趙 波，關(guān)志勛，段中良，許 靜，曹 蘊(yùn)，林 彩，王言言，夏超明

吡喹酮衍生物DW-3-15對(duì)日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學(xué)效應(yīng)觀察

趙 波，關(guān)志勛，段中良，許 靜，曹 蘊(yùn)，林 彩，王言言，夏超明

目的 通過體外觀察吡喹酮(PZQ)衍生物DW-3-15對(duì)日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學(xué)效應(yīng)，探討該衍生物作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價(jià)值。方法 單性日本血吸蟲尾蚴(70±5條)感染小鼠，21 d后，用PZQ的半數(shù)有效劑量(ED50，25.98 mg/kg)對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃給藥，每天一次，連續(xù)30 d，停藥21 d后，再給予小鼠治療劑量PZQ(200 mg/kg)，連續(xù)5 d，停藥2周后肝門靜脈灌注收集蟲體，置DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)，分別加入不同濃度PZQ和DW-3-15，作用16 h后換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)72 h，每隔24 h體視顯微鏡下觀察、記錄一次蟲體活力和形態(tài)變化，評(píng)價(jià)誘導(dǎo)蟲體對(duì)PZQ及DW-3-15的敏感性。結(jié)果 PZQ和DW-3-15體外作用于未誘導(dǎo)日本血吸蟲成蟲的臨界致死濃度(作用蟲體72 h活力降低率達(dá)90%的最低濃度)分別為14 μmol/L和45 μmol/L；誘導(dǎo)蟲體對(duì)PZQ的敏感性較未誘導(dǎo)蟲體顯著下降，是其臨界致死濃度的8倍(112 μmol/L)，而誘導(dǎo)蟲體對(duì)DW-3-15的敏感性與未誘導(dǎo)蟲體相比沒有明顯差異，臨界致死濃度仍為45μmol/L。結(jié)論 經(jīng)誘導(dǎo)的日本血吸蟲PZQ抗性蟲體對(duì)DW-3-15沒有交叉抗性；提示DW-3-15抗日本血吸蟲的靶點(diǎn)可能與PZQ不同，具有作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價(jià)值，值得進(jìn)一步研究。

日本血吸蟲；吡喹酮；DW-3-15；交叉抗性

血吸蟲病(schistosomiasis)是由裂體吸蟲屬血吸蟲引起的一種人畜共患、慢性消耗性寄生蟲病，分布廣泛，嚴(yán)重?fù)p害人類健康，主要流行于熱帶和亞熱帶地區(qū)，據(jù)報(bào)道，僅在撒哈拉以南的非洲每年就有將近30萬人死于血吸蟲病[1-4]。

20世紀(jì)70年代中期，吡喹酮(praziquantel)的發(fā)明是抗血吸蟲病藥物發(fā)展史上的一個(gè)里程碑。由于該藥口服方便、低毒、高效和療程短(1～2 d)，適于群體治療,故迅速得到推廣應(yīng)用,并對(duì)全球血吸蟲病的防治產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響[5]。在許多國家，使用PZQ大規(guī)模治療血吸蟲病獲得成功[6-7]，并且因?yàn)樗男?yīng)優(yōu)勢和低廉的價(jià)格，已經(jīng)成為大多數(shù)國家血吸蟲病治療的首選藥物[8-9]，但僅僅依賴一種藥物治療疾病是非常危險(xiǎn)的[10]，往往存在抗藥性產(chǎn)生的可能性。 PZQ 的廣泛使用也可能促進(jìn)其抗性蟲株的產(chǎn)生，已有關(guān)于抗PZQ曼氏血吸蟲蟲株產(chǎn)生的報(bào)道(現(xiàn)場和實(shí)驗(yàn)室)[11]。雖然目前還沒有日本血吸蟲對(duì)PZQ有抗性的臨床證據(jù)，但如果抗性株一旦出現(xiàn)，而沒有替代藥，將使血防工作受到嚴(yán)重威脅，故發(fā)展抗血吸蟲新藥具有重要意義。

