色深淺，以棕褐色為3分，以棕黃色為2分，以黃色為1分，以無色為0分。陽性標準為上述2項之和達3分，強陽性標準為2項之和達4分或以上，總陽性率為2項之和。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。計量資料以±s表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗；計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組標本MMP-2表達比較 觀察組MMP-2表達陽性率與對照A組和對照B組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但強陽性和總陽性率明顯高于對照A組（P＜0.05），觀察組與對照B組及對照A、B組之間差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。觀察組染色均分高于對照A、B組，對照A、B組之間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3組標本MMP-2表達比較

2.2 3組標本Cox-2表達比較 觀察組Cox-2表達陽性率與對照A組和對照B組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但強陽性和總陽性率明顯高于對照A組（P＜0.05），觀察組與對照B組及對照A、B組之間差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。觀察組染色均分高于對照A、B組，對照A、B組之間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 3組標本Cox-2表達比較

3 討 論

下咽癌發(fā)病率高，難以控制，侵襲和轉(zhuǎn)移均較為迅速，如何加強早期診斷成為開展治療和提升患者預后的關鍵，相關科研人員對此展開了深入的研究與探討，但取得的效果并不顯著［5］。

研究顯示，MMP-2和Cox-2在部分惡性腫瘤中存在著高表達現(xiàn)象［6-8］。提示在下咽癌轉(zhuǎn)移患者體內(nèi)可能存在著同樣的高表達現(xiàn)象。本研究結(jié)果顯示，下咽癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者MMP-2和Cox-2表達陽性率分別為66.7%和61.9%，明顯高于聲帶息肉患者的15.0%和10.0%。支持上述觀點。

Cox-2的致腫瘤機制可能為促進細胞增殖，提升促血管因子的表達，進而促進腫瘤新生血管形成，抑制腫瘤細胞凋亡，增加腫瘤細胞的侵襲性，使多環(huán)芳香烴類化合物轉(zhuǎn)換為親電氧化物、抑制免疫反應等［9］。本研究進一步提示Cox-2的過度表達在下咽癌的轉(zhuǎn)移中起著重要的作用。MMP-2在下咽癌轉(zhuǎn)移中的主要作用是能夠提升腫瘤細胞降解細胞外基質(zhì)及基膜的能力，同時還能抑制反轉(zhuǎn)錄富含半胱氨酸蛋白基因的表達，該基因?qū)δ[瘤的抑制作用，已得到了臨床研究的直接證實［10］。

本研究最主要的成果在于，能夠直接證實可以通過檢測MMP-2及Cox-2來預測下咽癌的進程。對于癌癥患者而言，其疾病出現(xiàn)之后，MMP-2及Cox-2含量將顯著上升，從而發(fā)揮各自病理學的作用，推動癌癥進程的發(fā)展；待出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移之后，其含量又將呈現(xiàn)一個顯著性增長，這可能是因為淋巴轉(zhuǎn)移之后兩蛋白的作用靶點增加，刺激了其分泌量的增加。

總之，本研究結(jié)果證實下咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者體內(nèi)存在著MMP-2及Cox-2高表達的現(xiàn)象，如果能在早期對兩蛋白進行檢測，就能夠有效指導癌癥的治療。

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［5］ 楊樂，鄒曉靜.缺氧誘導因子-1α對脂多糖所致心肌細胞線粒體功能損傷的影響［J］.中華急診醫(yī)學雜志，2012，21（8）：836-839.

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