馮爵榮 楊幼林

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是一種慢性特發(fā)性反復(fù)發(fā)作的腸道炎性疾病，以腹痛、腹瀉、排膿血便為主要臨床表現(xiàn)。UC的發(fā)病機(jī)制一般認(rèn)為與遺傳因素、環(huán)境因素、微生物和免疫紊亂的共同作用相關(guān)。UC的致病因素中，免疫功能異常成為近年來研究的熱點(diǎn)之一，尤其是核因子-κB（NF-κB），其過分活躍與多種炎性疾病相關(guān)，在炎性反應(yīng)中起到樞紐作用［1-3］。而對(duì)NF-κB功能的持續(xù)抑制可導(dǎo)致免疫細(xì)胞發(fā)育異?；蛏L(zhǎng)延緩，造成機(jī)體免疫功能缺陷和外周淋巴器官形成障礙。

NF-κB是一類能與免疫球蛋白κ輕鏈基因增強(qiáng)子κB序列（GGGACTTTCC）特異結(jié)合的核蛋白轉(zhuǎn)錄因子。哺乳類動(dòng)物NF-κB轉(zhuǎn)錄因子家族（又稱Rel家族）包括5個(gè)成員：c-Rel、RelA／p65、RelB、NF-κB1／p50和 NF-κB2／p52。NF-κB 一般以同二聚體或異二聚體的形式存在，如p65-p50、p50-p50。NF-κB家族N末端都有一個(gè)約由300個(gè)氨基酸組成的高度保守的Rel同源性結(jié)構(gòu)域（RHD），負(fù)責(zé)與DNA結(jié)合、二聚體化及與NF-κB抑制性蛋白（IκB）家族成員相互作用。

無刺激狀態(tài)下，大部分NF-κB與IκB結(jié)合，以無活性狀態(tài)存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。IκB是一類基因家族，包括IκBα、IκBβ、IκBγ等成員，其主要功能是與NF-κB結(jié)合后使其失活。當(dāng)細(xì)胞受到生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、淋巴因子及紫外線的刺激或處于應(yīng)激狀態(tài)（如缺氧）時(shí)，細(xì)胞表面的受體將這些信息傳遞給胞質(zhì)中的細(xì)胞IκB抑制蛋白激酶（IκK），IκK 可使IκB磷酸化并使之從 NF-κB復(fù)合物上解離下來，是NF-κB得以活化的前提。磷酸化的IκB被細(xì)胞內(nèi)的蛋白酶體降解，而活化的NF-κB復(fù)合物則從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)入細(xì)胞核內(nèi)，與其他轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一起啟動(dòng)相關(guān)基因的表達(dá)，從而發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。

NF-κB通路是機(jī)體炎性反應(yīng)發(fā)生和免疫功能異常的共同通路，該通路可作為一些由免疫功能異常所致疾病的藥物治療的理想靶點(diǎn)。本文從IκB、IκK復(fù)合體、NF-κB 三個(gè)方面綜述 NF-κB通路在UC治療中的應(yīng)用。

1 IκB

1.1 糖皮質(zhì)激素

糖皮質(zhì)激素為廣泛炎性反應(yīng)的抑制劑，通過增強(qiáng)IκB-α的基因轉(zhuǎn)錄而上調(diào)IκB家族中IκB-α的水平，使 NF-κB與更多的IκB-α結(jié)合，抑制 NF-κB的活化，最終炎性細(xì)胞因子釋放受到抑制，UC的炎性反應(yīng)得到控制［4］。此外，活化的糖皮質(zhì)激素受體能直接與活化的 NF-κB的p65亞單位結(jié)合，抑制NF-κB與靶DNA結(jié)合。

1.2 氨基水楊酸制劑

5-氨基水楊酸（5-ASA）制劑和水楊酸偶氮磺胺吡啶（SASP）制劑可抑制前列腺素合成和炎性介質(zhì)白三烯的形成，從而抑制炎性反應(yīng)。此外，還可以抑制NF-κB的活化而控制炎性反應(yīng)，其作用機(jī)制是：（1）在結(jié)腸上皮細(xì)胞中，SASP可阻斷IκB-α磷酸化及其后的降解，并使NF-κB的DNA結(jié)合活性明顯降低；（2）5-ASA可直接阻斷RelA的磷酸化，使NF-κB激活受阻［5-6］。

