張素芳 周平玉

梅毒螺旋體部分膜蛋白研究進(jìn)展

張素芳 周平玉

梅毒是由梅毒蒼白螺旋體引起的一種可侵犯多器官的慢性性傳播疾病。目前梅毒螺旋體尚不能在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，獲取較困難，從而阻礙了對(duì)梅毒致病機(jī)制的研究、診療方案的優(yōu)化和疫苗的研制。梅毒螺旋體全基因序列的揭示，TprK蛋白、Tp0483蛋白、Tp0155蛋白等一些重要膜蛋白成功表達(dá)及對(duì)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、抗原性和免疫保護(hù)作用的深入研究，為梅毒發(fā)病機(jī)制的研究、診療方案的優(yōu)化和疫苗的研制提供了基礎(chǔ)和可能。概述近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的對(duì)梅毒螺旋體具有診斷意義和免疫保護(hù)作用的幾種主要膜蛋白的研究狀況。

梅毒；蒼白密螺旋體；外膜蛋白質(zhì)類；疫苗；免疫；抗原變異

近年來(lái)梅毒的發(fā)病率呈快速上升趨勢(shì)，對(duì)公共衛(wèi)生構(gòu)成嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。梅毒是由梅毒蒼白螺旋體（Tp）引起的一種慢性播散的性傳播疾病，可侵犯全身各器官，產(chǎn)生多種臨床癥狀和體征，導(dǎo)致多系統(tǒng)病變和出現(xiàn)不可逆性損害，危害極大。雖然青霉素對(duì)治療梅毒有特效性，但仍不能有效控制病原體傳播。迄今梅毒螺旋體尚不能在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，并且人類是Tp的唯一自然宿主，梅毒家兔模型不能完全模擬人的發(fā)病，這些都阻礙了對(duì)梅毒發(fā)病機(jī)制的研究和疫苗研制的進(jìn)程。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，梅毒螺旋體基因組測(cè)序完成后，人們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一系列與梅毒螺旋體致病及免疫應(yīng)答等相關(guān)的重組Tp膜蛋白。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，TprK基因具有異質(zhì)性，從而引起Tp抗原變異性［1-3］。Tp0483和Tp0155蛋白與宿主細(xì)胞基質(zhì)結(jié)合，在Tp早期感染起重要作用［4］。這些膜蛋白有望成為提高優(yōu)化梅毒診療方法和疫苗研制的候選抗原，以期用于降低梅毒發(fā)病率和優(yōu)化臨床治療方案。

1 Tp0326

1.1 Tp0326基因和氨基酸序列特點(diǎn)：2000年Cameron 等［5］發(fā)現(xiàn) Tp0326，其全長(zhǎng) 2 562 bp，編碼853個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量為96 127。Tp0326蛋白為與革蘭陰性桿菌序列同源的外膜蛋白，歸類為孔蛋白家族，其預(yù)測(cè)結(jié)構(gòu)模型是N末端包含5個(gè)多肽運(yùn)輸相關(guān)結(jié)構(gòu)域（POTRA），C末端由18股兩親性β桶狀結(jié)構(gòu)組成［6］。β桶狀結(jié)構(gòu)外膜蛋白是革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞外膜層的主要組成部分，在營(yíng)養(yǎng)吸收、維持外膜完整性、病原菌致病性及多重耐藥性等方面發(fā)揮作用。Desrosiers等［7］采用定量免疫印跡方法測(cè)Tp每個(gè)細(xì)胞Tp0326基因的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Tp0326轉(zhuǎn)錄極少。用蛋白酶K處理新鮮萃取的Tp并聯(lián)合免疫印跡方法，蛋白酶K為10 μg/ml時(shí)，Tp0326蛋白開(kāi)始出現(xiàn)降解，而對(duì)照組中Tp0453和Tp0163蛋白沒(méi)有降解。當(dāng)先用具有溶解脂質(zhì)作用的聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）和能使組成菌體細(xì)胞膜的多糖物質(zhì)分解的溶菌素處理新鮮萃取的Tp，破壞Tp的外膜，Tp0326蛋白、Tp0453和Tp0163蛋白沒(méi)有降解，再加同量蛋白酶K，它們均出現(xiàn)降解。從而確定Tp0326蛋白為Tp外膜蛋白，進(jìn)一步證實(shí)Tp0453和Tp0163蛋白是周質(zhì)蛋白。