本研究應(yīng)用前期優(yōu)化的日本血吸蟲PZQ抗性蟲體誘導(dǎo)方案[12]，獲得對(duì)PZQ具有一定程度抗性的蟲體，體外觀察其對(duì)PZQ衍生物DW-3-15的敏感性，探討誘導(dǎo)蟲體對(duì)PZQ和DW-3-15是否存在交叉抗性，評(píng)價(jià)DW-3-15作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價(jià)值。

1 材料

1.1 陽性釘螺與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 日本血吸蟲陽性釘螺購于江蘇省血吸蟲病防治研究所。

ICR小鼠由蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，雌性，6～8周齡，20～25 g，清潔級(jí)。

1.2 藥物與試劑 1)片劑PZQ，南京制藥廠有限公司生產(chǎn)。2)粉劑DW-3-15，蘇州大學(xué)藥學(xué)院合成。3)青霉素-鏈霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution)、培養(yǎng)液(DMEM/LOW GLUCOSE)均購自HyClone公司。4)胎牛血清，購自浙江天杭生物科技有限公司。5) 氯化鈉(NaCl)，二水合檸檬酸三鈉，氫氧化鈉(NaOH)，二甲基亞砜(DMSO)均為國產(chǎn)分析純。

2 方 法

2.1 藥物與試劑配制 1)生理鹽水：稱NaCl固體8.5 g，用雙蒸水溶解，用10 mol/L NaOH溶液調(diào)pH值至7.2～7.4，最后用雙蒸水定容至1 000 mL，高壓滅菌后備用。2)檸檬酸鈉溶液：分別稱量NaCl固體8.5 g、二水合檸檬酸三鈉固體15 g，溶于雙蒸水，用10 mol/L NaOH溶液調(diào)pH值至7.2～7.4，最后用雙蒸水定容至1 000 mL，高壓滅菌后備用。以上兩種溶液用前均置37 ℃培養(yǎng)箱預(yù)熱。3)藥物配制：小鼠體內(nèi)用藥用雙蒸水配制，根據(jù)亞治療劑量(ED50，25.98 mg/kg)和治療劑量(200 mg/kg)、小鼠體重和個(gè)數(shù)、用藥天數(shù)計(jì)算后分別配制；體外實(shí)驗(yàn)用藥均用DMSO配制，先配制成合適的工作濃度，4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?，體外用藥時(shí)根據(jù)實(shí)際需要濃度加入適當(dāng)體積。4)DMEM(Dulbecco-modified Minimum Eagle’Medium)完全培養(yǎng)液：按DMEM(LOW GLUCOSE)100 mL、胎牛血清20 mL、青霉素/鏈霉素溶液1.2 mL的比例配制，所用容器均需經(jīng)泡酸和滅菌處理，無菌操作，短期內(nèi)4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立

(1)日本血吸蟲單性感染小鼠模型的建立

按常規(guī)逸尾蚴方法獲得日本血吸蟲尾蚴，單只陽性釘螺逸出的日本血吸蟲尾蚴(單性)70±5條經(jīng)腹部皮膚感染每只小鼠，共150只。

(2)日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的誘導(dǎo)

將上述同時(shí)感染的小鼠分為兩組，一組作為未誘導(dǎo)對(duì)照組，另一組用于PZQ抗性蟲體誘導(dǎo)。根據(jù)本課題組前期實(shí)驗(yàn)測得的PZQ治療小鼠體內(nèi)日本血吸蟲的半數(shù)有效致死劑量(ED50，25.98 mg/kg)配制PZQ混懸液，對(duì)感染后21 d的誘導(dǎo)組小鼠進(jìn)行灌胃給藥，每天于相同時(shí)間點(diǎn)灌胃一次，每鼠給藥體積為0.3 mL，連續(xù)給藥30 d。停藥21 d，再用治療劑量(200 mg/kg)PZQ連續(xù)給藥5 d，每天一次。給藥結(jié)束2周后，同時(shí)解剖兩組小鼠，采用肝門靜脈灌注法收集蟲體。

