蹇洪軍

(遵義市第一人民醫(yī)院，貴州 遵義 563000)

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當(dāng)歸配方顆粒與當(dāng)歸飲片質(zhì)量對(duì)比分析

蹇洪軍

(遵義市第一人民醫(yī)院，貴州 遵義 563000)

目的：對(duì)比當(dāng)歸配方顆粒與飲片的質(zhì)量。方法：應(yīng)用高效液相色譜法，對(duì)當(dāng)歸配方顆粒與當(dāng)歸飲片中阿魏酸的含量等進(jìn)行評(píng)估，對(duì)比二者質(zhì)量。結(jié)果：在0.033～0.165μg范圍內(nèi)，阿魏酸線性關(guān)系良好；阿魏酸峰面積RSD為1.05%，精密度良好；阿魏酸RSD=0.92%，重復(fù)性良好；對(duì)峰面積積分值測(cè)定，RSD=1.17%，表明穩(wěn)定性良好。當(dāng)歸飲片含水量為1.6mL，百分比為6.3%；當(dāng)歸配方顆粒含水量為0.6mL，百分比為2.90%。當(dāng)歸配方中阿魏酸含量為0.057%，當(dāng)歸飲片為0.050%。結(jié)論：當(dāng)歸配方顆粒中測(cè)定阿魏酸含量的方法可靠、簡(jiǎn)單、有較強(qiáng)的重復(fù)性，在當(dāng)歸配方顆粒質(zhì)量控制中，可以作為有效的方法參與評(píng)定，有重要的實(shí)施價(jià)值。

當(dāng)歸；配方顆粒；飲片；質(zhì)量分析

當(dāng)歸以潤(rùn)腸通便、調(diào)經(jīng)止痛、補(bǔ)血活血為主要功效，性溫，味辛、甘，歸脾、心、肝經(jīng)，在臨床各科廣泛應(yīng)用。當(dāng)歸始載《神農(nóng)本草經(jīng)》，是傘形科植物當(dāng)歸的干燥根[1]。當(dāng)歸配方顆粒與原飲片在功效、歸經(jīng)、性味上基本一致，由當(dāng)歸單味藥加工制成，應(yīng)用于中醫(yī)臨床配方之中，一方面可以滿足臨床隨證加減、辨證論治的需要；另一方面攜帶方便、免煎易服、安全衛(wèi)生、作用迅速，應(yīng)用環(huán)境較為理想[2]。當(dāng)歸主要含酚類、揮發(fā)油、生物堿、有機(jī)酸等多種成分，分布于有機(jī)酸中的阿魏酸，因其可溶于醋酸乙脂、醇、水等溶劑，屬于水溶性有效成分，在制劑中易被提取，但也易被破壞。阿魏酸是國(guó)際上近年來(lái)公認(rèn)的防癌物質(zhì)，屬于天然抗氧化劑，與藁本內(nèi)酯一樣，為當(dāng)歸發(fā)揮藥理作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，阿魏酸含量的測(cè)定，可以作為當(dāng)歸質(zhì)量的評(píng)價(jià)指標(biāo)。本次研究針對(duì)當(dāng)歸配方顆粒與當(dāng)歸飲片中阿魏酸含量的測(cè)定，對(duì)當(dāng)歸配方顆粒的質(zhì)量進(jìn)行考察，現(xiàn)將相關(guān)內(nèi)容總結(jié)如下。

1 試驗(yàn)材料

高效液相色譜儀、電熱風(fēng)干燥器、氣流烘干器、超聲清洗機(jī)、分析天平、萬(wàn)能粉碎機(jī)。阿魏酸對(duì)照品，純度>98%；當(dāng)歸飲片：傘形科植物當(dāng)歸干燥根；當(dāng)歸配方顆粒；無(wú)水乙醇，水，乙腈，甲醇，磷酸。

2 方法與結(jié)果

2.1 阿魏酸含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件 流速：1.0mL/min；柱溫：28℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：316nm；色譜柱：KromasiL C18柱；流動(dòng)相：選用乙腈(A)-0.05%磷酸水(B)洗脫(梯度)系統(tǒng)。

2.1.2 對(duì)照品溶液制備 精密稱取阿魏酸對(duì)照品0.275 0g，置于50mL棕色容量瓶中，70%甲醇定容。用移液管吸取3mL，置于50mL棕色容量瓶中，用70%甲醇定容，即得對(duì)照品溶液0.33mg/mL。

2.1.3 供試品溶液制備 精確稱取當(dāng)歸配方顆粒、飲片粉末各0.5g，置于容量瓶中，精密加入70%甲醇20mL，密塞，超聲處理30min，過(guò)濾定容，即得供試品溶液，在低溫狀態(tài)下貯存，上樣前用微孔濾膜過(guò)濾。

2.1.4 線性關(guān)系考察 精密吸取上述對(duì)照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，分別置于10mL容量瓶中，用70%甲醇定容。用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣10μL，記錄色譜圖，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)。結(jié)果表明，阿魏酸在0.033～0.165μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.1.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取對(duì)照品溶液10μL，注入液相色譜儀中，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果阿魏酸峰面積RSD=1.05%，表明儀器精密度良好。

2.1.6 重復(fù)性試驗(yàn) 分別制備6份供試品溶液，取10μL測(cè)定，阿魏酸峰面積RSD=0.92%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 提取供試品溶液，在色譜條件下取樣測(cè)定，測(cè)定結(jié)果如圖1所示。峰面積積分值測(cè)定，RSD=1.17%，表明穩(wěn)定性良好。

