王淑華

MIP-1α和INF-γ在結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中的表達(dá)

王淑華

目的 探討巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α (MIP-1α)和γ-干擾素 (INF-γ)在結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中的表達(dá)及臨床意義。方法 ELISA法測定早期和中晚期結(jié)核性腦膜炎患者(早期、中晚期結(jié)核性腦膜炎組)腦脊液各60例、惡性腦瘤患者(惡性腦瘤組)腦脊液75例及30例健康人(對照組)腦脊液中MIP-1α和INF-γ的濃度, 評價(jià)MIP-1α和INF-γ聯(lián)合檢測在結(jié)核性腦膜炎中的臨床價(jià)值。結(jié)果 MIP-1α、INF-γ在早期結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中水平為(10.63±2.47)pmol/L、(7.85±2.08)μg/L,在中晚期腦膜炎患者腦脊液中的水平為(18.19±4.62)pmol/L、(12.86±3.02)μg/L, 在腦瘤患者腦脊液中的水平為(3.01±1.17)pmol/L、(2.73±0.96)μg/L, 在健康人腦脊液中的水平為(1.09±0.67)pmol/L、(0.82±0.77) μg/L, 早期和中晚期結(jié)核性腦膜炎組與惡性腦瘤組及對照組比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)；早期結(jié)核性腦膜炎組和中晚期結(jié)核性腦膜炎組比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。MIP-1α和INF-γ在結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中的表達(dá)水平與結(jié)核性腦膜炎正呈相關(guān)。結(jié)論 MIP-1α和INF-γ在結(jié)核性腦膜炎腦脊液中表達(dá)的水平明顯高于腦瘤患者及健康人腦脊液中的表達(dá)水平。

結(jié)核性腦膜炎；腦脊液；巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α；γ-干擾素

目前結(jié)核性腦膜炎診斷的實(shí)驗(yàn)室可靠指標(biāo)為：①腦脊液涂片抗酸染色找抗酸桿菌：陽性率很低, 難以早期發(fā)現(xiàn)。②腦脊液培養(yǎng)：培養(yǎng)條件要求較高, 培養(yǎng)周期長, 且大多數(shù)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室難以開展。③腦膜腦組織活檢：有一定的危險(xiǎn)性,難于滿足臨床要求。本文通過聯(lián)合檢測MIP-1α、INF-γ在腦脊液中的表達(dá)水平, 旨在為結(jié)核性腦膜炎早期診斷探討一個(gè)簡單、快速、可靠的方法?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 120例結(jié)核性腦膜炎患者, 均為2010年3月～2014年3月在本院傳染科住院患者。其中, 男61例, 年齡14～75歲, 女59例, 年齡16～78歲, 平均年齡46.7歲。此120例患者均有結(jié)核中毒癥狀, 玻片離心沉淀法收集腦脊液細(xì)胞, 并進(jìn)行抗酸染色, 找到抗酸桿菌, 結(jié)核菌素試驗(yàn)(PPD)強(qiáng)陽性, 血液和腦脊液結(jié)核抗體測定陽性, 頭顱CT改變, 再結(jié)合臨床癥狀, 確診為結(jié)核性腦膜炎(早期結(jié)核腦膜炎組60例, 中晚期結(jié)核性腦膜炎組60例)。120例患者經(jīng)規(guī)則抗癆治療后, 腦部病變吸收。75例惡性腦瘤患者(惡性腦瘤組),均為2010年3月～2014年3月在本院神經(jīng)外科住院患者,均經(jīng)頭顱CT、組織病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)證實(shí)。無其他疾病。30例健康人(對照組)均為2010年3月～2014年3月來本院體檢中心做健康體檢者, 無結(jié)核患者的密切接觸史, 頭顱CT陰性, PPD陰性, 無結(jié)核性疾病及其他疾病。四組一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 主要試劑 IFN-γ試劑盒(深圳晶美生物科技有限公司);MIP-1α試劑盒(美國ADL生物科技有限公司)。

1.3 主要設(shè)備 酶聯(lián)免疫檢測儀(美國Instruments.Inc), 型號：EL×800。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 所有入選患者在無菌條件下做腰穿抽取腦脊液3 mml, 離心取上清液2 mml凍存于-80℃冰箱中統(tǒng)一待用于ELISA法測趨化因子MIP-1α、INF-γ, 剩余的沉渣用于涂片抗酸染色找抗酸桿菌。按照試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。以 P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

早期和中晚期結(jié)核性腦膜炎組與惡性腦瘤組及對照組比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)；早期結(jié)核性腦膜炎組和中晚期結(jié)核性腦膜炎組比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。見表1。

表1 四組腦脊液中MIP-1α和INF-γ水平比較

表1 四組腦脊液中MIP-1α和INF-γ水平比較

注：與對照組和惡性腦瘤組比較,aP＜0.001；與早期結(jié)核性腦膜炎組比較,bP＜0.001

組別例數(shù)MIP-1α(pmol/L)INF-γ(μg/L)對照組30 1.09±0.67 0.82±0.77早期結(jié)核性腦膜炎組60 10.63±2.47a7.85±2.08a中晚期結(jié)核性腦膜炎組60 18.19±4.62ab11.86±3.02ab惡性腦瘤組75 3.01±1.17 2.73±0.96 P＜0.001＜0.001