1.2 Tp0326蛋白的免疫原性和免疫保護(hù)：雖然Tp0326蛋白表達(dá)極少，且具有易碎性，但Tp0326蛋白能引起較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。有研究發(fā)現(xiàn)，Tp0326蛋白的POTRA蛋白重組體和β桶狀結(jié)構(gòu)蛋白重組體均與Tp感染兔模型的血清產(chǎn)生較強(qiáng)的抗體反應(yīng)，而與二期梅毒患者血清反應(yīng)的主要為POTRA［7］。表明二期梅毒患者體內(nèi)缺乏與β桶狀結(jié)構(gòu)蛋白重組體反應(yīng)的抗體，推測(cè)Tp的β桶狀結(jié)構(gòu)可能參與Tp在機(jī)體內(nèi)的免疫逃逸。在免疫保護(hù)方面，Cameron等［5］用rTp92（即rTp0326）蛋白免疫實(shí)驗(yàn)兔之后，再選8個(gè)部位皮內(nèi)注射105個(gè)Tp（重復(fù)3次或5次），以未免疫兔做同樣處理作為對(duì)照組。未免疫兔出現(xiàn)典型的凸起，較硬紅色皮損，大部分發(fā)展成潰瘍，而免疫兔皮損表現(xiàn)為蒼白，平坦，稍硬，很少發(fā)展成潰瘍。由此表明，rTp92蛋白有部分免疫保護(hù)作用。此外，Tp92還促進(jìn)巨噬細(xì)胞調(diào)理作用，提高巨噬細(xì)胞吞噬，溶解Tp的能力。因此，Tp92作為一個(gè)調(diào)理素抗體的靶點(diǎn)和能產(chǎn)生免疫保護(hù)作用的抗原，有望成為制作梅毒免疫疫苗的候選膜蛋白之一。

2 Tp0136

2.1 Tp0136基因和氨基酸序列特點(diǎn)：Tp0136全長(zhǎng)1 488 bp，編碼495個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量為50 123。成熟Tp0136蛋白的第2個(gè)氨基酸為天冬氨酸，這與其他革蘭陰性桿菌膜蛋白的結(jié)構(gòu)類似，但膜蛋白位置不同。有研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌內(nèi)脂蛋白N端的第2氨基酸為天冬氨酸時(shí)，該脂蛋白位于內(nèi)膜蛋白，似乎若第2個(gè)氨基酸為其他氨基酸時(shí)，將使該脂蛋白位于外膜蛋白［8］。也有研究認(rèn)為，梅毒螺旋體桿菌脂蛋白在內(nèi)膜或外膜的位置與第2個(gè)氨基酸無(wú)關(guān)聯(lián)性。Cullen等［9］推測(cè)，在螺旋體桿菌中脂蛋白的構(gòu)象比氨基酸排列順序更能直接影響脂蛋白的位置。Tp0136蛋白位于梅毒螺旋體的外膜上［8］。另外，Tp0136氨基酸序列中含有多個(gè)甘氨酸和絲氨酸重復(fù)序列。同樣，在真核生物惡性瘧原蟲(chóng)的基因組中也發(fā)現(xiàn)含有這樣的同源重復(fù)的氨基酸序列，其中一些片段具有較高的抗原性。因而推測(cè)，Tp0136蛋白序列中的這些絲氨酸、甘氨酸重復(fù)序列可能是該蛋白免疫原性的關(guān)鍵區(qū)域。

