林潔 許愛娥

調(diào)節(jié)性B細胞在幾種免疫性皮膚病的作用

林潔 許愛娥

調(diào)節(jié)性T細胞在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病、自身免疫性大皰病等疾病的發(fā)病機制中研究很多，隨著在人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)分泌白細胞介素10的調(diào)節(jié)性B細胞，人們發(fā)現(xiàn)分泌白細胞介素10的調(diào)節(jié)性B細胞和其分泌的白細胞介素10有負向免疫調(diào)節(jié)作用，對疾病有保護作用。許多研究表明，在這些疾病中，分泌白細胞介素10的調(diào)節(jié)性B細胞的數(shù)量、功能和其分泌的白細胞介素10水平存在異常，認為這些異常與疾病的發(fā)病和病情有關(guān)。

T淋巴細胞，調(diào)節(jié)性；B淋巴細胞；免疫調(diào)節(jié)；皮膚疾病；銀屑病；類天皰瘡，大皰性

參與免疫調(diào)節(jié)的免疫細胞主要有T淋巴細胞和B淋巴細胞，其免疫調(diào)節(jié)作用被人們廣泛研究，且既有正向免疫功能又有負向免疫功能，其中調(diào)節(jié)性T細胞的負向調(diào)節(jié)功能一直是人們研究的熱點，其相關(guān)研究很多，但是目前有關(guān)調(diào)節(jié)性B細胞（Bregs）的研究還比較少。過去人們認為B細胞作為免疫活性細胞的作用主要是產(chǎn)生抗原特異性抗體、作為抗原提呈細胞提呈抗原、分泌免疫調(diào)節(jié)因子來發(fā)揮其正向免疫調(diào)節(jié)作用。

近期研究表明，人體內(nèi)存在一種通過分泌調(diào)節(jié)性的細胞因子白細胞介素（IL）10和轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）β 發(fā)揮負向免疫作用的 B 細胞［1］，這種 B 細胞被稱為調(diào)節(jié)性B細胞，目前，在免疫性皮膚病如SLE、銀屑病、自身免疫免疫性大皰病的患者體內(nèi)均發(fā)現(xiàn)Bregs 細胞的存在。

1 調(diào)節(jié)性B細胞的近期研究

1.1 調(diào)節(jié)性B細胞的來源和種類：1996年，Janeway等首次在實驗性自身免疫性腦脊髓炎中發(fā)現(xiàn)了具有抑制功能的B細胞。1997年，Bhan等在慢性結(jié)腸炎中發(fā)現(xiàn)B細胞能抑制T細胞介導的炎癥反應(yīng)，并首次提出“調(diào)節(jié)性B細胞”的概念，即一類不依賴于分泌免疫球蛋白且具有免疫調(diào)節(jié)功能的B細胞亞群。B細胞分為兩個主要的細胞亞群：B1細胞，主要存在于黏膜組織、胸腔和腹腔等；B2細胞，主要存在于次級淋巴器官。Bl細胞又可分為B1a細胞（CD11b+CD5+）和 B1b 細胞（CD11b+CD5-）；而 B2 細胞又分為不成熟過度型B細胞和成熟濾泡B細胞或者邊緣區(qū)B細胞。在Bla和邊緣區(qū)B細胞系里已經(jīng)證實了有調(diào)節(jié)性B細胞的存在。目前，在人體內(nèi)主要發(fā)現(xiàn)了3種類型的調(diào)節(jié)性B細胞：產(chǎn)生IL-10的Br1細胞、產(chǎn)生TGF-β的Br3細胞和產(chǎn)生Foxp3+的B細胞。Br1細胞，又稱為B10細胞，主要存在于脾臟和腹腔中，通過分泌IL-10在機體內(nèi)發(fā)揮負向免疫調(diào)節(jié)作用，目前認為沒有統(tǒng)一的表面標記物［2］，存在多種表型，如 CD19+CD27-，CD19+CD1dhi，CD19+CD24hiCD38hi。在杜克大學的研究中認為，Bregs的表型更集中在CD19+CD24hiCD27+這群細胞。野生小鼠脾臟中發(fā)現(xiàn)表型為CD5+CD1dhiCD19+的B細胞能產(chǎn)生IL-10。體外研究證明，其能通過繼承性轉(zhuǎn)移分化成為產(chǎn)生IL-10的B細胞［1，3］。目前對于Br3細胞的研究比較少，Lee等的研究認為，表型為CD19+CD5+的調(diào)節(jié)性B細胞，其作用可能是在對牛奶過敏的變態(tài)反應(yīng)中，通過產(chǎn)生TGF-β發(fā)揮負性免疫調(diào)節(jié)作用，使其對過敏反應(yīng)發(fā)生耐受［4］。在 Noh 等［5］研究首次報道了表型為CD19＋CD5＋Foxp3＋的調(diào)節(jié)性B細胞，產(chǎn)生Foxp3+的B細胞，其被認為存在于人外周血單個核細胞中，其特點是其凋亡率遠高于其他亞型的B細胞。

