李徽 姚炯濤 張少利

CHD已成為嚴(yán)重危害人們健康的主要疾病之一。其發(fā)病機(jī)制目前有許多學(xué)說(shuō)，如血栓形成學(xué)說(shuō)、脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說(shuō)、損傷反應(yīng)學(xué)說(shuō)等，但都不足以完全解釋CHD疾病的發(fā)病基礎(chǔ)［1］。越來(lái)越多的證據(jù)表明，多種炎癥介質(zhì)可能是CHD新的危險(xiǎn)因素。Gal-3作為一種強(qiáng)大的炎性因子，新近基礎(chǔ)研究認(rèn)為其在CHD的形成、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重大作用，但目前國(guó)內(nèi)外有關(guān)Gal-3與CHD的臨床研究鮮見報(bào)道。本研究旨在探討Gal-3在CHD不同分型患者血清中的水平，并分析其與hs-CRP、MCP-1之間的相關(guān)性，探討Gal-3在CHD患者中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年6月至2014年5月在河南省西華縣人民醫(yī)院、廣東省深圳市福田區(qū)中醫(yī)院和新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院住院治療，并經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影確診的CHD患者(至少有一支主要冠狀動(dòng)脈狹窄程度＞50%)，隨機(jī)選取符合條件的患者共194例作為CHD組(CHD組)，其中男138例，女56例;平均年齡(64±7)歲;穩(wěn)定型心絞痛組(SAP組)62例，不穩(wěn)定型心絞痛組(UAP組)70例，急性心肌梗死組(AMI組)62例。并收集30例年齡、性別匹配的冠脈造影正常的非CHD患者作為對(duì)照組(CON組)，其中女10例，男20例;平均年齡(60±7)歲;對(duì)照組中心律失?；颊?6例，胃食管反流患者6例，心臟神經(jīng)癥者8例，其血常規(guī)、丙氨酸基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、血糖(FBS)及胸片等檢查均無(wú)異常。采集入選病例一般臨床資料，準(zhǔn)確記錄性別、年齡、身高、體質(zhì)量及血壓等基本資料，記錄有無(wú)高血壓病、糖尿病、血脂異常及吸煙史等病史，并記錄近期服藥史。均抽取清晨空腹靜脈血，采用日本日立公司生產(chǎn)的全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定肝腎功能、膽固醇(CHOL)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白T(cTnT)、B型腦鈉肽前體等生化指標(biāo)。排除心臟瓣膜病、心肌病、心功能不全、惡性腫瘤、急慢性感染性疾病、嚴(yán)重肝腎功能不全等。

1.2 冠狀動(dòng)脈造影 按美國(guó)心臟學(xué)會(huì)(AHA)冠狀動(dòng)脈造影指南，采用德國(guó)SIEMENS公司HICORACOM大型X線機(jī)與美國(guó)GE公司Adantx LC+心血管造影機(jī);Judkin’s法多部位多角度造影，使用該造影機(jī)的圖像系統(tǒng)進(jìn)行狹窄定量分析。

1.3 標(biāo)本采集及檢測(cè) 采用透射免疫比濁法檢測(cè)高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)。同時(shí)抽取靜脈血約5 ml放入潔凈促凝管3 000 r/min離心15 min，收集上層血清至潔凈EP管后放入－70℃冰箱保存待測(cè)，避免反復(fù)凍融。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清Gal-3、MCP-1含量。Gal-3 ELISA試劑盒購(gòu)于美國(guó)eBioscience公司，MCP-1 ELISA試劑盒自欣博盛生物科技有限公司定購(gòu)，全自動(dòng)酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Biorad公司。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以表示，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)表示。正態(tài)性檢驗(yàn)采用探索性分析或單樣本K-S擬合優(yōu)度檢驗(yàn)。hs-CRP為偏態(tài)分布，以中位數(shù)和四分位數(shù)表示，經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后為正態(tài)分布，余各計(jì)量數(shù)據(jù)均服從正態(tài)分布，各指標(biāo)組間均值服從方差齊性(Levene檢驗(yàn))，故多組間均值比較采用單因素的方差分析，組間均值兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料使用χ2檢驗(yàn)，Gal-3與hs-CRP、MCP-1相關(guān)性分析采用Peason相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組基本臨床資料及生化指標(biāo)的比較 對(duì)4組基本臨床資料進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，AMI組血AST、CK-MB及cTnT水平比對(duì)照組、SA組、UA組高(P＜0.05)，其他指標(biāo)包括空腹血糖、腎功能、血脂及血壓等，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 4組基本臨床資料及生化指標(biāo)比較，±s

