李勇

(武警遼寧省總隊(duì)醫(yī)院婦產(chǎn)科,遼寧沈陽110000)

細(xì)胞角蛋白在微轉(zhuǎn)移檢測中的意義

李勇

(武警遼寧省總隊(duì)醫(yī)院婦產(chǎn)科,遼寧沈陽110000)

目的探討廣譜細(xì)胞角蛋白CK對宮頸癌患者盆腔淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移情況的檢測價(jià)值，所獲數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)。方法利用CK免疫組織化學(xué)染色法對40例宮頸癌患者的229枚腋窩淋巴結(jié)進(jìn)行微轉(zhuǎn)移檢測。結(jié)果40例患者中有17例發(fā)現(xiàn)有微轉(zhuǎn)移，免疫組化有更好的敏感性，兩種檢測方法差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論應(yīng)用CK免疫組織化學(xué)法對檢測宮頸癌盆腔淋巴結(jié)進(jìn)行微轉(zhuǎn)移是可行的，對指導(dǎo)治療、判斷預(yù)后具有積極的臨床意義。

宮頸癌；盆腔淋巴結(jié)；微轉(zhuǎn)移；免疫組織化學(xué)法

宮頸癌(cervical cancer)是一種對女性威脅較大的惡性腫瘤，其發(fā)病率逐年增高。宮頸癌的轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)仍然是宮頸癌治療和預(yù)后的關(guān)鍵[1]。因此，如何早期判斷宮頸癌是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有重要意義。目前，臨床上常發(fā)現(xiàn)規(guī)范的宮頸癌根治術(shù)中清掃盆腔淋巴結(jié)，經(jīng)常規(guī)病理檢查未查見轉(zhuǎn)移灶，但術(shù)后患者的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移率仍高。這說明在術(shù)前已存在腫瘤微小癌灶。微轉(zhuǎn)移（micrometastasis)是指常規(guī)病理HE染色組織切片不易發(fā)現(xiàn)的直徑≤2mm，且＞0.2mm的腫瘤轉(zhuǎn)移灶[2]，這可能是導(dǎo)致患者術(shù)后復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的重要原因。因此，能否采用新的檢測方法并發(fā)現(xiàn)評估宮頸癌潛在轉(zhuǎn)移，使我們能夠更有針對性的采取個(gè)體化治療，對于改善患者預(yù)后有著重要意義[3]。

細(xì)胞角蛋白（Cytokeratin，CKs）在上皮細(xì)胞中廣泛存在。目前在臨床上，有關(guān)以CK作為腫瘤微轉(zhuǎn)移標(biāo)志物檢測乳腺癌、胃癌、肺癌,大腸癌等患者淋巴結(jié)中的微轉(zhuǎn)移檢測已有廣泛應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)此標(biāo)志物的檢測較敏感且高特異性。有作者使用常規(guī)病理切片HE染色聯(lián)合CK免疫組化法檢測對宮頸癌患者盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢出率有明顯提高[4]。為此，我們通過研究細(xì)胞角蛋白CK對宮頸癌盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或己經(jīng)存在微轉(zhuǎn)移的檢測的效果?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)宮頸癌根治性手術(shù)40例，所有患者

腫瘤組織均經(jīng)常規(guī)病理檢查并確診為宮頸浸潤性鱗癌。術(shù)前均未行放療、化療和其他治療?；颊吣挲g30～75歲，平均51.0歲。腫瘤直徑：小于4 cm者26例，大于等于4 cm者14例。腫瘤組織細(xì)胞的分化程度：I級患者2例，II級患者27例，III級患者11例。10例經(jīng)常規(guī)病理證實(shí)發(fā)現(xiàn)有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，其余患者未見轉(zhuǎn)移。

1.2 標(biāo)本收集及檢測經(jīng)常規(guī)病理檢查證實(shí)有13枚淋巴結(jié)有癌轉(zhuǎn)移，其余淋巴結(jié)未見轉(zhuǎn)移。每個(gè)標(biāo)本連續(xù)切3張（4μm厚度）分別行免疫組化染色及HE染色，同時(shí)1片備用。陽性微轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)切片的鑒別均采用由兩位病理科醫(yī)師分別鑒別的雙盲法，兩人都判定為陽性的為淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移陽性。兩人判斷結(jié)果有歧義，經(jīng)第三人會診確定。實(shí)驗(yàn)中設(shè)立陰、陽性對照。

1.3 檢測標(biāo)準(zhǔn)CK免疫組織檢測的陽性細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)：結(jié)合切片中染色細(xì)胞形態(tài)，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)和(或)胞膜上有棕黃色顆粒沉著，其直徑≤2mm，且＞0.2mm的腫瘤轉(zhuǎn)移灶判斷為微轉(zhuǎn)移陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS16.0軟件，所獲數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