1.2 B10細胞在免疫過程中的作用：B10通過分泌細胞因子和細胞間接觸的方式來抑制自身免疫性炎癥的發(fā)生。B10細胞介導免疫抑制的主要方式是分泌IL-10，其能抑制巨噬細胞和T細胞復制及分泌細胞因子如IL-1、IL-6和IL-12等；還能通過減少細胞表面MHCⅡ類分子的表達和下調(diào)腫瘤壞死因子（TNF）等細胞因子的表達來抑制免疫應(yīng)答［6］，研究表明，B10細胞分泌的IL-10同時也能反過來促進B10細胞的增殖［7］，形成了一個正反饋，使其介導的免疫抑制作用增強。B10細胞在免疫過程中還有維持Tregs與Th1/Th17細胞的平衡；抑制樹突細胞的抗原提呈能力［8］；直接抑制自然殺傷細胞、調(diào)節(jié)性T細胞的活性；分泌TGF-β，誘導效應(yīng)T細胞等的凋亡；產(chǎn)生抗體，中和有害的可溶性因子等作用。在體外實驗中顯示，B10細胞能抑制IFN-γ和TNF-α的反應(yīng)［9］。同樣還發(fā)現(xiàn)，B10細胞有促進調(diào)節(jié)性T細胞的增殖和維持其聚集作用［10］，所調(diào)節(jié)性T細胞分泌的IL-10能促進B10細胞增殖，因此，B10細胞和調(diào)節(jié)性T細胞有協(xié)同作用。

2 B10細胞在幾種免疫性皮膚病中的作用

2.1 B10細胞對SLE的作用：SLE是一種典型的自身免疫性結(jié)締組織疾病，其特點是產(chǎn)生自身抗體，并與自身抗原形成免疫復合物沉積在各個器官血管的基底膜上，導致炎癥和細胞的損傷。Th1和Th2型細胞因子對SLE的發(fā)病均有重要的作用。以往在對SLE患者進行研究時，發(fā)現(xiàn)健康人體內(nèi)存在依賴于IL-10發(fā)揮負向免疫調(diào)節(jié)功能的調(diào)節(jié)性B細胞亞群的存在，其表型為CD19+CD24hiCD38hi，即B10細胞，其通過分泌IL-10來抑制Th1細胞和Th2細胞的增殖、分化，抑制CD4+T細胞產(chǎn)生IFN-γ和TNF-α，抑制炎癥的發(fā)生并在 SLE 發(fā)病中起保護作用［1，9］；同時B10細胞分泌的IL-10能通過刺激SLE患者體內(nèi)產(chǎn)生抗dsDNA抗體，抗dsDNA抗體又能反過來促進IL-10的分泌，IL-10抑制Th1型細胞因子如IL-2、IFN-γ、TNF-α等的合成抑制炎癥。通過這幾種作用B10細胞發(fā)揮其負性調(diào)節(jié)作用。有研究顯示，在SLE患者體內(nèi)B10細胞數(shù)量未見異常，但其對T細胞應(yīng)答的抑制能力減弱，說明SLE患者體內(nèi)B10細胞功能存在缺陷。目前多數(shù)研究表明，SLE患者血清中IL-10的水平高于健康人，而且其水平的高低與疾病的活動程度相關(guān)［11］。以往有學者認為，IL-10在疾病形成早期，作為一種保護性因子，發(fā)揮抗炎作用，但疾病形成后，其參與炎癥損傷，成為致病因子，故認為抗IL-10單抗或IL-10阻斷劑治療SLE，但最新研究表明，發(fā)揮保護作用的是B10細胞，而發(fā)揮致病作用的是效應(yīng)B細胞［12］。