圖1 當(dāng)歸配方顆粒和當(dāng)歸飲片中阿魏酸HPLC圖譜

2.2 水分測(cè)定

依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》(2010年版)測(cè)定。對(duì)當(dāng)歸飲片粉末和配方顆粒精密測(cè)定。于圓底燒瓶中放置，加入甲苯200mL，在電熱套中放置圓底燒瓶，緩慢加熱，當(dāng)甲苯沸騰時(shí)，對(duì)溫度進(jìn)行調(diào)節(jié)，每秒餾出2滴，完全將水分餾出，不增加，用甲苯?jīng)_洗冷凝管內(nèi)部，蒸餾5min，冷卻至常溫，拆卸裝置，若觀察二層管壁存在水滴情況，可用蘸有甲苯的銅絲行相關(guān)操作，對(duì)水量進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)歸飲片含水量為1.6mL，百分比為6.3%；當(dāng)歸配方顆粒含水量0.6mL，百分比為2.90%。當(dāng)歸配方顆粒中阿魏酸含量為0.057%，當(dāng)歸飲片為0.050%。

3 討論

相關(guān)試驗(yàn)中，在色譜條件方面，考察乙腈-磷酸、乙腈-水、甲醇-水不同洗脫系統(tǒng)梯度具體洗脫情況。同一樣品用乙腈-水梯度和甲醇-水梯度洗脫系統(tǒng)分析，結(jié)果甲醇-水梯度色譜峰寬，洗脫基線有較重漂移，出峰數(shù)目少，峰形不好，乙腈-水梯度洗脫有更好系統(tǒng)。用乙腈-0.05%磷酸梯度洗脫系統(tǒng)與乙腈-水磷酸梯度洗脫系統(tǒng)分析同一樣品，乙腈-0.05%磷酸梯度洗脫有較多吸收峰數(shù)目，較好峰形，較乙腈-水梯度洗脫系統(tǒng)更占優(yōu)勢(shì)，故應(yīng)用乙腈-0.05%磷酸梯度予以洗脫。對(duì)供試品溶液進(jìn)行選取，結(jié)果顯示254、270nm處有倒峰，峰形較好為316、322、280nm處，峰目最多且吸收最大為316nm處，各峰均有較高的響應(yīng)值，具穩(wěn)定基線，故選用。本次應(yīng)用的HPLC法與《中華人民共和國(guó)藥典》不同，藥典應(yīng)用相關(guān)乙腈-0.085%磷酸梯度完成洗脫，其峰形、分離度、色譜干擾峰與本文方法不同[3]。

本次研究選取不同濃度和種類的溶劑、提取時(shí)間進(jìn)行研究，對(duì)當(dāng)歸配方顆粒中的阿魏酸進(jìn)行提取，結(jié)果效果較好的為70%甲醇超聲30min，有較高提取率。此法可用于對(duì)當(dāng)歸中阿魏酸的有效提取，且提取時(shí)間短。依據(jù)方法學(xué)考察結(jié)果，此種方法穩(wěn)定性好、精密度高，線性良好，符合重復(fù)性規(guī)定，可對(duì)當(dāng)歸配方顆粒中含阿魏酸量的測(cè)定方法提供科學(xué)、有效的控制質(zhì)量依據(jù)[4-5]。

當(dāng)歸配方顆粒含量的各項(xiàng)指標(biāo)，與藥典中當(dāng)歸指標(biāo)要求符合，檢測(cè)阿魏酸含量，較藥典規(guī)定的0.05%高。應(yīng)用相同方法，對(duì)當(dāng)歸飲片中阿魏酸的含量進(jìn)行測(cè)定，含量較當(dāng)歸配方顆粒低，提示從化學(xué)成分對(duì)當(dāng)歸配方顆粒分析，較當(dāng)歸飲片更占優(yōu)勢(shì)。綜上所述，運(yùn)用HPLC法測(cè)定當(dāng)歸配方顆粒中阿魏酸含量靈敏可靠、精密度高、重復(fù)性好，可以有效控制當(dāng)歸配方顆粒的質(zhì)量；當(dāng)歸配方顆粒中阿魏酸含量比當(dāng)歸飲片高，質(zhì)量較當(dāng)歸飲片穩(wěn)定，值得臨床推廣應(yīng)用。

[1] 王婕，趙建邦，宋平順.30批當(dāng)歸中阿魏酸、藁本內(nèi)酯含量測(cè)定[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(16)：70-72.

[2] 劉偉，王洋.HPLC法測(cè)定當(dāng)歸片中阿魏酸的含量[J].黑龍江醫(yī)藥，2011，24(1)：68-71.

[3] 魯建武，宋金春，馬俊玲，等.當(dāng)歸芍藥散提取液中芍藥苷和阿魏酸在大鼠體內(nèi)的血濃度測(cè)定[J].中國(guó)藥師，2010，13(11)：1575-1580.

[4] 馮學(xué)花，梁肖蕾.當(dāng)歸化學(xué)成分與藥理作用的研究進(jìn)展[J].廣州化工，2012，40(22)：16-18.

[5] 庹芹，雷震，黃良永.當(dāng)歸及其配方顆粒中阿魏酸的含量比較[J].中國(guó)藥師，2013，16(10)：1532-1535.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2014-12-04

蹇洪軍(1969-)，男，貴州省遵義市第一人民醫(yī)院主管中藥師，研究方向?yàn)橹兴幣谥萍拌b定。

R283.6

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1673-2197(2015)07-0036-02

10.11954/ytctyy.201507016