許涼涼 伊 辛 尹雪雁 魏文浩 蔡程科

(1北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京，100102;2北京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，北京，100029)

牙膏作為人們的生活日常用品，在清潔口腔、預(yù)防口腔疾病中有著重要的作用。目前功效性牙膏越來(lái)越受到人們的青睞［1-2］，它既起到了普通牙膏的清潔作用，又對(duì)口腔疾病如牙齦炎等起到一定的預(yù)防和治療作用［3-4］。

我國(guó)中藥資源豐富，訶子、寒水石、白礬等主要分布于云南、西藏等地，是當(dāng)?shù)氐某Ｓ貌厮?。訶子具有澀腸止瀉、斂肺止咳、降火利咽之效，在藏藥中甚至被視為“藥中之王”，民間多用于口腔等多種疾病的治療，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有廣泛的抗菌和抗炎鎮(zhèn)痛作用［5-6］，部分研究表示酚酸類、黃酮類、三萜類是訶子藥理活性的主要有效物質(zhì)［7］。寒水石為碳酸鹽類礦物方解石族方解石或硫酸鹽類礦物紅石膏的礦石，在西藏地區(qū)使用的寒水石一般為碳酸鹽類礦物方解石的晶體［8］，具有清熱降火、利竅、消腫，治積熱煩渴、齒衄、燙傷等，治療牙齒內(nèi)出血等［9］。白礬性寒，味酸澀，具有祛痰、燥濕止血、止瀉功效，經(jīng)研究證明其具有消炎、止血、抑菌等藥理作用，臨床上可用于口瘡等疾病的治療［10-11］。該方來(lái)源于著名藏醫(yī)學(xué)家，藏學(xué)五明學(xué)大師局麥彭朗杰嘉措文集，該文集是目前藏區(qū)乃至全世界的藏學(xué)界最珍貴的文集，藏醫(yī)典籍里關(guān)于牙的保健、衛(wèi)生、防治害蟲等方面有了很豐富的具體內(nèi)容，但目前藏區(qū)沒(méi)有成熟的藏藥牙膏產(chǎn)品，所以本實(shí)驗(yàn)室利用本方抗菌、消炎止血的作用，將其提取物與牙膏體系結(jié)合制成藏藥牙膏。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 儀器 IKA-RT1010點(diǎn)加熱磁力攪拌器(廣州儀科實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司);IKA RW 20 digital機(jī)械攪拌儀(廣州儀科實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司);DT-200A電子天平(常熟市金羊砝碼儀器有限公司);00000249萬(wàn)分之一電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);制膏機(jī)(自主設(shè)計(jì)制作)

1.1.2 藥品與試劑 訶子(西藏林芝采集，經(jīng)西藏藏醫(yī)學(xué)院尼瑪次仁教授鑒定為使君子科植物訶子(Terninaliachabula Retz)的干燥成熟果實(shí));白礬(西藏林芝采集，經(jīng)西藏藏醫(yī)學(xué)院尼瑪次仁教授鑒定為硫酸鹽類礦物明礬經(jīng)加工提煉制成);寒水石(西藏林芝采集，經(jīng)西藏藏醫(yī)學(xué)院尼瑪次仁教授鑒定為南寒水石);二氧化硅(磨擦型，牙膏級(jí)，山東省壽光市昌泰微納化工廠，批號(hào)20130611);非離子瓜爾膠(食品級(jí)，河南冠華化工產(chǎn)品有限公司，批號(hào)20130613);山梨醇(食品級(jí)，北京市津同樂(lè)泰化工產(chǎn)品有限公司，批號(hào)20131105);甘油(分析純，北京化工廠，批號(hào)20140106);十二烷基硫酸鈉(K12，分析純，天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)20130325);尼泊金乙酯(分析純，天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)20130517);尼泊金丙酯(分析純，天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)20130517);糖精鈉(食品級(jí)，天津長(zhǎng)捷化工有限公司，批號(hào)20121203);薄荷油(藥用級(jí)，安國(guó)市天下康制藥有限公司，批號(hào)20131122);去離子水;二甲苯(分析純，北京化工廠，批號(hào)20120312);云南白藥牙膏(薄荷清爽型，云南白藥集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)20131009);藏藥(訶子浸膏、結(jié)血蒿浸膏、白礬、寒水石、結(jié)血蒿揮發(fā)油溶于50 mL去離子水中，相當(dāng)于同等質(zhì)量藏藥牙膏配方中添加的藥量3.3 g)，藏藥牙膏(批號(hào)20140329)，空白基質(zhì)牙膏(批號(hào)20140328)，均由本實(shí)驗(yàn)室自制。