2.2 B10細胞對自身免疫性皰病的作用：自身免疫性大皰病是一組自身抗體作用于表皮基底層上的橋粒芯蛋白3而引起棘層松解，發(fā)生在皮膚黏膜，以水皰、大皰為基本皮膚損害的皮膚病。尋常型天皰瘡（PV）和大皰性類天皰瘡（BP）是最常見的自身免疫性大皰病。對于PV，以往認為主要是CD4+T細胞作用于B細胞誘導和調(diào)節(jié)B細胞產(chǎn)生自身抗體，CD4+Th1細胞作用于B細胞產(chǎn)生IgG1，CD4+Th2細胞作用于B細胞產(chǎn)生IgG4、IgA和 IgE［13］。近期研究表明，CD8+T細胞可能通過Fas-FasL信號途徑參與到PV的發(fā)病機制中［14］。對于BP，目前認為，自體反應(yīng)的Th細胞和調(diào)節(jié)性T細胞之間失衡、Toll樣受體活化作用、Th17/IL-17途徑是促發(fā)BP的3大免疫機制［15］。早在2000年時就證明，在CD28-缺陷的PV小鼠模型中，小鼠體內(nèi)IL-10 mRNA水平明顯低于健康對照組，并且T細胞通過產(chǎn)生抗炎細胞因子IL-10在棘層松解中起到主要的抑制作用［16］。近年研究認為，BP患者血清中IL-10水平與健康人相比，差異無統(tǒng)計學意義，但經(jīng)過治療后的BP患者血清中IL-10水平明顯升高［17］。這些均表明，IL-10的水平與BP的疾病活性有關(guān)。研究證實，BP和PV患者體內(nèi)存在主要的表面標記為CD19+CD24hiCD27+的調(diào)節(jié)性B細胞亞群。

2.3 B10細胞對銀屑病的作用：銀屑病是一種免疫調(diào)節(jié)功能失衡相關(guān)的疾病，機體內(nèi)許多免疫細胞均參與其發(fā)病過程，如樹突細胞、角質(zhì)形成細胞、T淋巴細胞，目前認為，CD4+T細胞是其發(fā)病的核心機制。尋常性銀屑病患者外周血中CD4+CD25+Treg數(shù)目和功能的異?？赡軐е耇h1細胞失去抑制而過度活化，從而釋放IFN-γ和IL-2等細胞因子誘發(fā)銀屑病的免疫病理進程，CD4+CD25+Treg數(shù)量異常和功能障礙是重要原因之一。有作者報告，應(yīng)用立普妥單抗和靜脈滴注丙種球蛋白治療免疫性血小板減少癥時引起手和指甲銀屑病，認為是B10細胞減少導致T細胞過度激活而引發(fā)銀屑?。?8］。Yanaba等［19］認為，調(diào)節(jié)性B細胞在銀屑病發(fā)病機制中作用是明顯大于效應(yīng)性B細胞。銀屑病患者血中B10細胞數(shù)明顯低于健康人，IL-10也是低于健康人。目前證實，B10細胞在CD40途徑和Toll樣受體9的途徑下不存在明確發(fā)育障礙，說明銀屑病患者B10細胞數(shù)量和功能均有異常。

2.4 B10細胞對特應(yīng)性皮炎（AD）的作用：AD是一種常見疾病，90%患者在5歲前發(fā)病，患者常有皮膚干燥，對刺激物和蛋白變應(yīng)原易感性。在早期的研究中表明，嚴重的AD患者外周血中，CD4+T細胞產(chǎn)生的IL-10水平明顯低于輕度AD以及健康人水平，IL-10可能起到免疫抑制作用［20］。目前這一觀點得到廣泛認可，在AD中有關(guān)調(diào)節(jié)性B細胞的研究較少，目前發(fā)現(xiàn)在非IgE介導的食物過敏性AD中，B10和 Br3在誘導免疫耐受中發(fā)揮作用［21-22］。研究表明，B10細胞在AD中明顯減少，其凋亡率遠高于T細胞［21］，在急性AD中IL-10較健康人明顯減少，并且在慢性期的AD中IL-10的水平較急性期時更低［23］。

