尤愛(ài)國(guó)，楊建華，唐曉燕，許汴利，康 鍇，杜燕華，黃學(xué)勇

新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征的危險(xiǎn)因素分析

尤愛(ài)國(guó)1，楊建華2，唐曉燕1，許汴利1，康 鍇1，杜燕華1，黃學(xué)勇1

目的 探討新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征發(fā)病的危險(xiǎn)因素。方法 采用1∶2配對(duì)的病例-對(duì)照研究，對(duì)40例病例和80例對(duì)照進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，同時(shí)采集患者血清標(biāo)本，應(yīng)用熒光RT-PCR和IgM、IgG抗體試劑盒檢測(cè)新布尼亞病毒核酸及抗體。采用條件Logistic回歸分析發(fā)病的危險(xiǎn)因素。結(jié)果 病例組農(nóng)民占90.00%(36/40)，顯著高于對(duì)照組62.50%(50/80)(P<0.01)。病例組暴露于養(yǎng)狗、養(yǎng)貓、養(yǎng)牛、家禽養(yǎng)殖、生活區(qū)周?chē)序?、病?月被蜱叮咬、從事田間作業(yè)、工作區(qū)及住宅周?chē)须s草灌木的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于對(duì)照組(OR值均大于1，P值均小于0.05)。多因素分析表明，在調(diào)整了性別、年齡、民族和職業(yè)因素后，生活區(qū)周?chē)序?OR=5.44,P<0.01)是新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征發(fā)病的危險(xiǎn)因素。結(jié)論 不同形式的蜱暴露為新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征的危險(xiǎn)因素。

發(fā)熱伴血小板減少綜合征；新布尼亞病毒；危險(xiǎn)因素；病例-對(duì)照研究

CenterforDiseaseControlandPrevention,Zhengzhou450016,China;2.DepartmentofImmunization,ChengdongluCommunityHealthServiceCenter,Zhengzhou450004,China)

2007年以來(lái)，河南省采取主動(dòng)搜索和通過(guò)專(zhuān)項(xiàng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)在信陽(yáng)、南陽(yáng)地區(qū)發(fā)現(xiàn)一些以發(fā)熱伴血小板、白細(xì)胞減少為特征的不明原因病例，繼之湖北、山東、江蘇等毗鄰省份亦發(fā)現(xiàn)有類(lèi)似病例，后命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征(也稱(chēng)發(fā)熱伴血小板、白細(xì)胞減少綜合征)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確認(rèn)，少數(shù)病例發(fā)現(xiàn)有無(wú)形體感染的證據(jù)，多數(shù)病例標(biāo)本發(fā)現(xiàn)一種新的病毒—新布尼亞病毒[1-2]。該病病死率高，嚴(yán)重威脅人民的健康和生命，受到群眾與媒體的廣泛關(guān)注。目前，已初步描述了該病的臨床與流行病學(xué)分布特征[1,3]。為了解新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征的傳播途徑及發(fā)病危險(xiǎn)因素，特于2011年4-10月在信陽(yáng)市開(kāi)展了調(diào)查，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象 病例和對(duì)照均來(lái)自信陽(yáng)市有代表性的3家縣級(jí)以上綜合醫(yī)院。該研究已獲得河南省疾病預(yù)防控制中心倫理委員會(huì)批準(zhǔn)和研究對(duì)象的知情同意。病例診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《發(fā)熱伴血小板減少綜合征防治指南》[4]。對(duì)照選擇標(biāo)準(zhǔn)為與病例同性別、年齡相差不超過(guò)5歲，且與病例在同一病區(qū)，血清學(xué)IgG檢測(cè)陰性的對(duì)象。按照1∶2比例選擇對(duì)照。

1.2 方法與內(nèi)容 采用《發(fā)熱伴血小板減少綜合征危險(xiǎn)因素調(diào)查表》，由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的調(diào)查員通過(guò)面對(duì)面詢(xún)問(wèn)方式收集相關(guān)信息，同時(shí)采集患者血液標(biāo)本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。調(diào)查內(nèi)容包括研究對(duì)象的一般情況(年齡、性別、民族、住址、職業(yè)、聯(lián)系方式等)、家庭居住環(huán)境(家庭居住位置、環(huán)境、家禽及家畜飼養(yǎng)情況等)、暴露史(發(fā)病前1月內(nèi)勞動(dòng)、旅行史、蜱叮咬史、與類(lèi)似病例接觸情況等)、宿主媒介調(diào)查(病例居住地和生產(chǎn)活動(dòng)周?chē)h(huán)境的動(dòng)物種類(lèi)、媒介等)。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