2.3 日本血吸蟲體外培養(yǎng) 將上述收集到的雄性成蟲，置于六孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔5條蟲、3 mL DMEM完全培養(yǎng)液，分別加入不同濃度的藥物，置37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜(作用16 h)后，吸出培養(yǎng)液，用生理鹽水將蟲體清洗兩次，更換新的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)72 h，期間每隔24 h在體視顯微鏡下觀察并記錄一次蟲體活力情況，并進(jìn)行評(píng)分。

上述操作均為無菌操作。

用DMSO配制體外用藥，對(duì)照組加DMSO(參考實(shí)驗(yàn)組最高加藥量)。對(duì)照組蟲體需維持100%的存活狀態(tài)，如有污染的情況，本次實(shí)驗(yàn)視為無效。

2.4 體外培養(yǎng)日本血吸蟲活力觀察

(2)活力評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：

根據(jù)蟲體的活動(dòng)力、體態(tài)柔和度及透明度將體外培養(yǎng)的日本血吸蟲給予不同的分值，具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下：

3分：蟲體運(yùn)動(dòng)活躍、體態(tài)柔和、顏色透明。

2分：蟲體活動(dòng)力略差、體態(tài)稍僵硬、顏色為半透明；

1分：蟲體僅頭部或尾部輕微活動(dòng)、體態(tài)僵硬、顏色呈白色、不透明；

0分：蟲體仍處于收縮狀態(tài)，沒有恢復(fù)運(yùn)動(dòng)，不透明，定義為“死亡”；

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 分別將各組的蟲體存活數(shù)量、活力分值等數(shù)據(jù)輸入Excel和SPSS16.0數(shù)據(jù)庫中，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果以3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的均值表示，進(jìn)行分析。組間差異比較采用t檢驗(yàn)，樣本率比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05作為統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義的判別標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1 PZQ和DW-3-15抗日本血吸蟲成蟲的生物學(xué)效應(yīng) 表1顯示，未誘導(dǎo)蟲體在PZQ和DW-3-15濃度分別為14 μmol/L和45 μmol/L時(shí)，作用72 h后蟲體存活率均為20.0%，活力降低率均為93.3%，與未加藥組(C)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表1 PZQ和DW-3-15體外抗日本血吸蟲成蟲的臨界致死濃度

注：上述數(shù)據(jù)為4次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

Note: The above data is repeated by 4 times.

2.2 誘導(dǎo)蟲體對(duì)PZQ和DW-3-15的敏感性觀察 表2顯示，PZQ濃度為14 μmol/L時(shí)，作用72 h后誘導(dǎo)蟲體存活率仍高達(dá)100.0%，活力降低率僅為30.0%，當(dāng)PZQ濃度高達(dá)抗未誘導(dǎo)蟲體臨界致死濃度的8倍(112 μmol/L)時(shí)，作用72 h后蟲體存活率降低為35.0%，活力降低率達(dá)到88.3%，與未誘導(dǎo)蟲體相比，均具有顯著性差異(P<0.01)，提示誘導(dǎo)蟲體對(duì)PZQ的敏感性明顯降低；而DW-3-15濃度為45 μmol/L時(shí)，作用72 h后誘導(dǎo)蟲體存活率僅為30.0%，活力降低率達(dá)到90.0%，與未誘導(dǎo)蟲體相比沒有顯著性差異(P>0.05)，提示PZQ抗性蟲體對(duì)DW-3-15的敏感性沒有改變。

2.3 未誘導(dǎo)蟲體和PZQ抗性蟲體的形態(tài)與活力觀察

2.3.1 未誘導(dǎo)和誘導(dǎo)蟲體經(jīng)PZQ和DW-3-15作用后即時(shí)形態(tài)學(xué)觀察 圖1所示，PZQ濃度為14 μmol/L時(shí)，加藥后未誘導(dǎo)蟲體迅速收縮、運(yùn)動(dòng)停止、透明度降低(圖1-A1)，而抗性蟲體反應(yīng)不如未誘導(dǎo)蟲體劇烈，蟲體收縮程度較小，尚有部分蟲體仍有輕微運(yùn)動(dòng)，體態(tài)僵硬程度較低，透明度降低不明顯(圖1-A2)；PZQ濃度升高至112 μmol/L時(shí)，抗性蟲體才出現(xiàn)明顯收縮、運(yùn)動(dòng)停止、透明度降低明顯(圖1-A3)；DW-3-15濃度為45 μmol/L時(shí)，抗性蟲體和未誘導(dǎo)蟲體反應(yīng)差別不明顯，均表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)停止、透明度降低，僅蜷縮程度稍有區(qū)別，未誘導(dǎo)蟲體蜷縮更明顯(圖1-B1、B2)。DMSO對(duì)照組蟲體活力狀況良好(圖1-C)。

