李世花，劉行超，曾桂芬，肖慧玲，莫 姍，彭 芬

(中國人民解放軍第一八一醫(yī)院檢驗(yàn)科 541002)

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·案例分析·

血液中分離出大腸彎曲菌1例

李世花，劉行超△，曾桂芬，肖慧玲，莫 姍，彭 芬

(中國人民解放軍第一八一醫(yī)院檢驗(yàn)科 541002)

大腸彎曲菌； 藥敏試驗(yàn)； 耐藥性

彎曲菌廣泛分布于各種溫血?jiǎng)游矬w內(nèi)，其中以家禽、家畜、野禽的帶菌量多，人主要通過食用被其污染的食物及其制品和水源患病[1]。彎曲菌病是一種引起以急性腹瀉為主要癥狀的感染性疾病，也可引起腸道外感染，表現(xiàn)為全身中毒癥狀，如高熱、皮膚黏膜淤斑等，出現(xiàn)敗血癥[2-3]。彎曲菌病在出現(xiàn)發(fā)熱之前，甚至在沒有進(jìn)行抗生素治療的情況下，病情常可能出現(xiàn)緩解[4]。近年來，彎曲菌感染率在世界各地普遍呈上升趨勢，對公共衛(wèi)生安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅，其中引起人類致病最多的是空腸彎曲菌和大腸彎曲菌，由大腸彎曲菌引起的人類血液感染的報(bào)道甚少，桂林地區(qū)未見報(bào)道。本科室于2014年9月從1例肝硬化失代償期發(fā)熱的乙肝患者血液中分離培養(yǎng)出1株大腸彎曲菌，進(jìn)行形態(tài)學(xué)和生化鑒定，并進(jìn)行相關(guān)藥敏分析，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，男性，42歲，農(nóng)民。入院前無誘因解黃色稀水樣便，每日3次，無黏液、膿血及里急后重感。入院診斷：慢性乙肝，肝硬化失代償期，發(fā)熱原因待查。入院查體：體溫39.8 ℃，慢性肝病面容，下腹部壓痛，腹部、雙下肢可見散在米粒大小出血點(diǎn)，壓之不褪色，肝脾肋下觸及不滿意，移動(dòng)性濁音陽性，腸鳴音稍活躍，雙下肢中度凹陷性浮腫。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)2.63×1012/L,白細(xì)胞計(jì)數(shù)8.02×109/L,淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)0.12×109/L、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)0.85×109/L,總蛋白56.5 g/L,清蛋白20.0 g/L,C反應(yīng)蛋白35.56 mg/L。CT示肝硬化、脾大、腹水大量。腹水李凡他試驗(yàn)陽性，一般細(xì)菌培養(yǎng)無細(xì)菌生長。無菌采集靜脈血行細(xì)菌培養(yǎng)。

1.2 儀器與試劑 法國梅里埃BacT/ALERT 3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀及配套成人需氧血培養(yǎng)瓶(批號(hào)1038156)；法國梅里埃VITEK2 Compact及配套NH試卡(20140924A)；BA、MAC、CA、MH平皿購自鄭州安圖生物；藥敏紙片購自英國Oxoid公司。

1.3 方法 無菌采集靜脈血進(jìn)行培養(yǎng)，46 h陽性報(bào)警，取陽性培養(yǎng)物行革蘭染色，同時(shí)轉(zhuǎn)種后于25、37、42 ℃ CO2罐中培養(yǎng)24～72 h。取菌落進(jìn)行革蘭染色、生化鑒定及瓊脂擴(kuò)散法藥敏，各紙片間中心距離、距平皿外緣距離均按美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)第四版規(guī)定。

2 結(jié) 果

2.1 分離培養(yǎng) 彎曲菌為微需氧菌，生長條件較苛刻，最佳氣體環(huán)境為含5% O2、10% CO2及85% N2。25 ℃環(huán)境下無菌生長，42 ℃環(huán)境下血平板上可見灰白、光滑、濕潤、扁平邊緣不整齊的沿接種線蔓延生長的菌落，37 ℃環(huán)境下菌落生長較42 ℃生長慢。鏡下見革蘭陰性桿菌，菌體細(xì)長彎曲，呈多形性：逗點(diǎn)形、弧形、S形、海鷗展翅形等。取陳舊培養(yǎng)物行革蘭染色可見部分菌體呈現(xiàn)球形及長絲形。

2.2 生化試驗(yàn) 該菌氧化酶、觸酶、硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性，硫化氫試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)陰性，水解醋酸吲哚酚，不水解馬尿酸，不發(fā)酵糖類。