1.3.1 熒光RT-PCR進(jìn)行核酸檢測(cè) 無(wú)菌操作采取病人急性期靜脈血于無(wú)抗凝劑采血管內(nèi)，室溫或4 ℃靜置使血凝固，離心后，取140 μL血清，應(yīng)用RNA提取試劑盒(QIAamp Viral RNA Mini Kit，QIAGEN 52904)提取RNA。使用本實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的新型布尼亞病毒特異性引物和探針，以及一步法熒光PCR試劑盒(QIAGEN QuantiTectTM Probe RT-PCR Kit catalog #204443)進(jìn)行擴(kuò)增，反應(yīng)條件50 ℃ 30 min 1 cycle；95 ℃15 min 1 cycle；95 ℃ 15 s，60 ℃ 45 s* 40 cycles(*為熒光信號(hào)采集步驟)。檢測(cè)結(jié)果Ct值<35為陽(yáng)性，>40為陰性，在35～40之間為可疑樣品，需重復(fù)檢測(cè)。

1.3.2 IgM、IgG抗體檢測(cè) 應(yīng)用北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司(京藥監(jiān)械生產(chǎn)許20040097號(hào))生產(chǎn)的HB29-IgM抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，HB29-IgG抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)和新布尼亞病毒抗原片(本實(shí)驗(yàn)室制備)檢測(cè)病例和對(duì)照血液中相應(yīng)的抗體。樣品A值≥臨界值者為抗體反應(yīng)陽(yáng)性，<臨界值者為抗體反應(yīng)陰性。

1.4 質(zhì)量控制 對(duì)調(diào)查員進(jìn)行培訓(xùn)，培訓(xùn)合格方可進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。調(diào)查結(jié)束后，及時(shí)對(duì)問(wèn)卷進(jìn)行審核，填寫(xiě)漏缺項(xiàng)。調(diào)查資料經(jīng)雙錄入，并進(jìn)行一致性檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 研究對(duì)象的基本特征 本次共調(diào)查40例病例和80例對(duì)照。病例組與對(duì)照組在民族構(gòu)成方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩者在職業(yè)構(gòu)成方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。研究對(duì)象的基本特征詳見(jiàn)表1。

表1 研究對(duì)象的基本特征

2.2 單因素分析 病例組在養(yǎng)狗、養(yǎng)貓、養(yǎng)牛、家禽養(yǎng)殖、生活區(qū)周?chē)序?、病?月被蜱叮咬、從事田間作業(yè)、工作區(qū)及住宅周?chē)须s草灌木方面的比例顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同組別危險(xiǎn)因素暴露情況見(jiàn)表2。

表2 不同組別危險(xiǎn)因素暴露情況比較

表2(續(xù))

注：# 為連續(xù)性校正卡方

Note: # means continuity corrected chi-square.

2.3 多因素分析 在單因素分析的基礎(chǔ)上進(jìn)行多因素分析，挑選單因素分析有意義的變量為篩選變量，進(jìn)行多因素分析。入選與排除標(biāo)準(zhǔn)分別為：sle=0.05，sls=0.05。新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征的危險(xiǎn)因素與賦值情況如下：是否患發(fā)熱伴血小板減少綜合征(1=是，0=否)、性別(1=男，0=女)、年齡(數(shù)值變量)、民族(1=漢、0=其他)、職業(yè)(1=農(nóng)民、0=其他)、養(yǎng)狗(1=是，0=否)、養(yǎng)貓(1=是，0=否)、養(yǎng)牛(1=是，0=否)、飼養(yǎng)家禽(1=是，0=否)、生活區(qū)周?chē)袩o(wú)見(jiàn)過(guò)蜱(1=有，0=無(wú))、病前1月被蜱叮咬(1=是，0=否)、從事田間作業(yè)(1=是，0=否)、工作區(qū)周?chē)袩o(wú)雜草灌木(1=有，0=無(wú))和住宅周?chē)s草灌木生長(zhǎng)(1=有，0=無(wú))。

在調(diào)整了性別、年齡、民族和職業(yè)因素后，生活區(qū)周?chē)序?OR=5.44,95%CI：1.71～17.37)為新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征的危險(xiǎn)因素。多因素分析結(jié)果詳見(jiàn)表3。

表3 發(fā)熱伴血小板減少綜合征發(fā)病危險(xiǎn)因素的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

發(fā)熱伴血小板減少綜合征是一類(lèi)新發(fā)傳染病，其病原有新布尼亞病毒[1]，也不排除其他病原體感染的可能[5]?；颊叩呐R床表現(xiàn)相似，急性起病，發(fā)熱、全身不適、乏力、頭痛、肌肉酸痛，以及惡心、嘔吐、厭食、腹瀉等；重癥病例可出現(xiàn)皮膚瘀斑、出血、多臟器損傷、彌漫性血管內(nèi)凝血等[1, 6]。該病需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方可確診病原，因此在臨床上極易被誤診為流行性出血熱等疾病[7]。國(guó)內(nèi)一些省份起初是按無(wú)形體病感染或疑似無(wú)形體感染進(jìn)行報(bào)告的[8-9]。該病多發(fā)于夏、秋季，人群普遍易感，在丘陵、山地、森林等地區(qū)生活、生產(chǎn)的居民和勞動(dòng)者以及赴該類(lèi)地區(qū)戶(hù)外活動(dòng)的旅游者感染風(fēng)險(xiǎn)較高。