3 B10在其他疾病中的作用

除了以上幾種免疫性皮膚疾病外，B10細胞還在多種疾病中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用，如多發(fā)性硬化、器官移植［24］、蠕蟲感染、李斯特菌感染［25］、乙型肝炎病毒感染、Ⅰ型糖尿病等疾病中均有相關(guān)研究。

白癜風是一種色素脫失疾病，其發(fā)病機制復雜，如自身免疫、氧化應(yīng)激等。目前證實，調(diào)節(jié)性T細胞在其發(fā)病機制中有重要作用，特別是CD8+T細胞，其通過細胞毒性作用針對黑素細胞自身抗原持續(xù)性殺傷黑素細胞，導致黑素細胞的破壞和凋亡，從而引起白癜風的出現(xiàn)，同時細胞因子及受體在自身免疫反應(yīng)中有調(diào)節(jié)或促進作用。

在實驗研究表明，白癜風患者外周血中IL-10的水平與健康人無差異，但是在白斑及白斑周圍的皮膚中，IL-10則明顯高于健康對照組［26］。局部使用他克莫司可以有效地治療白癜風，實驗證實，使用過他克莫司的白斑處IL-10水平明顯高于未使用處和正常皮膚處［27］。

4 結(jié)語

B10細胞和其分泌的IL-10均具有負向免疫調(diào)節(jié)功能，對疾病有保護作用。在銀屑病、SLE、艾滋病中，B10細胞數(shù)量或和分泌IL-10的功能存在異常，這些異常與疾病的發(fā)生和病情的嚴重程度相關(guān)，但導致B10細胞數(shù)量和功能異常的確切機制尚未明確。目前有關(guān)B10細胞在皮膚免疫性疾病的研究主要集中在銀屑病、SLE、艾滋病中，其他皮膚病發(fā)病機制是否與B10細胞數(shù)量和功能異常有關(guān)？何種途徑活化B10細胞發(fā)揮功能？這些問題尚待進一步研究。

［1］Ries S,Hilgenberg E,Lampropoulou V,et al.B-type suppression:a role played by “regulatory B cells” or “regulatory plasma cells”?［J］.Eur J Immunol,2014,44（5）:1251-1257.

［2］Kalampokis I,Yoshizaki A,Tedder TF.IL-10-producing regulatory B cells （B10 cells） in autoimmune disease ［J］.Arthritis Res Ther,2013,15（ Suppl 1）:S1.

［3］Yanaba K,Bouaziz JD,Haas KM,et al.A regulatory B cell subset with a unique CD1dhiCD5+phenotype controls T celldependent inflammatory responses ［J］.Immunity,2008,28（5）:639-650.

［4］Lee JH,Noh J,Noh G,et al.Allergen-specific transforming growth factor-β-producing CD19+CD5+regulatory B-cell （Br3）responses in human late eczematous allergic reactions to cow′s milk［J］.J Interferon Cytokine Res,2011,31（5）:441-449.

［5］Noh J,Choi WS,Noh G，et al.Presence of foxp3-expressing CD19+CD5+B cells in human peripheral blood mononuclear cells:human CD19+CD5+Foxp3+regulatory B cell （Breg）［J］.Immune Netw,2010,10（6）:247-249.

［6］Unterberger C,Staples KJ,Smallie T,et al.Role of STAT3 in glucocorticoid-induced expression of the human IL-10 gene［J］.Mol Immunol,2008,45（11）:3230-3237.

［7］Jin G,Hamaguchi Y,Matsushita T,et al.B-cell linker protein expression contributes to controlling allergic and autoimmune diseases by mediating IL-10 production in regulatory B cells［J］.J Allergy Clin Immunol,2013,131（6）:1674-1682.

［8］Mauri C,Bosma A.Immune regulatory function of B cells［J］.Annu Rev Immunol,2012,30:221-241.