Tp0136基因的開(kāi)放讀碼框在Tp各亞種和菌株之間均存在不同程度的變異［10-12］。Brinkman 等［8］對(duì)Street Strain 14、Samoa D、Samoa F和 CuniculiA 等 4個(gè)不同菌株的Tp0136基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增和DNA測(cè)序后發(fā)現(xiàn)：與Nichols標(biāo)準(zhǔn)株中的Tp0136序列相比，不同菌株之間的Tp0136出現(xiàn)基因錯(cuò)配、插入和缺失，這些突變導(dǎo)致了預(yù)測(cè)的Tp0136氨基酸同系物不同。Tp0136基因在Tp各亞株之間的異質(zhì)性和序列變異可能是Tp發(fā)生免疫逃逸機(jī)制之一。

2.2 Tp0136蛋白的免疫原性和免疫保護(hù)作用：Tp0136蛋白能特異地黏附在宿主細(xì)胞上，這在Tp感染宿主的第一步中起作用。Brinkman等［8］用rTp0136蛋白作為探針，檢測(cè)多種可能是Tp黏附的細(xì)胞外基質(zhì)（包括血清纖連蛋白、超纖連蛋白、層黏連蛋白、膠原蛋白IV等），結(jié)果顯示，rTp0136蛋白與纖連蛋白、層粘連蛋白、超纖連蛋白發(fā)生黏附反應(yīng)且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而對(duì)照組（以不相關(guān)蛋白為探針）反應(yīng)較弱。在Tp0136蛋白的免疫原性方面，用rTp0136蛋白感染實(shí)驗(yàn)兔模型14 d后兔血清中即出現(xiàn)rTp0136抗體，在感染90 d后抗體濃度開(kāi)始輕微下降，這些研究提示rTp0136抗體對(duì)早期診斷Tp感染有重要價(jià)值。在免疫保護(hù)方面，rTp0136抗體能延遲皮損出現(xiàn)的時(shí)間，減輕皮損的損害，但不能阻止Tp感染。另外，用rTp0136蛋白為包被抗原的間接ELISA方法檢測(cè)一期梅毒、二期梅毒和早期潛伏梅毒患者血清中抗rTp0136抗體，同時(shí)對(duì)照組以不相關(guān)蛋白為包被抗原，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比rTp0136實(shí)驗(yàn)組免疫反應(yīng)很強(qiáng)，表明rTp0136蛋白能在感染宿主內(nèi)引起較強(qiáng)的特異性抗體免疫應(yīng)答。rTp0136蛋白有望成為早期診斷Tp感染和研制梅毒疫苗的候選抗原之一。

3 Tp0453

3.1 Tp0453基因和氨基酸序列特點(diǎn)：Tp0453基因全長(zhǎng)864 bp，編碼287個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量為31 979。Tp0453蛋白是一個(gè)具有兩親性的整合外膜蛋白，預(yù)測(cè)包含 5 個(gè) α 螺旋［13］。Luthra 等［14］研究發(fā)現(xiàn)，TP0453結(jié)構(gòu)為球形，在高濃度的非離子洗潔劑存在時(shí)由閉合狀態(tài)轉(zhuǎn)為開(kāi)放，從而暴露大量疏水基團(tuán)，用鋱-吡啶二羧酸配合物負(fù)載大單層囊泡（terbium-dipicolinic acid complex-loaded large unilamellar vesicles）法證實(shí)在酸性條件下，該蛋白具有增強(qiáng)熒光團(tuán)流出的能力。還驗(yàn)證了TP0453含多種α螺旋，但是僅有相鄰的兩個(gè)α螺旋對(duì)膜整合有重要作用。革蘭陰性細(xì)菌的外膜蛋白含有大量β折疊結(jié)構(gòu)參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸。然而，Hazlett等［13］發(fā)現(xiàn)，Tp0453缺乏β折疊結(jié)構(gòu)，含有多種穿膜的兩親性α螺旋結(jié)構(gòu)，在此基礎(chǔ)上推測(cè)，TP0453存在于嵌入外膜蛋白和未嵌入形式的動(dòng)態(tài)平衡中，α螺旋在插入外膜蛋白瞬間促進(jìn)水溶性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入，可能為TP0453在Tp攝取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)機(jī)制之一。此外，Tp0453形成一個(gè)穩(wěn)定的二聚體嵌入膜內(nèi)，這個(gè)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和結(jié)核分枝桿菌的脂蛋白相似［15-16］，推測(cè)TP0453蛋白在TP外膜蛋白可能充作運(yùn)載脂質(zhì)，糖脂等功能。

