蘇云艷，寧東興

(昆明圣火藥業(yè)(集團(tuán))有限公司，云南 昆明 650217)

?

四季三黃片中梔子薄層鑒別研究

蘇云艷，寧東興

(昆明圣火藥業(yè)(集團(tuán))有限公司，云南 昆明 650217)

目的：研究四季三黃片中梔子薄層鑒別方法。方法：采用薄層鑒別法，以梔子苷為對照品，使用硅膠G薄層板，以正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶2∶0.5∶0.1)為展開劑，10%硫酸乙醇溶液為顯色劑105℃顯色，對四季三黃片中梔子進(jìn)行薄層鑒別。結(jié)果：供試品與對照品在相同位置呈現(xiàn)顏色一致的斑點，斑點圓整，Rf值適中。結(jié)論：此方法色譜斑點清晰、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于四季三黃片的質(zhì)量控制。

四季三黃片；梔子；薄層鑒別

四季三黃片由大黃、黃芩、黃柏、梔子四味藥組成，具有消炎退熱，通便利水的功能，用于口鼻生瘡，咽疼齒痛，口干舌燥，頭暈?zāi)垦?，大便秘結(jié)，小便赤黃?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有對梔子的質(zhì)量控制，本文對梔子的主要成分梔子苷進(jìn)行了薄層鑒別研究，以便更好地對四季三黃片進(jìn)行質(zhì)量控制。

1 材料與試劑

賽多利斯CPA225D十萬分之一電子天平；100×100mm雙槽薄層色譜展開缸；NC-101電熱鼓風(fēng)干燥箱。乙醚、正丁醇、氧化鋁、乙醇、三氯甲烷、甲醇均為分析純，水為超純水；梔子苷對照品(批號：110749-200714，供含量測定用)，購于中國藥品生物制品檢定所。四季三黃片供試品：由昆明圣火藥業(yè)(集團(tuán))有限公司提供(批號：20140901、20140902、20140903)。

2 方法與結(jié)果

2.1 實驗條件

2.1.1 展開劑選擇 采用①醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1或6∶4∶0.5∶0.5或10∶7∶2∶0.5)；②正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶1)；③苯-三氯甲烷-丙酮-甲醇-濃氨試液(4∶5∶4∶3∶0.8)[1]；④正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶1∶0.5∶0.1或2∶2∶0.5∶0.1)為展開劑，發(fā)現(xiàn)以正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶2∶0.5∶0.1)分離效果最好，斑點最為圓整，Rf值適中，重現(xiàn)性好，故選之。

2.1.2 顯色劑選擇 采用5%香草醛硫酸溶液、10%硫酸乙醇溶液、50%硫酸乙醇溶液作顯色劑進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)5%香草醛硫酸溶液和50%硫酸乙醇溶液易吸潮。10%硫酸乙醇溶液作為顯色劑斑點清晰且不易吸潮，故選10%硫酸乙醇溶液為顯色劑。

2.2 實驗方法

取本品12片，研細(xì)，置三角瓶中，加乙醇50mL，浸泡過夜，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣加水20mL，微熱使溶解，濾過，濾液置分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次20mL，棄去乙醚液，再用水飽和的正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用水洗滌3次，每次30mL，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加乙醇5mL分次使溶解，加于中性氧化鋁柱(100～200目，3g，內(nèi)徑10mm)上，用乙醇50mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取梔子苷對照品適量，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄 Ⅵ B)試驗，吸取上述2種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶2∶0.5∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液105℃顯色。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點。

2.3 陰性對照試驗

取缺梔子的陰性樣品同供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液，取梔子苷對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液按“2.2”項的實驗方法進(jìn)行薄層鑒別，結(jié)果表明陰性對照無干擾。

2.4 實驗結(jié)果

取梔子苷對照品溶液、3批四季三黃片供試品溶液、陰性對照溶液點樣，進(jìn)行薄層鑒別檢查，結(jié)果3批供試品在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。薄層色譜如圖1所示。

圖1 3批四季三黃片薄層色譜

3 討論

3.1 供試品溶液的制備方法考察

由于本品處方中梔子量少，其它成分對梔子苷的鑒別干擾特別大，曾采用較簡單的一些方法如：①醇直接提取；②醇提取后上氧化鋁柱或D101型大孔吸附樹脂柱或活性炭之后乙醇洗脫；③乙醚除雜后乙酸乙酯提取；④乙醚除雜后水飽和的正丁醇提取[2]。但這些方法制備的供試品溶液存在背景顏色太深、拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重、斑點不清晰、點樣困難等問題，用文中所述方法能避免其它成分的干擾，展開的色譜分離效果好，斑點圓整，Rf值適中。

3.2 吸附劑的選擇

采用硅膠G薄層板、硅膠H薄層板、硅膠GF254薄層板，點樣展開，發(fā)現(xiàn)硅膠G薄層板展開后斑點圓整，分離效果最好。

3.3 顯色溫度的選擇

考察了100℃、105℃、110℃三種條件下的顯色情況，結(jié)果表明105℃條件下顯色斑點更為清晰圓整，故選105℃顯色。

綜上所述，本方法色譜斑點清晰、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于四季三黃片的質(zhì)量控制。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005:345.

[2] 國家藥典委員會.藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑[S].第十一冊.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1996:43.

(責(zé)任編輯：余 婷)

2014-12-14

蘇云艷(1980-)，女，昆明圣火藥業(yè)(集團(tuán))有限公司工程師，研究方向為藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

R284

A

1673-2197(2015)07-0038-01

10.11954/ytctyy.201507017