表1 4組基本臨床資料及生化指標(biāo)比較，±s

注:與 CON組比較，*P ＜0.05;與SA組比較，#P ＜0.05;與 UA 組比較，△P ＜0.05

項(xiàng)目 SAP組(n=62)UAP組(n=70)AMI組(n=62)CON組(n=60)SBP(mm Hg)143±17 138±18 143±20 139±21 DBP(mm Hg) 82±14 81±12 86±12 82±10 ALT(U/L) 24±11 20±8 22±9 22±9 AST(U/L) 22±6 22±8 128±29*#△ 23±6 BUN(mmol/L) 6.2 ±1.8 6.81 ±2.37 5.85 ±0.68 5.90 ±1.97 Cr(μmol/L) 101±36 95±19 89±22 99±21 CHOL(mmol/L) 4.6 ±0.8 4.4 ±1.0 4.8 ±0.9 4.6 ±1.0 LDL-C(mmol/L) 2.7 ±0.8 2.8 ±0.7 3.2 ±0.8 2.9 ±0.9 HDL-C(mmol/L) 0.90 ±0.19 0.87 ±0.28 0.81 ±0.29 1.01 ±0.25 TG(mmol/L) 1.3 ±0.5 1.7 ±0.8 1.7 ± 1.0 1.56 ±0.78 CK-MB(U/L) 5.8 ±1.8 6.0 ±1.8 16.9 ±3.2*#△ 5.7 ±1.6 cTnT(μg/L) 0.21 ±0.07 0.24 ±0.06 1.67 ±0.54*#△ 0.19 ±0.03 FBS(mmol/L)5.9 ±1.6 6.2 ±1.8 6.2 ±1.9 5.8 ±1.7

2.2 5組血清Gal-3、MCP-1及血漿hs-CRP水平比較4組間血清Gal-3均值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中CHD組血清Gal-3水平顯著高于CON組(t= －12.969，P＜0.01)，CHD 組 3 個(gè)亞組分別與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CHD3個(gè)亞組間兩兩比較，其中UAP組和AMI組Gal-3水平顯著高于SAP組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，AMI組Gal-3水平稍高于UAP組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。4組間血漿hs-CRP均值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中CHD組顯著高于對(duì)照組(t= －7.505，P＜0.05)，CHD 組3 組分別與對(duì)照組相比，其中UAP組、AMI組顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);SAP組稍高于對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。CHD3組兩兩比較，其中UAP組、AMI組顯著高于SAP組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，AMI組高于UAP組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。4組血清MCP-1水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，CHD組顯著高于對(duì)照組(t= －7.652，P＜0.05)，CHD 組3 組分別與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CHD3組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，即AMI組顯著高于UAP組和SAP組(P＜0.05);UAP組顯著高于SAP組(P＜0.05)。見表2。

表2 5組血清Gal-3、MCP-1及血漿hs-CRP水平比較±s

表2 5組血清Gal-3、MCP-1及血漿hs-CRP水平比較±s

注:與CON組比較，*P ＜0.05;與SA組比較，#P ＜0.05;與 UA 組比較，△P＜0.05

組別 hs-CRP(mg/L) MCP-1(pg/ml)Gal-3(ng/ml)CHD 組(n=194) 5.66(1.94 ～10.33)58 ±25 3.79 ±2.42 SAP 組(n=62) 1.45(1.05 ～1.90) 37 ±8* 1.71 ±0.26*UAP 組(n=70) 7.8(5.22 ～11.7)*# 59 ±10*# 4.36 ±1.57*#AMI組(n=62) 8.45(5.34 ～19.06) 79 ±30*#△ 5.10 ±2.79*#CON 組(n=60) 1.23(0.83 ～1.79)22 ±6 1.25 ±0.35

2.3 Gal-3與 hs-CRP、MCP-1相關(guān)性分析 hs-CRP為偏態(tài)分布，經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后為正態(tài)分布，經(jīng)直線回歸相關(guān)分析CHD組Gal-3水平與hs-CRP水平呈正相關(guān)(r=0.799，P＜0.01)，Gal-3水平與 MCP-1 水平呈正相關(guān)(r=0.785，P＜0.01)。

3 討論

炎癥是頸動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的核心發(fā)病機(jī)制，其在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成、發(fā)展及斑塊破裂過(guò)程中均發(fā)揮重要作用［2］。近年來(lái)，炎性介質(zhì)及其影響因子被眾多學(xué)者深入研究，同時(shí)，也有不少系統(tǒng)的研究在探尋新的生化標(biāo)志物，以便在臨床中能更早地識(shí)別CHD的高?；颊?。Gal-3是β半乳糖苷動(dòng)物凝集素家族成員之一，在人類基因中由單個(gè)基因LGALS 3編碼，含251個(gè)氨基酸殘基，相對(duì)分子質(zhì)量為31 kb［3］。Gal-3作為一種炎癥信號(hào)調(diào)節(jié)因子，越來(lái)越多的研究顯示其在CHD的形成和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