3.2 Tp0453蛋白的免疫原性和免疫保護(hù)作用：Van Voorhis等［17］分別用重組 Tp0453、Tp92 蛋白包為被抗原，ELISA法檢測(cè)一期、二期梅毒及早期潛伏梅毒患者血清抗體，從而發(fā)現(xiàn)，rTp0453與各期梅毒患者（共43例）血清均發(fā)生免疫反應(yīng)。以同樣方法檢測(cè)鉤端螺旋體?。?例）、回歸熱（8例）、萊姆?。?例）患者血清，rTp0453與全部患者血清無(wú)免疫反應(yīng)，因此，rTp0453的靈敏度和特異度均比較高。此外，Tp0453能與性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)陰性的早期梅毒患者血清發(fā)生免疫反應(yīng)。Tp0453能與性病研究實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)陰性的早期梅毒患者血清發(fā)生免疫反應(yīng)，對(duì)早期梅毒具有診斷意義。

Smith等［18］通過(guò) pET28a表達(dá)載體轉(zhuǎn)載氨基酸序列A32-S287至大腸桿菌內(nèi)產(chǎn)生可溶性rTp0453蛋白，用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳分析法檢測(cè)其純度＞98%。以可溶性rTp0453為包被抗原，用ELIAS法檢測(cè)169例各期梅毒患者血清，其靈敏性為98%。同法檢測(cè)21例假陽(yáng)性和38例交叉反應(yīng)感染者（鉤端螺旋體，伯氏疏螺旋體，幽門螺旋桿菌等）血清，可溶rTp0453蛋白均無(wú)免疫反應(yīng)，其特異性100%。這些研究表明，Tp0453作為梅毒特異性診斷候選抗原檢測(cè)各期梅毒更具有精確性，可降低誤診率，對(duì)早期隱性梅毒血清學(xué)診斷具有重要意義。

4 Tp1038（TpF1）

4.1 Tp1038基因和氨基酸序列特點(diǎn)：Tp1038基因全長(zhǎng)534 bp，編碼177個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量19 361。TpF1蛋白是一個(gè)由二硫鍵連接的12個(gè)相同單元體形成環(huán)狀穩(wěn)定的寡聚蛋白質(zhì)，歸類為DNA結(jié)合蛋白家族，其功能是螯合鐵離子，保護(hù)DNA免受氧化性損傷，具有氧化鐵酶作用［19］。

4.2 Tp1038蛋白的免疫原性和免疫調(diào)節(jié)：Jiang等［20］用pET28a-TpF1原核表達(dá)載體，在E.coliBL21中表達(dá)出重組蛋白TpF1，rTpF1免疫兔能誘導(dǎo)產(chǎn)生高效價(jià)的特異性抗體，表明重組蛋白TpF1具有較強(qiáng)的免疫原性。用rTpF1作為包被抗原間接法ELISA檢測(cè)各期梅毒血清，敏感性和特異性分別為98%和100%，而且與8例快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)陰性的梅毒患者血清發(fā)生免疫反應(yīng)。因此，重組蛋白TpF1有望成為用以篩查梅毒的商業(yè)化酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定候選抗原之一。