2.3 鑒定及藥敏 鑒定結(jié)果為大腸彎曲菌，編碼為0600002120，鑒定率為99%。藥敏結(jié)果：對慶大霉素、紅霉素、四環(huán)素、克林霉素、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢哌酮、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星耐藥，僅對氨芐青霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、氯霉素敏感。

3 討 論

彎曲菌病為動(dòng)物源性疾病，感染的動(dòng)物通常無明顯癥狀，但可長期向外界排菌，從而引起人類感染[5]。發(fā)展中國家由于衛(wèi)生條件有限，水源性傳播最多見，河水、溪水、山泉、井水中均可分離出彎曲菌。陽成波等[6]曾報(bào)道南京市場銷售的雞肉、牛奶、牛奶制品及井水存在不同程度空腸彎曲菌感染，如果加工不當(dāng)或飲食習(xí)慣不衛(wèi)生，會(huì)對消費(fèi)者的健康構(gòu)成潛在威脅。

據(jù)美國國家食品網(wǎng)的監(jiān)測，彎曲菌是發(fā)病率最高的病原菌，是全球范圍內(nèi)胃腸炎的主要病因，世界衛(wèi)生組織已將彎曲菌腸炎列為最常見的腸道傳染病之一。林玫等[7]已研究證實(shí)廣西腹瀉患者中彎曲菌已成為重要的病原菌之一。本病例患者曾無誘因解黃色稀水樣便，每日3次，機(jī)體免疫功能嚴(yán)重受損，體質(zhì)較差(清蛋白低下)，常有發(fā)熱現(xiàn)象，未進(jìn)行抗感染治療體溫也可正常。說明本病例患者感染大腸彎曲菌與免疫功能低下密切相關(guān)，與肝病無直接因果關(guān)系。

近年來，彎曲菌對抗生素的耐藥性明顯增加。其中耐氟喹諾酮類彎曲菌增加尤為明顯，彎曲菌對氨芐西林普遍耐受。20世紀(jì)70年代初，國內(nèi)外均報(bào)道紅霉素、慶大霉素對彎曲菌有很強(qiáng)的抑菌活性，并一致公認(rèn)紅霉素為治療彎曲菌腸炎首選藥物。20世紀(jì)80年代，僅阿根廷報(bào)道了一株耐紅霉素彎曲菌[8]。隨著抗生素的使用，不同國家不同地區(qū)彎曲菌對紅霉素出現(xiàn)了不同程度耐藥，而現(xiàn)在，南美、亞洲、非洲等許多國家均發(fā)現(xiàn)耐紅霉素菌株，且數(shù)量增長迅速。許海燕等[9]曾報(bào)道空腸彎曲菌對氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、青霉素類抗生素較為敏感，而對頭孢菌素類、喹諾酮類、磺胺類和四環(huán)素類抗生素產(chǎn)生了較強(qiáng)的耐藥性。侯鳳琴等[10]經(jīng)研究報(bào)道彎曲菌對頭孢類、復(fù)方磺胺甲噁唑、四環(huán)素、喹諾酮類的耐藥率較高，對紅霉素、氯霉素、克林霉素耐藥率低于10%。本病例中分離培養(yǎng)的大腸彎曲菌藥敏試驗(yàn)與以上兩則報(bào)道有所差異，說明彎曲菌的藥物敏感性不斷變化，且存在地域間差異，這提示臨床應(yīng)用抗生素防治彎曲菌病時(shí)，必須結(jié)合藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇高敏藥物或聯(lián)合用藥才能起到預(yù)期的效果。

隨著家庭飼養(yǎng)寵物的增加，人與動(dòng)物的親近及人類食用多種生肉制品，都大大增加了人感染彎曲菌的風(fēng)險(xiǎn)。彎曲菌廣泛存在于自然界，大腸彎曲菌和空腸彎曲菌引起的感染多為散發(fā)，偶有爆發(fā)的報(bào)道[11]。彎曲菌病起病隱匿、癥狀不典型，往往由于檢驗(yàn)水平有限，診斷不明確導(dǎo)致誤診或延誤治療。探索彎曲菌的快速檢測方法及對不同來源的菌株進(jìn)行親緣性分析，識(shí)別爆發(fā)流行，為疾病的診斷、控制以及彎曲菌病分子流行病學(xué)研究具有十分重要的意義。各國(特別是發(fā)展中國家)建立和完善對彎曲菌的監(jiān)測系統(tǒng)，加強(qiáng)各國之間的技術(shù)交流與合作也迫在眉睫。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.15.069

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1672-9455(2015)15-2295-02

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