3 討論

目前, 結(jié)核性腦膜炎實(shí)驗(yàn)室診斷的指標(biāo)都不太理想, 所以尋找簡單快速、可靠、經(jīng)濟(jì)的輔助診斷指標(biāo)有一定的臨床價(jià)值。本文通過檢測MIP-1α、INF-γ在四組(早期、中晚期結(jié)核性腦膜炎組、惡性腦瘤組、對照組)腦脊液中的水平, 對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理, 結(jié)果：結(jié)核性腦膜炎組明顯高于惡性腦瘤組及對照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001),早期與中晚期結(jié)核性腦膜炎組相比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。本文證實(shí)聯(lián)合檢測腦脊液中MIP-1α和INF-γ水平, 再結(jié)合臨床, 對結(jié)核性腦膜炎的早期診斷有較高價(jià)值,結(jié)核(TB)對趨化因子的表達(dá)有直接的誘導(dǎo)作用, TB細(xì)胞壁的組成成分可能在誘導(dǎo)中起關(guān)鍵性作用。在感染后數(shù)小時(shí)即可檢測到MIP-1α的表達(dá)［1］, 在TB的誘導(dǎo)下, 顱內(nèi)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的MIP-1α比血單核細(xì)胞產(chǎn)生的明顯多［2］, 而且感染的TB的毒力越強(qiáng), 人類巨噬細(xì)胞產(chǎn)生趨化因子MIP-1α的能力就越強(qiáng)［3］。TB及其分解產(chǎn)物能夠引發(fā)病變局部的炎癥反應(yīng)和全身反應(yīng)。在結(jié)核性腦膜炎中以局部的細(xì)胞免疫為主。在病變部位有大量免疫細(xì)胞的聚集。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn), TB及其產(chǎn)物等能夠活化局部的淋巴細(xì)胞, 被活化的淋巴細(xì)胞主要是(CD4T細(xì)胞)會(huì)產(chǎn)生大量的INF-γ［4］。INF-γ是一種重要的免疫調(diào)節(jié)因子, 它還能夠激活巨噬細(xì)胞, 促進(jìn)細(xì)胞因子的釋放, 增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用。本實(shí)驗(yàn)中結(jié)核性腦膜炎腦脊液中MIP-1α和INF-γ呈正相關(guān), 也說明了二者之間存在一定的關(guān)系。

Atanackovic等通過研究良、惡性腦瘤滲出的T淋巴細(xì)胞發(fā)現(xiàn)：在惡性腦瘤中效應(yīng)型T細(xì)胞和極化1型T細(xì)胞聚集不充分, 同時(shí)還發(fā)現(xiàn)自然殺傷細(xì)胞和具有潛在細(xì)胞毒性的細(xì)胞聚集不充分。這可能是導(dǎo)致惡性腦瘤中MIP-1α、INF-γ等細(xì)胞因子不能大量產(chǎn)生的重要原因。本研究顯示結(jié)核性腦膜炎腦脊液中MIP-1α和INF-γ的水平明顯高于惡性腦瘤患者及對照組腦脊液中的水平。

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Expressions of MIP-1α and INF-γ in cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis patients

WANG Shuhua.Department of Detection, Shandong Heze Municipal Hospital, Heze 274031, China

Objective To explore the expressions and clinical significance of macrophage inflammatory protein-1α (MIP-1α) and γ-interferon (INF-γ) in cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis patients.Methods The concentration of MIP-1α and INF-γ were detected by ELISA method in the cerebrospinal fluid of 60 early tuberculous meningitis patients, 60 middle-late tuberculous meningitis patients (early and middlelate tuberculous meningitis group), 75 malignant cerebrum patients (malignant cerebrum group) and 30 healthy people (control group).The clinical value of joint detection of MIP-1α and INF-γ in tuberculous meningitis was evaluated.Results The levels of MIP-1α and INF-γ were (10.63±2.47) pmol/L and (7.85±2.08) μg/ L in the cerebrospinal fluid of early tuberculous meningitis patients, (18.19±4.62) pmol/L and (12.86±3.02) μg/L in middle-late tuberculous meningitis patients, (3.01±1.17) pmol/L and (2.73±0.96) μg/L in cerebrum patients, and (1.09±0.67) pmol/L and (0.82±0.77) μg/L in healthy people.There was statistically significant difference between the early and middle-late tuberculous meningitis group, the malignant cerebrum group, and the control group (P＜0.001).The difference between early tuberculous meningitis group and middle-late tuberculous meningitis group was also statistically significant (P＜0.001).Conclusion The expression levels of MIP-1α and INF-γ in the cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis are obviously higher than those in cerebrum patients and healthy people.

Tuberculous meningitis; Cerebrospinal fluid; Macrophage inflammatory protein-1α; γ-interferon

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.02.009

2014-08-18］

274031 山東菏澤市立醫(yī)院檢驗(yàn)科