陳 芳，李潤巖，吳春敏

（1.石藥集團歐意藥業(yè)有限責任公司，河北 石家莊 050000；2.河北省食品檢驗研究院 河北省食品安全重點實驗室，河北 石家莊 050091）

硫酸頭孢噻利化學名稱為7β－［（z）－2－（2－氨基－4－噻唑基）－2－（2－甲氧亞氨基乙酰氨基）］－3－［3－氨基－2－（2－羥乙基）－1－吡唑鎓基］甲基－3－頭孢烯－4－羧酸硫酸鹽［1］，屬于第四代注射用頭孢菌素，是一種高效廣譜抗菌藥物。該產品于1998年在日本首次上市。在硫酸頭孢噻利的制備過程中，三氟乙酸作為一種有機催化劑來使用的［2］，由于三氟乙酸屬于四類溶劑，在臨床使用中存在毒性，因此必須嚴格控制其在成品中的殘留量。

目前，部分學者對環(huán)境中［3－6］及部分藥品中［7－10］的三氟乙酸殘留進行了研究分析，但是對硫酸頭孢噻利中三氟乙酸的殘留檢測鮮有報道。本文采用離子色譜法建立了硫酸頭孢噻利中三氟乙酸殘留的檢測方法，靈敏度高，重現性好，適用于藥物中該物質的質控。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

DionexICS－3000型離子色譜儀（美國戴安公司），配DIONEX ASRS 4mm陰離子抑制器、DIONEX EG50自動淋洗液發(fā)生器、電導檢測器和Chromeleon工作站。

三氟乙酸標準品購自于Sigma公司，純度＞98%；試驗用水為18.25MΩ·cm超純水（自制）。

硫酸頭孢噻利供試品由石藥集團某公司提供。

標準儲備溶液：精確稱取適量三氟乙酸標準品，用超純水溶解并定容，配成濃度約為1mg／mL的標準貯備液，置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆?。根據需要配成適當濃度的標準使用液。

1.2 樣品前處理

精密稱定硫酸頭孢噻利樣品0.1g（精確至0.001g），于10mL帶刻度比色試管中，加入適量的超純水溶解并定容至2mL。漩渦2min，超聲10min，5000r／min離心3min，過0.45μm濾膜，待測。

1.3 色譜條件

采用Dionex IonPac AS19（4mm×25cm）陰離子交換色譜柱及相應的IonPac AS19（4mm×5cm）陰離子保護柱；DIONEX ASRS 4mm陰離子抑制器，外加水抑制模式，抑制電流100mA；DIONEX EG50自動淋洗液發(fā)生器，為1.0mmol／L氫氧化鉀溶液，流速為1.0mL／min；電導檢測器，檢測池溫度：30℃；進樣體積為25μL。

2 結果與分析

2.1 超聲時間的選擇

在其他條件相同的條件下，實驗考察了不同的超聲時間（0、5、10、20、30min）對檢測結果的影響。實驗結果表明，當超聲時間未達到10min之前，三氟乙酸的檢測結果隨超聲時間的增長而增大，當超聲時間超過10min以后，檢測結果基本持平。因此，我們選擇超聲時間為10min。

2.2 色譜柱的選擇

我們考察了AS19和AS11兩種色譜柱，實驗結果發(fā)現，同等濃度時，三氟乙酸在AS19色譜柱上響應值更好，而且峰型對稱，因此，本實驗選擇AS19色譜柱為今后實驗的分析柱。

2.3 色譜條件的選擇

實驗研究了不同濃度淋洗液和檢測器溫度對三氟乙酸檢測結果的影響。實驗結果表明，淋洗液濃度為1.0mmol／L，檢測池溫度為30℃時，即可獲得較好的檢測結果。在該色譜條件下對標準溶液進行測試，三氟乙酸的保留時間約為6.440min。結果見圖1所示。

圖1 三氟乙酸標準離子色譜圖

2.4 線性關系、檢出限和定量限

配制濃度依次為0、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg／mL的三氟乙酸標準溶液，按照“1.3”的色譜方法將標準溶液注入離子色譜儀，并記錄色譜圖。以標準溶液濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標繪制標準曲線。實驗結果表明，在0.1～10.0μg／mL范圍內，色譜峰面積和濃度呈良好線性關系。線性方程為Y＝0.0799X，r＝0.9997。

取濃度為1.0μg／mL的三氟乙酸標準溶液逐級稀釋，按照3倍信噪比（S／N＝3）和10倍信噪比（S／N＝10）分別計算方法的檢出限為0.03μg／mL和定量限為0.10μg／mL。

2.5 樣品加標回收率試驗

取未檢出三氟乙酸的樣品9份，3份為一組，按照5倍定量限，10倍定量限和50倍定量限的方式，依次加入濃度為10μg／mL的標液0.1mL、0.2mL、1.0mL，加超純水定容至2mL。將該系列樣品依次注入離子色譜儀中，每個樣品重復進樣6次，計算該方法的精密度和加標回收率。測試結果見表1所示。低、中、高3個濃度水平的平均回收率（n＝6）依次為97.9%、98.5%、98.9%，精密度的 RSD值分別為1.51%、1.18%和1.04%。

2.6 樣品檢測

分別取3批樣品，按照“1.2、1.3”進行樣品處理和測試，平行測定2份，結果三批樣品中均未檢出三氟乙酸殘留。

表1 陰性樣品中三氟乙酸加標回收率（n＝6）和精密度實驗

3 結論

本文建立的離子色譜法檢測硫酸頭孢噻利中三氟乙酸殘留的分析方法，優(yōu)化了前處理條件和儀器條件，該方法的檢出限為0.03μg／mL，可以滿足三氟乙酸殘留檢測的要求。實驗結果表明，該方法靈敏度高，準確性好，結果令人滿意?？梢詾楸O(jiān)管部門對三氟乙酸殘留的監(jiān)測提供科學依據。

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