在免疫調(diào)節(jié)方面，rTpF1既能誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，也能間接促進(jìn)抗炎的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化［21］。rTpF1刺激單核細(xì)胞合成和釋放腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6、白細(xì)胞介素1β等炎癥因子，有利于對(duì)Tp清除。同時(shí)，rTpF1又能刺激單核細(xì)胞釋放IL-10和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β，這兩種細(xì)胞因子促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分化，從而促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的反應(yīng)。這可能是Tp發(fā)生免疫逃逸長(zhǎng)期感染機(jī)體的機(jī)制之一。

5 結(jié)語(yǔ)

Tp的重組膜蛋白具有低表達(dá)，易碎性。雖然分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展較快，但是這些技術(shù)對(duì)Tp膜蛋白檢測(cè)的靈敏性不高。因此，提取完整膜蛋白較困難，限制了對(duì)外膜蛋白的研究。然而，通過(guò)對(duì)這些膜蛋白的深入研究，Tp蛋白結(jié)構(gòu)功能日益明確，選取具有較好免疫保護(hù)作用和免疫原性的Tp膜蛋白可作為梅毒診斷方法和研制Tp疫苗的備選抗原，為Tp的致病機(jī)制、診斷方法和疫苗研究帶來(lái)新的契機(jī)。

［1］Centurion-Lara A,Giacani L,Godornes C,et al.Fine analysis of genetic diversity of the tpr gene family among treponemal species,subspecies and strains ［J/OL］.PLoS Negl Trop Dis,2013,7 （5）:e2222 ［2013-05-16］.http://journals.plos.org/plosntds/article?id=10.1371/journal.pntd.0002222.

［2］Giacani L,Brandt SL,Puray-Chavez M,et al.Comparative investigation of the genomic regionsinvolved in antigenic variation ofthe TprK antigen among treponemalspecies,subspecies,and strains ［J］.J Bacteriol,2012,194 （16）:4208-4225.

［3］Giacani L,Molini BJ,Kim EY,et al.Antigenic variation in Treponema pallidum:TprK sequence diversity accumulates in response to immune pressure during experimental syphilis ［J］.J Immunol,2010,184（7）:3822-2829.

［4］Dickerson MT,Abney MB,Cameron CE,et al.Fibronectin binding to theTreponema pallidumadhesin protein fragment rTp0483 on functionalized self-assembled monolayers ［J］.Bioconjug Chem,2012,23（2）:184-195.

［5］Cameron CE,Lukehart SA,Castro C,et al.Opsonic potential,protective capacity,and sequence conservation of theTreponema pallidumsubspecies pallidum Tp92 ［J］.J Infect Dis,2000,181（4）:1401-1413.

［6］ Tommassen J.Assembly of outer-membrane proteins in bacteria and mitochondria ［J］.Microbiology,2010,156 （Pt 9）:2587-2596.

［7］Desrosiers DC,Anand A,Luthra A,et al.TP0326,a Treponema pallidum β-barrel assembly machinery A （BamA）orthologue and rare outer membrane protein ［J］.Mol Microbiol,2011,80（6）:1496-1515.

［8］Brinkman MB,McGill MA,Pettersson J,et al.A novel Treponema pallidumantigen,TP0136,is an outer membrane protein that binds human fibronectin［J］.Infect Immun,2008,76（5）:1848-1857.

［9］Cullen PA,Haake DA,Adler B.Outer membrane proteins of pathogenic spirochetes ［J］.FEMS Microbiol Rev,2004,28（3）:291-318.

［10］ Strouhal M,Smajs D,Matejková P,et al.Genome differences betweenTreponema pallidumsubsp.pallidumstrainNicholsand T.paraluiscuniculistrain Cuniculi A［J］.Infect Immun,2007,75（12）:5859-5866.

［11］Mikalová L,Pospí?ilová P,Woznicová V,et al.Comparison of CDC and sequence-based molecular typing of syphilis treponemes:tpr and arp loci are variable in multiple samples from the same patient［J］.BMC Microbiol,2013,13:178.

