楊海玲 ，許丹妮 ，吳尤嬌，黃華艷，徐 信

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001； 2.廣西民族師范學(xué)院，廣西 崇左 532200）

姜黃為姜科植物姜黃 Curcuma longa L.的干燥根莖，具有破血通經(jīng)、行氣止痛的功效，用于治療心腹痞滿(mǎn)脹痛、婦女血癖經(jīng)閉等證[1]。姜黃炮制方法在歷代醫(yī)藥專(zhuān)著、《中國(guó)藥典》及各省炮制規(guī)范均有記載，但均未規(guī)定具體的切制工藝參數(shù)，且炮制工藝不統(tǒng)一[2]。姜黃中主含揮發(fā)油和姜黃素[3]，其中姜黃素可抗氧化、抗炎、抗腫瘤[4]，揮發(fā)油則可抗菌、抗病毒等[5]。因此，本試驗(yàn)中采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法優(yōu)選姜黃飲片最佳切制工藝，以期為姜黃飲片炮制規(guī)范化研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

LC－1100AT型高效液相色譜分析儀（安捷倫公司，紫外檢測(cè)器）。姜黃素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110823～200603）；甲醇、乙腈均為色譜純；純凈水等；姜黃購(gòu)于廣西玉林藥材市場(chǎng)，經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院韋松基教授鑒定為姜科植物姜黃 Curcuma longa L.的干燥根莖。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品制備

將姜黃藥材凈選除雜后，等量稱(chēng)取9份樣品，每份120 g，略泡30 min，按 L9（34）正交試驗(yàn)表工藝進(jìn)行燜潤(rùn)、切片，放入烘箱中進(jìn)行干燥。飲片編號(hào)為1～9。

2.2 姜黃素及揮發(fā)油含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:Shimadzu VP－ODS C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相:乙腈－0.1% 冰醋酸溶液(48 ∶52)；流速 1.0 mL /min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng):430 nm；柱溫35℃。擬訂色譜條件下，姜黃素分離較好，相鄰峰間分離度均大于1.5，理論板數(shù)按姜黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于10 000。色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2.2 溶液制備

精密稱(chēng)取姜黃素對(duì)照品0.003 0 g，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，即得對(duì)照品溶液。分別精密稱(chēng)取各樣品粉末（80 目）0.2 g，精密加入甲醇 25 mL ，稱(chēng)重，回流提取 30 min，放冷，補(bǔ)足減失的質(zhì)量，過(guò)濾，取濾液適量，離心冷藏備用，即得供試品溶液。

圖1 高效液相色譜圖

2.2.3 線(xiàn)性關(guān)系考察

分別精密吸取姜黃素對(duì)照品溶液 2，4，6，8，10 μL，按擬訂色譜條件測(cè)定，以峰面積(Y）對(duì)姜黃素對(duì)照品進(jìn)樣量(X，μg)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得回歸方程 Y＝13 261.583 3 X＋62.3，r＝0.999 8(n＝5)。結(jié)果表明，姜黃素進(jìn)樣量在 0.24 ～ 1.20 μg 范圍內(nèi)與峰面積線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.2.4 含量測(cè)定

取上述供試品溶液分別進(jìn)樣10 μL，按2.2.1項(xiàng)下條件測(cè)定姜黃素含量。分別稱(chēng)取姜黃各樣品粉末25 g（24目），置2 000 mL的圓底燒瓶中，加入 800 mL的蒸餾水和數(shù)粒沸石，按 2010年版《中國(guó)藥典(一部)》附錄ⅩD揮發(fā)油測(cè)定法測(cè)定揮發(fā)油。結(jié)果見(jiàn)表 1。

表1 不同樣品中姜黃素與揮發(fā)油含量測(cè)定結(jié)果(n＝3)

2.3 正交試驗(yàn)