2.3.2 未誘導(dǎo)和誘導(dǎo)蟲體經(jīng)PZQ和DW-3-15作用72 h后的形態(tài)學(xué)觀察 圖2所示，PZQ作用濃度為14 μmol/L時(shí)，未誘導(dǎo)蟲體仍處于收縮狀態(tài)、運(yùn)動(dòng)未恢復(fù)、呈白色不透明、腫脹明顯(圖2-A1)，而抗性蟲體活力恢復(fù)較明顯，蟲體收縮程度較小，尚有部分蟲體頭部和尾部輕微運(yùn)動(dòng)，體態(tài)僵硬程度較輕，仍呈半透明狀態(tài)、腫脹輕微(圖2-A2)；當(dāng)PZQ濃度升高至112 μmol/L時(shí)，抗性蟲體才出現(xiàn)明顯收縮、蟲體僵硬、運(yùn)動(dòng)未恢復(fù)(圖2-A3)；DW-3-15濃度為45 μmol/L時(shí)，抗性蟲體和未誘導(dǎo)蟲體形態(tài)無差別，均表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)未恢復(fù)、透明度降低、蟲體僵硬(圖2-B1、B2)。DMSO對(duì)照組蟲體活力狀況良好(圖2-C)。

表2 誘導(dǎo)蟲體經(jīng)不同濃度PZQ和DW-3-15作用后的蟲體活力

注：上述數(shù)據(jù)為4次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

Note: The above data is repeated by 4 times.

PZQ組：A1(未誘導(dǎo)蟲體，14 μmol/L)，A2(誘導(dǎo)蟲體，14 μmol/L)，A3(誘導(dǎo)蟲體，112 μmol/L) DW-3-15組：B1(未誘導(dǎo)蟲體，45 μmol/L)，B2(誘導(dǎo)蟲體，45 μmol/L) 對(duì)照組：C(未誘導(dǎo)蟲體，8 μL DMSO) PZQ Group: A1 (uninduced worms, 14 μmol/L)，A2 (induced worms, 14 μmol/L)，A3 (induced worms, 112 μmol/L) DW-3-15 Group: B1 (uninduced worms, 45 μmol/L)，B2 (induced worms, 45 μmol/L) Control Group: C (uninduced worms, 8 μL DMSO) 注：未加藥對(duì)照組與DMSO對(duì)照組蟲體形態(tài)一致。 The morphology of worms in the group with no drug is the same as the DMSO group.

圖1 未誘導(dǎo)和誘導(dǎo)蟲體經(jīng)PZQ和DW-3-15作用后的即時(shí)形態(tài)

Fig.1 Instant morphology of worms post-exposure to PZQ and DW-3-15

3 討 論

PZQ抗血吸蟲的作用機(jī)制仍不清楚[13]，這在很大程度上限制了抗血吸蟲新藥的研發(fā)進(jìn)展，而抗藥性病原體的出現(xiàn)往往比新藥物的研發(fā)速度快[14]。所以，在已有抗血吸蟲藥物基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)與PZQ作用靶點(diǎn)不同的衍生物將可能是一條有效途徑。

PZQ組：A1(未誘導(dǎo)蟲體，14 μmol/L)，A2(誘導(dǎo)蟲體，14 μmol/L)，A3(誘導(dǎo)蟲體，112 μmol/L) DW-3-15組：B1(未誘導(dǎo)蟲體，45 μmol/L)，B2(誘導(dǎo)蟲體，45 μmol/L) 對(duì)照組：C(誘導(dǎo)蟲體，8μL DMSO) PZQ Group：A1(uninduced worms，14 μmol/L)，A2(induced worms，14 μmol/L)，A3(induced worms，112 μmol/L) DW-3-15 Group：B1(uninduced worms，45 μmol/L)，B2(induced worms，45 μmol/L) Control Group：C(induced worms，8 μL DMSO) 注：未加藥對(duì)照組與DMSO對(duì)照組蟲體形態(tài)一致。 The morphology of worms in the group with no drug is the same as the DMSO group.