［9］Sang A,Zheng YY,Morel L.Contributions of B cells to lupus pathogenesis［J］.Mol Immunol,2014,62（2）:329-338.

［10］Watanabe R,Ishiura N,Nakashima H,et al.Regulatory B cells（B10 cells） have a suppressive role in murine lupus:CD19 and B10 cell deficiency exacerbates systemic autoimmunity ［J］.J Immunol,2010,184（9）:4801-4809.

［11］Peng H,Wang W,Zhou M,et al.Role of interleukin-10 and interleukin-10 receptor in systemic lupus erythematosus［J］.Clin Rheumatol,2013,32（9）:1255-1266.

［12］Haas KM,Watanabe R,Matsushita T,et al.Protective and pathogenic roles for B cells during systemic autoimmunity in NZB/W F mice［J］.J Immunol,2010,184（9）:4789-4800.

［13］ Takahashi H,Amagai M,Tanikawa A,et al.T helper type 2-biased natural killer cell phenotype in patients with pemphigus vulgaris［J］.J Invest Dermatol,2007,127（2）:324-330.

［14］Giurdanella F,Fania L,Gnarra M,et al.A possible role for CD8+T lymphocytes in the cell-mediated pathogenesis of pemphigus vulgaris［J］.Mediators Inflamm,2013,2013:764290.

［15］Lo Schiavo A,Ruocco E,Brancaccio G,et al.Bullous pemphigoid:etiology,pathogenesis,and inducing factors:facts and controversies［J］.Clin Dermatol,2013,31（4）:391-399.

［16］Toto P,Feliciani C,Amerio P,et al.Immune modulation in pemphigus vulgaris:role of CD28 and IL-10 ［J］.J Immunol,2000,164（1）:522-529.

［17］Antiga E,Quaglino P,Volpi W,et al.Regulatory T cells in skin lesions and blood of patients with bullous pemphigoid ［J/OL］.J Eur Acad Dermatol Venereol,2013 ［2014-01-10］. ［published online ahead of print Jan 18,2013］.

［18］Darabi K,Jaiswal R,Hostetler SG,et al.A new kid on the block:IL-10+regulatory B cells and a possible role in psoriasis［J］.J Pediatr Pharmacol Ther,2009,14（3）:148-153.

［19］Yanaba K,Kamata M,Ishiura N,et al.Regulatory B cells suppress imiquimod-induced,psoriasis-like skin inflammation［J］.J Leukoc Biol,2013,94（4）:563-573.

［20］Seneviratne SL,Jones L,Bailey AS,et al.Severe atopic dermatitis is associated with a reduced frequency of IL-10 producing allergen-specific CD4+T cells［J］.Clin Exp Dermatol,2006,31（5）:689-694.

［21］Noh G,Lee JH.Regulatory B cells and allergic diseases［J］.Allergy Asthma Immunol Res,2011,3（3）:168-177.

［22］Vadasz Z,Haj T,Toubi E.The role of B regulatory cells and Semaphorin3A in atopic diseases［J］.Int Arch Allergy Immunol，2014，163（4）:245-51.

［23］ Vakirlis E,Lazaridou E,Tzellos TG,et al.Investigation of cytokine levels and their association with SCORAD index in adults with acute atopic dermatitis ［J］.J Eur Acad Dermatol Venereol,2011,25（4）:409-416.

［24］Coelho V,Saitovitch D,Kalil J,et al.Rethinking the multiple roles of B cells in organ transplantation ［J］.Curr Opin Organ Transplant,2013,18（1）:13-21.

［25］ Horikawa M,Weimer ET,DiLillo DJ,et al.Regulatory B cell（B10 Cell） expansion during Listeria infection governs innate and cellular immune responses in mice ［J］.J Immunol,2013,190（3）:1158-1168.

［26］Basak PY,Adiloglu AK,Ceyhan AM,et al.The role of helper and regulatory T cells in the pathogenesis of vitiligo ［J］.J Am Acad Dermatol,2009,60（2）:256-260.

［27］Taher ZA,Lauzon G,Maguiness S,et al.Analysis of interleukin-10 levels in lesions of vitiligo following treatment with topical tacrolimus［J］.Br J Dermatol,2009,161（3）:654-659.