［12］Flasarová M,Pospí?ilová P,Mikalová L,et al.Sequencing-based molecular typing of treponema pallidum strains in the Czech Republic:all identified genotypes are related to the sequence of the SS14 strain［J］.Acta Derm Venereol,2012,92（6）:669-674.

［13］Hazlett KR,Cox DL,Decaffmeyer M,TP0453,a concealed outer membrane protein ofTreponema pallidum,enhances membrane permeability［J］.J Bacteriol,2005,187（18）:6499-6508.

［14］Luthra A,Zhu G,Desrosiers DC,et al.The transition from closed to open conformation ofTreponema pallidumouter membraneassociated lipoprotein TP0453 involves membrane sensing and integration by two amphipathic helices ［J］.J Biol Chem,2011,286（48）:41656-4168.

［15］ Drage MG,Tsai HC,Pecora ND,et al.Mycobacterium tuberculosis lipoprotein LprG （Rv1411c） binds triacylated glycolipid agonists of Toll-like receptor 2 ［J］.Nat Struct Mol Biol,2010,17（9）:1088-1095.

［16］ Brülle JK,Tschumi A,Sander P.Lipoproteins of slow-growing Mycobacteria carrythree fatty acids and are N-acylated by apolipoprotein N-acyltransferase BCG_2070c ［J］. BMC Microbiol,2013,13:223.

［17］Van Voorhis WC,Barrett LK,Lukehart SA,et al.Serodiagnosis of syphilis:antibodies to recombinant Tp0453,Tp92,and Gpd proteins are sensitive and specific indicators of infection by Treponema pallidum ［J］.J Clin Microbiol,2003,41 （8）:3668-3674.

［18］ Smith BC,Simpson Y,Morshed MG,et al.New proteins for a new perspective on syphilis diagnosis［J］.J Clin Microbiol,2013,51（1）:105-111.

［19］ Haikarainen T,Papageorgiou AC.Dps-like proteins:structural and functional insights into a versatile protein family ［J］.Cell Mol Life Sci,2010,67（3）:341-351.

［20］ Jiang C,Zhao F,Xiao J,et al.Evaluation of the recombinant protein TpF1 ofTreponema pallidumfor serodiagnosis of syphilis［J］.Clin Vaccine Immunol,2013,20（10）:1563-1568.

［21］ Babolin C,Amedei A,Ozolins D,et al.TpF1 fromTreponema pallidumactivates inflammasome and promotes the development of regulatory T cells［J］.J Immunol,2011,187（3）:1377-1384.

提高梅毒檢測(cè)準(zhǔn)確性 輔助指導(dǎo)臨床實(shí)踐

在東方檢驗(yàn)?zāi)陼?huì)期間舉行的“羅氏診斷衛(wèi)星會(huì)——新一代Elecsys?Syphilis梅毒免疫檢測(cè)試劑中國(guó)多中心研究分享學(xué)術(shù)會(huì)議”上，南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院潘世揚(yáng)教授和復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院潘柏申教授分享了新一代Elecsys?Syphilis梅毒免疫檢測(cè)性能比對(duì)中國(guó)多中心研究進(jìn)展，并深入討論Elecsys?Syphilis梅毒免疫檢測(cè)在中國(guó)人群的循證依據(jù)，旨在輔助指導(dǎo)臨床實(shí)踐，提高患者生存質(zhì)量。潘柏申教授指出：“盡早進(jìn)行梅毒篩查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并切斷梅毒傳染源非常重要，尤其要加強(qiáng)HIV患者、男男性行為者、靜脈注射吸毒者、性工作者及相關(guān)孕婦等高危人群的篩查?！痹缙谠\斷、及早治療和預(yù)防、可有效降低梅毒長(zhǎng)期并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)，降低死胎和先天性梅毒風(fēng)險(xiǎn)以及傳播風(fēng)險(xiǎn)，極大減輕梅毒帶來(lái)的家庭、社會(huì)和國(guó)家負(fù)擔(dān)。