圖2 未誘導(dǎo)和誘導(dǎo)蟲體經(jīng)PZQ和DW-3-15作用72 h后形態(tài)

Fig.2 The morphology of worms 72 h post-exposure to PZQ and DW-3-15

1994年，F(xiàn)allon等[15]首次證實(shí)在實(shí)驗(yàn)室條件下通過連續(xù)藥物壓力可以建立抗PZQ曼氏血吸蟲蟲株，之后在非洲血吸蟲病流行區(qū)塞內(nèi)加爾和埃及，相繼發(fā)現(xiàn)了對(duì)PZQ耐受的曼氏血吸蟲蟲株[16-17]。實(shí)驗(yàn)室和現(xiàn)場不斷出現(xiàn)的血吸蟲耐藥或抗藥現(xiàn)象，引起科研工作者的廣泛關(guān)注。

Coles等[18]認(rèn)為血吸蟲耐藥性(tolerance)是指血吸蟲對(duì)藥物先天性不敏感，在蟲體未暴露于藥物之前就已具有。如埃及血吸蟲對(duì)奧沙尼喹(oxamniquine)天然耐受。血吸蟲抗藥性(resistance)是指原來對(duì)藥物敏感的種群出現(xiàn)了對(duì)該藥物的反應(yīng)性顯著下降，或者與一個(gè)完全敏感種群相比，此種群對(duì)該藥物的反應(yīng)性明顯低下，即認(rèn)為此種群具有了抗藥性。抗藥性是可遺傳的。這種改變的原因是種群中對(duì)藥物反應(yīng)性低下蟲體數(shù)量的增加。抗藥程度可以是部分的、也可以是完全的，當(dāng)宿主可耐受的最大劑量藥物對(duì)血吸蟲無效時(shí)，即是完全抗藥。

另有研究者對(duì)實(shí)驗(yàn)室抗藥性血吸蟲誘導(dǎo)方法進(jìn)行改進(jìn)，為血吸蟲抗藥性相關(guān)研究提供手段。如Flávia FB Couto等[19]為闡明血吸蟲抗藥機(jī)制，創(chuàng)建了一種新的、有效、快速、簡單而價(jià)廉的抗藥性誘導(dǎo)方法。他們采用100 mg/kg PZQ處理感染曼氏血吸蟲的光滑雙臍螺，連續(xù)5 d，共作用3次，每次間隔1周。然后應(yīng)用這些光滑雙臍螺逸出的尾蚴感染小鼠，之后進(jìn)行的一系列體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)了經(jīng)誘導(dǎo)后的成蟲對(duì)PZQ的敏感性明顯降低。其中體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示，用PZQ治療小鼠后，體內(nèi)蟲負(fù)荷較未誘導(dǎo)對(duì)照組明顯升高，PZQ ED50值也明顯升高。

本課題組在日本血吸蟲PZQ抗性蟲體誘導(dǎo)方法上也進(jìn)行了一系列探索和實(shí)驗(yàn)，已建立本實(shí)驗(yàn)室較穩(wěn)定的誘導(dǎo)方法[20]。

首先應(yīng)用PHARM verson4.2軟件測得本批次片劑PZQ抗小鼠體內(nèi)日本血吸蟲的ED50值為25.98 mg/kg[12]。然后采用此劑量對(duì)感染單性日本血吸蟲的小鼠于21 d后進(jìn)行灌胃給藥誘導(dǎo)抗性蟲體。

青蒿琥酯是青蒿素衍生物，最初用作抗瘧藥，研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)日本血吸蟲童蟲(7～35 d)具有明顯殺傷作用[21]。PZQ對(duì)所有種類血吸蟲均有效，但只對(duì)血吸蟲成蟲作用明顯，抗童蟲效應(yīng)很弱[22]。基于PZQ和青蒿琥酯各自具有的抗血吸蟲優(yōu)勢，本課題組采用PZQ與青蒿琥酯的功能基團(tuán)O-O橋拼接合成獲得PZQ衍生物DW-3-15[23]。