Lee等［4］對(duì)大鼠動(dòng)脈粥樣病變組織的研究發(fā)現(xiàn)，粥樣病變組織的Gal-3表達(dá)水平增加。對(duì)給予高脂肪飲食的ApoE基因缺陷大鼠研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)同時(shí)敲除其Gal-3基因時(shí)，大鼠的動(dòng)脈病變程度明顯低于未敲除Gal-3基因組，對(duì)未敲除Gal-3基因大鼠組進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Gal-3抑制劑可以減輕大鼠動(dòng)脈粥樣硬化程度［5］。Tsai等［6］研究發(fā)現(xiàn)，急性 ST 段抬高型心肌梗死患者血清中Gal-3水平顯著高于與健康對(duì)照組(P＜0.001)，血清Gal-3可作為急性ST段抬高型心肌梗死患者行PCI術(shù)后30 d主要不良事件的生化標(biāo)志物。目前國(guó)內(nèi)外尚缺乏Gal-3與CHD臨床分型關(guān)系的臨床研究。本研究發(fā)現(xiàn)，CHD患者血清Gal-3水平顯著高于對(duì)照組，CHD組血清Gal-3水平兩兩比較，其中UA組、AMI組顯著高于穩(wěn)定型心絞痛組(P＜0.05)，AMI組稍高于UA組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。這提示Gal-3能反映CHD患者冠脈粥樣斑塊穩(wěn)定性，有望成為急性冠脈綜合征新的生化標(biāo)志物。巨噬細(xì)胞的激活，在動(dòng)脈粥樣病變的病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈硬化斑塊處活化的巨噬細(xì)胞可以分泌大量的Gal-3［7］，Gal-3通過(guò)自分泌或旁分泌途徑反作用于巨噬細(xì)胞，刺激其釋放TNF-α、IL-6及炎性趨化因子，增強(qiáng)血管壁炎性反應(yīng)及促進(jìn)泡沫細(xì)胞的增生，同時(shí)作為高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物的受體，Gal-3能與其修飾的蛋白結(jié)合，加速動(dòng)脈粥樣硬化病變，導(dǎo)致動(dòng)脈斑塊的不穩(wěn)定［8］。這從理論上很好地解釋了，CHD患者血清Gal-3顯著高于正常對(duì)照組，而急性冠脈綜合征患者血清Gal-3顯著高于穩(wěn)定型心絞痛患者。Gal-3主要通過(guò)增強(qiáng)冠脈斑塊處的炎性反應(yīng)，促進(jìn)泡沫細(xì)胞的增生參與動(dòng)脈粥樣硬化的形成與發(fā)展［9，10］。目前關(guān)于Gal-3在CHD中的臨床研究極少，本研究進(jìn)一步證實(shí)了Gal-3在CHD中的重要價(jià)值，有望應(yīng)用于臨床作為急性冠脈綜合征的生化標(biāo)志物。Hs-CRP、MCP-1均是CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其水平高低可預(yù)測(cè)CHD患者急性事件發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，并反映冠脈病變程度，但由于特異性不強(qiáng)限制了它們?cè)贑HD中的應(yīng)用。本研究發(fā)現(xiàn)，CHD患者血漿hs-CRP、血清MCP-1顯著高于對(duì)照組，且急性冠脈綜合征患者顯著高于穩(wěn)定性心絞痛患者，這與之前的研究［11，12］相一致。通過(guò)分析Gal-3與這兩者之間的相關(guān)性，能更好地探討Gal-3在CHD中的臨床價(jià)值。本結(jié)果顯示血清Gal-3水平與hs-CRP水平及MCP-1水平具有顯著相關(guān)性，進(jìn)一步證實(shí)了Gal-3在CHD的形成、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，可作為CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，臨床中聯(lián)合檢測(cè)3種因子能提高對(duì)CHD的診斷及對(duì)高?；颊叩淖R(shí)別。

綜上所述，血清Gal-3在CHD患者中的水平顯著高于對(duì)照組，且其在急性冠脈綜合征患者中的水平亦顯著高于穩(wěn)定性心絞痛患者，并且與hs-CRP、MCP-1水平顯著相關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)這三個(gè)指標(biāo)對(duì)CHD的早期診斷、危險(xiǎn)分層及預(yù)后具有重要臨床意義。進(jìn)一步證實(shí)了，Gal-3在CHD的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要的作用，其在冠脈事件的發(fā)生中扮演重要角色，可作為CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，并有望成為急性冠脈綜合征新的生化標(biāo)志物。Gal-3作為一種強(qiáng)大的炎性因子，參與了CHD形成與發(fā)展的全過(guò)程，其作用是多方面的，干擾其作用途徑可能是CHD治療的潛在靶點(diǎn)。

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