正交表選擇及因素水平設(shè)計(jì)：根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，燜潤(rùn)時(shí)間(A)、切片厚度(B)、干燥溫度(C)為姜黃切制的主要影響因素，干燥時(shí)間(D)為次要因素，每個(gè)因素取3個(gè)水平，選用 L9（34）正交試驗(yàn)表進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，見(jiàn)表2。

表2 姜黃飲片切制正交試驗(yàn)因素水平

表3 姜黃飲片切制工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表4 方差分析結(jié)果

方差分析：結(jié)果見(jiàn)表4。姜黃切制工藝的影響因素為C(干燥溫度)＞A（燜潤(rùn)時(shí)間）＞B（切片厚度）＞D（干燥時(shí)間），且干燥溫度與燜潤(rùn)時(shí)間對(duì)揮發(fā)油與姜黃素含量有顯著性影響。根據(jù)直觀(guān)分析及生產(chǎn)實(shí)際情況，取重要因素較高的組合，得到較佳工藝條件為 A1B2C2D1，即燜潤(rùn) 8 h，厚度 2 mm，35 ℃ 烘 7 h。

2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)

按優(yōu)選的切制工藝制備2份樣品，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表5。2份樣品中姜黃素與揮發(fā)油的含量均較高，與正交試驗(yàn)結(jié)果吻合，說(shuō)明本試驗(yàn)最佳切制工藝可行。

表5 姜黃飲片切制工藝驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果(n＝3)

3 討論

本試驗(yàn)中對(duì)姜黃的切制工藝進(jìn)行優(yōu)選，確立最佳工藝為燜潤(rùn)8 h，厚度2 mm，35℃烘7 h。姜黃傳統(tǒng)的炮制方法大多采用泡法處理軟化藥材，由于長(zhǎng)時(shí)間的浸泡在水中，容易出現(xiàn)嚴(yán)重的“下色”現(xiàn)象，易造成藥物中的成分流失于水中，造成質(zhì)量下降。本研究中進(jìn)行了改進(jìn)，使其在適量水中略泡較短時(shí)間約（30 min），再用先前泡藥材時(shí)剩余水及適量清水用潤(rùn)法進(jìn)行軟化，使藥材慢慢的吸收水分，這樣既符合“少泡多潤(rùn)”的水處理原則，又減少了有效成分的損失。由表1可見(jiàn)，姜黃素與揮發(fā)油的含量均較《中國(guó)藥典》的規(guī)定高，可佐證。由驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，本工藝簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、可行，可為進(jìn)一步研究姜黃的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。因此，該方法可進(jìn)一步在生產(chǎn)中推廣，既可大大地提高生產(chǎn)效率，又可保證飲片質(zhì)量保證臨床療效。

姜黃是藥食兩用的植物資源，同時(shí)也是主含芳香揮發(fā)性成分的藥材。由本試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，影響姜黃切制工藝的主要因素有干燥溫度及燜潤(rùn)時(shí)間，對(duì)其主要成分揮發(fā)油與姜黃素含量的影響最顯著。分析原因可能是飲片切片過(guò)薄，表面積增大，干燥時(shí)溫度過(guò)高及時(shí)間過(guò)長(zhǎng)均容易造成揮發(fā)油、姜黃素等揮發(fā)性成分散失；反之切片太厚，則有效成分又不易煎出。因此在切制加工時(shí)，一方面應(yīng)注意在切制前應(yīng)將姜黃按個(gè)頭大小分檔進(jìn)行燜潤(rùn)，以保證燜潤(rùn)程度的均勻性，同時(shí)依“少泡多潤(rùn)”原則以減少有效成分的損失；另一方面應(yīng)注意切片厚度及干燥溫度與時(shí)間對(duì)其有效成分的影響。

本試驗(yàn)證明，切制的厚度、干燥溫度和時(shí)間影響其中的姜黃素與揮發(fā)油含量。規(guī)范姜黃切片工藝，控制切片厚度、干燥溫度時(shí)間等工藝參數(shù)，可以提高飲片質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)：

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