該研究結(jié)果顯示，病例組在養(yǎng)狗、養(yǎng)貓、養(yǎng)牛及家禽養(yǎng)殖方面的比例顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示家養(yǎng)動(dòng)物(如豬、牛、狗及家禽等)可能是該病的貯存宿主。家養(yǎng)動(dòng)物的喂養(yǎng)方式對(duì)病例發(fā)病具有一定的影響，放養(yǎng)較圈養(yǎng)具有更高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[10]。病例組和對(duì)照組在家中是否有老鼠、是否捕鼠、是否接觸死鼠及野生動(dòng)物方面構(gòu)成差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示家鼠和野生動(dòng)物可能不是該病的貯存宿主。

有研究表明，新布尼亞病毒感染所致發(fā)熱伴血小板減少綜合征的急性期病人及尸體血液和血性分泌物具有傳染性，直接接觸病人血液或血性分泌物可導(dǎo)致感染[11-13]。該研究單因素分析顯示，病例組和對(duì)照組在親戚或鄰居發(fā)病、是否接觸發(fā)病親戚或鄰居及近1個(gè)月外出方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是由于樣本量太小，未能發(fā)現(xiàn)二者之間的差異，尚需進(jìn)一步研究。

該病傳播途徑尚不完全明確，發(fā)病也可能與蜱叮咬有關(guān)。該研究單因素和多因素分析結(jié)果均表明，生活區(qū)周?chē)序缡切虏寄醽啿《靖腥局掳l(fā)熱伴血小板減少綜合征的危險(xiǎn)因素，與Fan Ding等人研究結(jié)果一致[14]，提示蜱很可能為該病的傳播媒介，蜱叮咬有可能是該病的另外一種傳播途徑。

為有效防控新布尼亞病毒感染致發(fā)熱伴血小板減少綜合征，減少該病的發(fā)生，應(yīng)做好疾病監(jiān)測(cè)工作，防止聚集性病例及暴發(fā)疫情發(fā)生；在高發(fā)區(qū)高危人群中開(kāi)展發(fā)熱伴血小板減少綜合征防病知識(shí)宣傳，使當(dāng)?shù)厝罕娬莆赵摬》乐渭邦A(yù)防蜱叮咬的知識(shí)；大力開(kāi)展愛(ài)國(guó)衛(wèi)生運(yùn)動(dòng)，進(jìn)行環(huán)境整治，并采取措施滅蜱，以降低生產(chǎn)、生活環(huán)境中的蜱密度。

(本調(diào)查得到信陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心、信陽(yáng)市154醫(yī)院、商城縣疾病預(yù)防控制中心、商城縣人民醫(yī)院、平橋區(qū)疾病預(yù)防控制中心、光山縣疾病控制中心和光山縣人民醫(yī)院的大力支持與參與，特此感謝)。

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You Ai-guo, Email: youaiguo11@126.com

Risk factors of severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) infected by SFTSV

YOU Ai-guo1,YANG Jian-hua2,TANG Xiao-yan1,XU Bian-li1,KANG Kai1,DU Yan-hua1,HUANG Xue-yong1

(1.InstituteforInfectiousDiseaseControlandPrevention,HenanProvincial

To explore the risk factors of severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) infected by severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV), 1∶2 matched case-control study was used in this study. Questionnaires and serum were collected from 40 cases and 80 controls. SFTSV was tested using fluorescent RT-PCR and antibody reagent kits. The risk factors of SFTS were selected by conditional logistic regression. The proportion of farmers in case group was 90.00% (36/40) and significantly higher than that in control group (50/80),Pvalue was less than 0.05. The risk of exposure to dog, cat, cattle, poultry, living areas surround by ticks, tick bites, engaging in the field work, work and living areas surrounded by weeds and shrubs in case group was higher than that in control group, all odd ratios were more than 1.00 andPvalues were less than 0.05. Multi-factors analysis showed that, after adjusted for gender, age, nations and occupations, presence of ticks in living area (OR=5.44,P<0.01) was the risk factor of SFTS. The exposure to ticks may be the risk factor of SFTS.

severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS); severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV); risk factors; case-control study

10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.08.004

尤愛(ài)國(guó)，Email: youaiguo11@126.com

河南省疾病預(yù)防控制中心，鄭州 450016

Funded by the Medical Science Research Projects in Henan Province (No. 201203158)

R373

A

1002-2694(2015)08-0704-05

2014-11-06；

2015-03-23

河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)項(xiàng)目(No. 201203158)資助