第六屆全國深部真菌感染學術(shù)會議征文通知

全國深部真菌感染學術(shù)會議是由感染、呼吸、血液、皮膚、重癥醫(yī)學等多學科權(quán)威專家于2005年共同組織發(fā)起的，旨在為深部真菌研究人員提供一個溝通和交流的平臺，真正實現(xiàn)多學科協(xié)作與交流。第六屆會議定于2015年11月27-29日在安徽合肥召開，由國家衛(wèi)生計生委醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展研究中心主辦。會議將邀請國內(nèi)外知名專家就深部真菌感染的流行病學、臨床診治以及病案討論等最新研究成果展開交流與討論。同時歡迎從事相關(guān)研究的學者踴躍投稿參會。

征文內(nèi)容：①深部真菌感染的病原學、流行病學、組織病理學、發(fā)病機制等基礎(chǔ)研究；②深部真菌感染的診斷學，包括實驗室診斷和影像學診斷；③深部真菌感染的臨床診治研究；④抗真菌藥物研究；⑤典型病例討論。

征文要求：投稿請?zhí)峁┱撐恼?，?yīng)包括研究目的、材料和方法、結(jié)果、結(jié)論，字數(shù)400～800字。截稿日期：2015年9月30日。

論文評審：組委會邀請權(quán)威專家對論文進行評審，優(yōu)秀論文將頒發(fā)獲獎證書并給予一定的獎勵，部分優(yōu)秀論文可推薦至相關(guān)專業(yè)雜志發(fā)表。

會議注冊及學分：參會代表可授予國家級繼續(xù)醫(yī)學教育項目Ⅰ類學分10分。

投稿郵箱：sbzj2015@163.com，官方微信號：fungalinfection，聯(lián)系人：馬立英，電話/傳真：010-65041809/65005315。

《皮膚美容化妝品制劑手冊》第2版郵購消息

《皮膚美容化妝品制劑手冊》由馬振友主編，2015年1月中醫(yī)古籍出版社出版，大32開，768頁，精裝。該書詳細介紹了皮膚中藥外用制劑、美容外用制劑、生鮮劑和化妝品的概述。介紹145種中藥，388種化學原料藥輔料；分別敘述245種中藥外用制劑，249種皮膚美容化學外用制劑，100種特殊用途化妝品的商品處方，36種生鮮藥制劑的制法、適應(yīng)證、用法?？勺鳛槠つw科、美容科、日化工業(yè)的醫(yī)療、醫(yī)藥、科研工作者的參考書，醫(yī)藥院校學生制劑教學用書，也作為7月份在蘇州舉辦的全國皮膚美容化妝品制劑研修班教材。定價：78元，皮膚科原料郵購目錄備索。郵購地址：吉林省梅河市馬振友皮膚病研究所，0435-4222180。

Roles of regulatory B cells in several immune-mediated dermatoses

Lin Jie,Xu Ai′e.Third People's Hospital of Hangzhou,Affiliated Hangzhou Clinical College of Anhui Medical University,Hangzhou 310009,China

There have been many researches on the roles of regulatory T cells in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus,psoriasis,autoimmune bullous diseases,etc.With the discovery of regulatory B cells secreting interleukin 10 （IL-10）,namely B10 cells,in human body,it has been revealed that B10 cells and IL-10 have negative immunoregulatory effect,and can protect against diseases.Many studies have shown that the number and function of B10 cells as well as the level of IL-10 are abnormal in the above diseases,suggesting a relationship between these abnormalities and occurrence as well as development of these diseases.

T-lymphocytes,regulatory;B-lymphocytes;Immunomodulation;Skin diseases;Psoriasis;Pemphigoid,bullous

Xu Ai'e,Email:xuaiehz@msn.com

10.3760/cma.j.issn.1673-4173.2015.03.015

310009杭州，安徽醫(yī)科大學附屬杭州臨床學院，杭州市第三人民醫(yī)院

許愛娥Email:xuaiehz@msn.con

本文主要縮寫：IL：白細胞介素，TGF：轉(zhuǎn)化生長因子，PV：尋常型天皰瘡，BP：大皰性類天皰瘡，AD：特應(yīng)性皮炎

2014-05-14）