1.1.3 動(dòng)物 健康昆明種小鼠，體重:18～20 g，雄性，SPF級(jí)，均由北京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào):SCXK(京)2011-0004。試驗(yàn)前于實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d。按組分籠飼養(yǎng)鼠顆粒飼料，每籠10只，自由進(jìn)食進(jìn)水。

1.2 方法

1.2.1 配方工藝研究

1.2.1.1 配方原料的選擇 藏藥牙膏配方的主要原料為:磨擦劑用二氧化硅;粘合劑用非離子瓜爾膠;發(fā)泡劑用十二烷基硫酸鈉;保濕劑用甘油和70%山梨醇復(fù)配;甜味劑用糖精鈉;香精用薄荷油;防腐劑用尼泊金乙酯和尼泊金丙酯;功效成分添加劑藏藥(訶子、白礬、寒水石等)。通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)影響牙膏成型的因素主要為磨擦劑、增粘劑、保濕劑等的配比，因此試驗(yàn)設(shè)9個(gè)配方比如表1所示，調(diào)整甘油、山梨醇、非離子瓜爾膠、二氧化硅的加入量，制備成藏藥牙膏。

1.2.1.2 制備工藝 稱取非離子瓜爾膠，加入甘油、70%山梨醇，置磁力攪拌器上攪拌，調(diào)節(jié)溫度75～85℃，使其均勻分散，再加入水溶液(糖精鈉、部分藏藥浸膏、白礬、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯預(yù)先分散于去離子水中)，攪拌使膠溶，貯存陳化2 h。在300 r/min機(jī)械攪拌下加入二氧化硅、寒水石、K12，再調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)數(shù)在650 r/min攪拌2 h，加入薄荷油，在真空下高速攪拌30 min，貯存陳化。

表1 藏藥牙膏配方

1.2.2 二甲苯致小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)［12］分組和給藥:取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為模型組、牙膏空白基質(zhì)組、陽(yáng)性組(云南白藥牙膏)、藏藥牙膏組、藏藥組。于小鼠右耳兩面涂以二甲苯，每只50μL致炎，左耳不加處理作自身空白對(duì)照，30 min后牙膏空白基質(zhì)組、陽(yáng)性組、藏藥牙膏組分別在右耳涂以相對(duì)應(yīng)的牙膏約每只0.1 g;藏藥組在右耳涂以藏藥每只約0.05 mL。模型組致炎，90 min后脫頸椎處死小鼠，其他組涂藥1 h后脫頸椎處死小鼠，擦凈耳部所涂藥物，沿耳廓基線剪下兩耳，用6.5 mm打孔器沖下左右兩耳同一部位的圓片，于分析天平稱重，精確到0.0001 g。用右耳片重量減去左耳片重量為腫脹度，計(jì)算腫脹抑制率。

腫脹抑制率=(空白對(duì)照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/空白對(duì)照組平均腫脹度×100%

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。腫脹度用(ˉx±s)來(lái)表示，組間比較采用方差分析，P＜0.05時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 最佳配方 采用感官評(píng)價(jià)法［13-14］進(jìn)行評(píng)價(jià)，以外觀性狀、拉絲現(xiàn)象為評(píng)價(jià)指標(biāo)。由表2可知，牙膏的拉絲現(xiàn)象受瓜爾膠用量的影響最大，其次二氧化硅、甘油、山梨醇的用量對(duì)其也有一定的影響;保濕劑甘油和山梨醇的用量對(duì)膏體的光滑細(xì)膩程度影響最大。9個(gè)配方中配方9效果最好，制備所得的藏藥牙膏膏體細(xì)膩光亮，呈半透明棕綠色，氣味清涼，黏稠度適中，拉絲現(xiàn)象較明顯。