1.3 羧基氨基咪唑

羧基氨基咪唑（CAI）為血管生成抑制劑，用于腫瘤治療，抑制腫瘤的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移，近年來的研究發(fā)現(xiàn)其還具有抗炎作用。Guo等［7］的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)胃給予CAI 20 mg·kg-1·d-1，共10 d，結(jié)果UC模型組的血便情況和腸道病變獲得好轉(zhuǎn)。免疫組織化學(xué)檢測(cè)法結(jié)果顯示胞質(zhì)中NF-κB p65的表達(dá)明顯下降，并且蛋白印跡分析證實(shí)p-IκB生成增加，提示IκB的高表達(dá)可抑制NF-κB的活性從而控制炎性反應(yīng)持續(xù)。

2 IκK復(fù)合體

2.1 脫氫環(huán)氧甲基醌霉素

脫氫環(huán)氧甲基醌霉素（DHMEQ）為新型NF-κB抑制劑，是醌霉素C（epoxyquinomycin C）的衍生物，由 Matsumoto等［8］從2，5-二甲氧基苯胺合成而來，包括DHM2EQ和DHM3EQ，兩者互為異構(gòu)體；與DHM3EQ相比，DHM2EQ的活性更強(qiáng)、毒性更小。DHMEQ通過復(fù)雜的機(jī)制干預(yù)NF-κB通路：早期階段，DHMEQ可與p65直接結(jié)合，阻止NF-κB移位，并且抑制NF-κB與靶DNA結(jié)合，阻斷NF-κB通路；晚期階段，DHMEQ使活性氧（ROS）生成增多，從通路的上游和下游抑制下調(diào)IκK水平，使IκB的活性減弱。同時(shí)ROS不僅干擾了TAK1／TAB的磷酸化，還經(jīng) ROS／非折疊蛋白應(yīng)答（UPR）旁路產(chǎn)生轉(zhuǎn)錄因子CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β（C／EBPβ），并可與p65及 NF-κB家族其他成員交聯(lián)從而抑制NF-κB在靶基因上移位［9］。

2.2 小白菊內(nèi)酯

小白菊內(nèi)酯（parthenolide）是從艾菊中提取純化的具有藥物活性的一種倍半萜內(nèi)脂化合物。Zhao等［10］的動(dòng)物結(jié)腸炎實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，小白菊內(nèi)酯能抑制IκB磷酸化，使其活性增加，繼而下調(diào)髓過氧化物酶的活性和NF-κB p65的表達(dá)，結(jié)果腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等炎性細(xì)胞因子的分泌明顯減少，可有效緩解葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型小鼠的癥狀?？喽箟A和姜黃素治療UC亦有一定的效果，可能與抑制NF-κB通路有關(guān)。

3 NF-κB

3.1 反義寡核苷酸

反義寡核苷酸（ASON）是一段人工合成的短鏈核酸（有15～25個(gè)核苷酸），其堿基順序與特定靶mRNA或靶DNA互補(bǔ)，可特異性抑制或阻止該基因的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)，故又被形象地稱為“基因封條”。已有許多研究證實(shí)，UC患者腸黏膜組織中以NF-κB的亞單位p65為主，在調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄方面發(fā)揮關(guān)鍵作用［11］。因此，采用 NF-κB p65 ASON抑制或封閉NF-κB p65 mRNA的表達(dá)，使p65蛋白合成減少，NF-κB的活性下降，從而使細(xì)胞因子釋放減少，阻斷炎性反應(yīng)，這對(duì)UC具有重要的治療價(jià)值［12-14］。

3.2 誘騙性寡核苷酸

誘騙性寡核苷酸（decoy ODN）為一長(zhǎng)約22 bp的短雙鏈DNA，如NF-κB誘騙性寡核苷酸，與靶轉(zhuǎn)錄因子序列一致，經(jīng)轉(zhuǎn)染與靶基因啟動(dòng)子相作用，影響靶基因的表達(dá)［15-17］。NF-κB誘騙性寡核苷酸僅將異常激活的NF-κB降至基礎(chǔ)水平，而非完全阻斷 NF-κB通路［18］。NF-κB誘騙性寡核苷酸治療三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎，不會(huì)抑制腸外器官的NF-κB和引起CD4＋T細(xì)胞凋亡，故此療法特異性較高且可長(zhǎng)期應(yīng)用［19-21］。

4 結(jié)語

針對(duì)NF-κB通路治療UC已獲得明顯效果，但容易復(fù)發(fā)，可能還有其他通路參與UC的發(fā)生。未來基因診斷技術(shù)可直接定位UC的致病基因，通過靶基因的誘騙性寡核苷酸可減少或抑制靶基因的表達(dá)，有效控制異常的免疫反應(yīng)。雖然許多研究已證實(shí)針對(duì)NF-κB通路治療在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中有效，但應(yīng)用于患者的效果仍不清楚。鑒于NF-κB通路與炎性反應(yīng)的關(guān)系密切，為UC提供了更安全有效的治療方向，更進(jìn)一步全面研究NF-κB通路是非常必要的。

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