宮頸鱗癌組織的CK檢測的陽性率為100%（40/ 40)，常規(guī)病理檢查已證實(shí)轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)其CK檢測的陽性為100%(13/13)，229個(gè)淋巴結(jié)中，CK檢測的陽性率為8.73%(20/229)，經(jīng)常規(guī)病理檢查陰性淋巴結(jié)的CK的陽性率為3.24%(7/216)。17例患者的未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中7枚存在微轉(zhuǎn)移。

3 討論

腫瘤的微轉(zhuǎn)移灶在光鏡下檢測較容易被漏診，分子生物學(xué)的發(fā)展使得對腫瘤微轉(zhuǎn)移進(jìn)行檢測成為可能[4]。本研究采用CK免疫組化染色來判斷宮頸癌患者盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和微轉(zhuǎn)移狀況，發(fā)現(xiàn)宮頸癌患者淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移是客觀存在的，這使我們能夠更全面認(rèn)識宮頸癌患者淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移狀態(tài)，從而為手術(shù)方案的制定及后繼個(gè)體化治療提供理論依據(jù)以提高術(shù)后生存率。

宮頸癌患者淋巴結(jié)中存在的小簇的腫瘤細(xì)胞通過淋巴道轉(zhuǎn)移到其他組織、器官后是否會出現(xiàn)繼發(fā)性癌灶，這與患者的身體狀態(tài)及原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶中腫瘤細(xì)胞的組織學(xué)類型新址的凋亡基因開放度有密切關(guān)系。當(dāng)術(shù)后患者的免疫降低時(shí)，這些腫瘤細(xì)胞可能會出現(xiàn)增殖，潛在的腫瘤轉(zhuǎn)移會演變?yōu)轱@性轉(zhuǎn)移，進(jìn)而影響患者的預(yù)后。

由于宮頸癌淋巴結(jié)中轉(zhuǎn)移和微轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞顏色相似，在常規(guī)病理檢查中，觀測切片中是否存在有微轉(zhuǎn)移灶不易，而淋巴結(jié)CK免疫組化染色法對檢測轉(zhuǎn)移和微轉(zhuǎn)移癌灶較敏感?；加袑m頸惡性腫瘤的患者行根治性手術(shù)后，其復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移常常是由潛在的淋巴道中微移發(fā)展而來的。由于患者免疫系統(tǒng)的“監(jiān)視”，這些癌細(xì)胞可能會處于“非活動(dòng)”狀態(tài)。由于腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的過程，局部復(fù)發(fā)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是否發(fā)生決定于很多因素，如癌生物學(xué)特性、患者免疫強(qiáng)弱、局部微環(huán)境等。有作者對宮頸癌隨訪患者淋巴結(jié)進(jìn)行CK19免疫組化的檢測[5]，發(fā)現(xiàn)了宮頸癌患者盆腔所清掃的淋巴結(jié)中常規(guī)病理檢查為陰性的淋巴結(jié)中的微轉(zhuǎn)移，通過對患者隨訪，發(fā)現(xiàn)這些微轉(zhuǎn)移陽性的患者的預(yù)后較差。盡管宮頸癌患者的盆腔淋巴結(jié)是否發(fā)生微轉(zhuǎn)移在宮頸癌的臨床分期中不像乳腺癌那樣明顯，但是若我們了解患者的淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移狀態(tài)，其后續(xù)的治療方案可能有所改變。研究表明，同期的宮頸癌患者發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移后其5年生存率低[6]，復(fù)發(fā)率高[7]，可能這些患者術(shù)后體內(nèi)，特別是淋巴道內(nèi)存在著微小轉(zhuǎn)移灶的緣故[8,9,10]，這或許是造成患者術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的原因。CK免疫組化法微轉(zhuǎn)移檢測將使我們對宮頸癌術(shù)后的診治有更多的選項(xiàng)，因?yàn)檫@提供了對腫瘤早期轉(zhuǎn)移及亞臨床轉(zhuǎn)移更精確的診斷方法，也為宮頸癌患者術(shù)后的預(yù)后研究并真正實(shí)現(xiàn)患者個(gè)體化治療提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。CK免疫組化對于早期宮頸癌來說微轉(zhuǎn)移灶的早期檢出，對于評價(jià)早期宮頸癌微轉(zhuǎn)移和預(yù)后都具有重要意義。

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10.3969/j.issn.1008-4118.2015.03.003

2015-04-28