由于大多數(shù)梅毒感染者早期無(wú)癥狀，血清學(xué)檢測(cè)是主要的實(shí)驗(yàn)室梅毒檢測(cè)方法，包括非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)。國(guó)際上，許多實(shí)驗(yàn)室已使用自動(dòng)化梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)進(jìn)行大樣本量的篩查，用非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)做確認(rèn)。作為梅毒螺旋體抗原反向檢測(cè)的新成員與有力補(bǔ)充，Elecsys?Syphilis梅毒免疫檢測(cè)已于2014年8月正式在中國(guó)獲批上市，通過(guò)檢測(cè)梅毒螺旋體總抗體，在常規(guī)臨床篩查中發(fā)現(xiàn)梅毒患者，并有效檢測(cè)出不同分期的梅毒感染。為在自然條件下比較Elecsys?Syphilis梅毒檢測(cè)試劑與已上市的其他方法學(xué)梅毒檢測(cè)試劑的靈敏度與特異性，四川大學(xué)華西醫(yī)院聯(lián)合全國(guó)16家醫(yī)院共同開(kāi)展了“羅氏診斷新一代Elecsys?Syphilis梅毒免疫檢測(cè)試劑性能比對(duì)多中心研究”。中期研究結(jié)果顯示，Elecsys?Syphilis梅毒檢測(cè)試劑具有優(yōu)良的靈敏度和特異度，其完整的最終數(shù)據(jù)會(huì)帶來(lái)更有力的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。由多個(gè)國(guó)家參與的CE認(rèn)證（歐盟統(tǒng)一認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)）研究、批間比較研究以及EAP（Expedited Access Pathway，美國(guó)FDA快速通道項(xiàng)目研究）上市后研究也對(duì)Elecsys?Syphilis梅毒檢測(cè)試劑的性能進(jìn)行了多中心評(píng)估。潘世揚(yáng)教授指出：“對(duì)2 832份樣本進(jìn)行篩查發(fā)現(xiàn)，其陰性結(jié)果與陽(yáng)性結(jié)果之間具有明確的截?cái)嘀担╟ut-off），無(wú)灰區(qū)，可幫助臨床迅速?zèng)Q策，減少重復(fù)檢測(cè)次數(shù)，使結(jié)果解讀更為明確?！?/p>

Progress in some membrane proteins ofTreponema pallidum

Zhang Sufang*,Zhou Pingyu.*Shanghai Skin Disease Clinical College,Anhui Medical University,Shanghai 200050,China

Syphilis,a chronic sexually transmitted disease caused byTreponema pallidum （Tp）,can affect multiple organs.At present,Tp can not been culturedin vitrofor a long time and is difficult to obtain,which has hampered the exploration into the pathogenesis of syphilis,optimization of syphilis diagnosis and treatment,and development of syphilis vaccines.The identification of complete genome sequence of Tp,successful expressions of some important membrane proteins such as TprK,Tp0483 and Tp0155,and in-depth study of the structural characteristics,antigenicity and immunoprotective effect of these membrane proteins have provided the basis for and possibility of investigating into the pathogenesis of,optimizing the diagnosis and treatment of,and developing vaccines for,syphilis.The authors summarize recent advances in some major membrane proteins of Tp with diagnostic value and immunoprotective effect.

Syphilis;Treponema pallidum;Outer membrane proteins;Vaccines;Immunity;Antigenic variation

Zhou Pingyu,Email:zpyls@yahoo.com

10.3760/cma.j.issn.1673-4173.2015.03.019

國(guó)家自然科學(xué)基金（81371862）

200050上海，安徽醫(yī)科大學(xué)上海市皮膚病臨床學(xué)院（張素芳）；上海市皮膚病醫(yī)院性病科（周平玉）

周平玉，Email:zpyls@yahoo.com

2014-05-27）