表2 藏藥牙膏不同配方的感官評(píng)價(jià)

2.2 抗炎作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果 由表3可知，藏藥牙膏組、云南白藥牙膏組、藏藥組與模型組相比，均能抑制二甲苯引起腫脹的作用(P＜0.01)，其中藏藥牙膏組、藏藥組抗炎效果優(yōu)于云南白藥牙膏組;牙膏空白基質(zhì)組與模型組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.01);藏藥牙膏組與牙膏空白基質(zhì)組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，對(duì)小鼠耳腫脹具有良好的抑制作用。

表3 藏藥牙膏對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用(ˉx±s，n=10)

3 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，粘合劑的用量對(duì)于牙膏的拉絲現(xiàn)象具有至關(guān)重要的影響，加入量應(yīng)合理，過(guò)少膏體疏松松散，不成形，過(guò)多則膏體過(guò)于黏稠。當(dāng)確定了粘合劑的用量的情況下，通過(guò)調(diào)節(jié)保濕劑和水、磨擦劑的用量也可對(duì)膏體的黏稠度進(jìn)行調(diào)整。同時(shí)應(yīng)注意K12和香精的加入量，K12加入會(huì)使膏體稠度減小，但是香精的加入會(huì)使膏體的黏稠度增加且影響發(fā)泡量，因此兩者的加入量也應(yīng)該加以考慮，通常兩者加入量比為2∶1［15］。本實(shí)驗(yàn)最佳配方為甘油20 g、山梨醇40 g、二氧化硅22 g、非離子瓜爾膠0.7 g、藏藥3.3 g、薄荷油1.1 g、十二烷基硫酸鈉(K12)2.2 g、尼泊金乙酯0.1 g、尼泊金丙酯0.05 g、糖精0.35 g、水適量。制備所得的藏藥牙膏膏體細(xì)膩光滑，呈半透明深棕色，氣味清涼，黏稠度適中。

二甲苯致小鼠耳腫脹抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所研制的藏藥牙膏與云南白藥牙膏對(duì)比，抗炎效果優(yōu)于云南白藥牙膏，具有良好的抗炎作用。藏藥牙膏與藏藥對(duì)比2組的抗炎作用沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而藏藥牙膏與牙膏空白基質(zhì)對(duì)比抗炎作用的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，說(shuō)明所添加的功效成分藏藥與牙膏體系具有良好的配伍性，牙膏基質(zhì)不會(huì)對(duì)藏藥的功效成分產(chǎn)生影響。

我國(guó)醫(yī)學(xué)歷史悠久，擁有著豐富的防治口腔疾病的經(jīng)驗(yàn)，中藥牙膏將中藥與牙膏相結(jié)合是我國(guó)牙膏產(chǎn)業(yè)的一大特色，也是對(duì)祖先寶貴的防治口腔疾病經(jīng)驗(yàn)的弘揚(yáng)［16-18］。本實(shí)驗(yàn)室將訶子、白礬等藏藥與牙膏體系結(jié)合，研制成藏藥牙膏，使其能達(dá)到清潔口腔作用的同時(shí)能夠預(yù)防牙齦炎等口腔疾病。根據(jù)前人的研究發(fā)現(xiàn)，訶子對(duì)口腔致病菌如變形鏈球菌等有著良好的抑制作用和抗糖蛋白的黏附作用［19-20］，因此本實(shí)驗(yàn)室也將進(jìn)一步對(duì)所研究制備的藏藥牙膏進(jìn)行抗菌實(shí)驗(yàn)的研究。該研究制備的藏藥牙膏是對(duì)祖先寶貴的治療口腔疾病經(jīng)驗(yàn)的弘揚(yáng)，也是對(duì)現(xiàn)代中藥的發(fā)展，具有廣闊的市場(chǎng)發(fā)展前景。

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