前期研究表明DW-3-15在體外和體內(nèi)對(duì)日本血吸蟲成蟲和童蟲均具有顯著的抗蟲效應(yīng)。作用于小鼠體內(nèi)不同發(fā)育階段(1、3、7、14、21、35 d)的蟲體，可使減蟲率達(dá)到60～85%，抗童蟲效應(yīng)與青蒿琥酯相當(dāng)，并優(yōu)于PZQ，抗成蟲作用與PZQ相仿，特別對(duì)整個(gè)童蟲期及幼蟲與成蟲混合感染小鼠模型中均顯示良好的抗蟲效果[24]。

本研究進(jìn)一步觀察DW-3-15對(duì)日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學(xué)效應(yīng)，評(píng)價(jià)PZQ抗性蟲體對(duì)DW-3-15是否存在交叉抗性，從而對(duì)DW-3-15作為抗血吸蟲新藥的潛在價(jià)值做出有意義的評(píng)價(jià)。

研究結(jié)果顯示誘導(dǎo)蟲體對(duì)PZQ敏感性明顯下降，PZQ作用于誘導(dǎo)蟲體的臨界致死濃度是未誘導(dǎo)蟲體的8倍(112 μmol/L)；而誘導(dǎo)蟲體對(duì)DW-3-15的敏感性沒有明顯改變，臨界致死濃度與未誘導(dǎo)蟲體相同，均為45 μmol/L。提示PZQ抗性蟲體對(duì)DW-3-15沒有交叉抗性，DW-3-15的作用靶點(diǎn)可能與PZQ不同。

DW-3-15對(duì)日本血吸蟲成蟲及童蟲均具有良好的抗蟲效應(yīng)，在血吸蟲病的預(yù)防和早期治療中具有重要意義。本研究結(jié)果證明PZQ抗性蟲體對(duì)DW-3-15沒有交叉抗性，作用靶點(diǎn)可能與PZQ不同，顯示PZQ衍生物DW-3-15具有作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價(jià)值，值得進(jìn)一步深入研究。

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Xia Chao-ming, Email: xia-chaoming@163.com

Biological effects of DW-3-15 against praziquantel-resistantSchistosomajaponicum

ZHAO Bo,GUAN Zhi-xun,DUAN Zhong-liang,XU Jing,CAO Yun,LIN Cai,WANG Yan-yan,XIA Chao-ming

(DepartmentofParasitology,MedicalCollegeofSoochowUniversity,Suzhou215123,China)

Resistance to praziquantel (PZQ) forS.japonicumwas induced to evaluate whether there is cross resistance to the PZQ derivative DW-3-15 for PZQ-resistant adult worms ofS.japonicum. The mice infected withS.japonicumwere given subcurative (effective dose required to kill 50% of the worms, ED50) PZQ orally on the 21st day after infection, for 30 consecutive days. Then with 21 days interval mice were treated again with curative (200 mg/kg) PZQ for 5 successive days. Two weeks post-treatment,invitro, we observed that the critical lethal concentration (the lowest dose required to make 72 h vitality reduction reach to 90%) of PZQ against adult worms induced was eight times as high as uninducible worms, while the critical lethal concentration of DW-3-15 against PZQ-resistant adult worms was the same as that of the uninducible. The data revealed that PZQ-resistant adult worms showed no cross resistance to DW-3-15. These results indicate that the targets of PZQ and DW-3-15 againstS.japonicummay be different. DW-3-15 will perhaps be a potentially novel drug for treatment of schistosomiasis.

Schistosomajaponicum; praziquantel; DW-3-15; cross resistance

10.3969/j.issn.1002-2694.2015.09.002

國家863項(xiàng)目(No.2012AA0203006)資助

夏超明，Email:xia-chaoming@163.com

蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部病原生物學(xué)系，蘇州 215123

Supported by the National 863 Project (No. 2012 aa0203006)

R383.2

A

1002-2694(2015)09-0789-06

2015-04-01；

2015-07-14