王麗華

探討APC、P53、Ki-67對大腸腺瘤診斷的意義

王麗華

目的 探求結(jié)腸腺瘤樣息肉蛋白(APC)、P53、Ki-67在大腸腺瘤的不同發(fā)展階段中的表達, 總結(jié)APC、P53、Ki-67在大腸腺瘤診斷中的價值及分析其對臨床的指導意義。方法 大腸腺瘤患者132例, 分別采用SP免疫組化染色, 比較免疫組化結(jié)果。結(jié)果 在大腸腺瘤伴高級別上皮內(nèi)瘤變中P53強表達, 而在大腸腺瘤伴低級別上皮內(nèi)瘤變中APC強表達(P＜0.05)；在表達Ki-67≥20%的患者中P53強表達, 而在Ki-67＜20%的患者中APC強表達(P＜0.05)。結(jié)論 APC、P53、Ki-67聯(lián)合標記對大腸腺瘤的病理診斷起到輔助作用, 指導臨床對患者預后的判斷, 做進一步臨床處理。

大腸腺瘤；上皮內(nèi)瘤變；結(jié)腸腺瘤樣息肉蛋白；P53；Ki-67

大腸腺瘤是先于大腸癌發(fā)生的, 起源于腸上皮的良性腫瘤, 腺瘤可單發(fā)或多發(fā), 多發(fā)者可能患有遺傳綜合征, 主要見于家族性腺瘤性息肉病(FAP)患者, FAP相關(guān)基因位于5號染色體, 即APC基因, 據(jù)研究APC第二個等位基因突變, 是腫瘤發(fā)生的早期事件。本研究對大腸腺瘤APC、P53、Ki-67的表達情況進行分析, 總結(jié)APC、P53、Ki-67對大腸腺瘤診斷的臨床意義?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院大腸腺瘤患者132例, 其中管狀腺瘤80例, 絨毛狀腺瘤52例；其中伴有低級別上皮內(nèi)瘤變85例, 伴有高級別上皮內(nèi)瘤變47例。男77例, 女55例, 平均年齡45.8歲。

1.2 方法 采用免疫組化SP法檢測132例大腸腺瘤患者中的APC、P53、Ki-67蛋白的表達：一抗為兔抗人APC、P53、Ki-67多克隆抗體(福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司)。過程如下：常規(guī)石蠟切片(3 μm), 脫蠟、水化、抗原修復；3%雙氧水去除內(nèi)源性過氧化物酶；加入一抗?jié)窈兄惺覝剡^夜；加生物素標定兔抗鼠IgG室溫1 h；二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色、蘇木素復染、透明、封片。

1.3 判斷標準 APC的免疫組化染色以細胞漿出現(xiàn)棕褐色顆粒為陽性, 染色陽性細胞＜30%的患者為陰性(-), 染色陽性細胞＞30%的患者為陽性(+)。P53的免疫組化染色以細胞核出現(xiàn)棕褐色顆粒為陽性, 染色陽性細胞＜30%的患者為陰性(-), 染色陽性細胞＞30%的患者為陽性(+)。Ki-67免疫組化染色以細胞核出現(xiàn)棕褐色顆粒為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 大腸腺瘤伴低級別上皮內(nèi)瘤變與高級別上皮內(nèi)瘤變的APC、P53表達情況比較 伴低級別上皮內(nèi)瘤變的患者APC強表達, P53弱表達,伴高級別上皮內(nèi)瘤變APC弱表達, P53強表達(P＜0.05)。見表1。

2.2 在Ki-67≥20%與Ki-67＜20%不同患者中APC、P53的表達情況比較 在Ki-67≥20%的患者中APC弱表達, P53強表達, 在Ki-67＜20%的患者中APC強表達, P53弱表達(P＜0.05)。見表2。

表1 大腸腺瘤伴上皮內(nèi)瘤變的患者中APC、P53的表達情況比較(n)

表2 在Ki-67≥20%與Ki-67＜20%不同患者中APC、P53的表達情況比較(n)

3 討論

APC基因定位于人染色體5q21, 其結(jié)構(gòu)特點：其氨基端區(qū)幾乎不含脯氨酸, 易形成A螺旋結(jié)構(gòu), 兩個A螺旋間的相互作用而形成同源或異源二聚體, 其中心區(qū)富含脯氨酸, 具有降解β-連環(huán)蛋白的能力［1］。并使細胞獲得持續(xù)生長的信號, 進而發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化［2］。突變的APC蛋白多無羧基端結(jié)構(gòu),失去了對微管系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用, 微管組裝減緩而分解加速,導致細胞DNA合成旺盛、有絲分裂異常及惡性表型形成［3］。APC基因的改變不僅可引起家族性腺瘤性息肉病, 而且與結(jié)直腸癌的早期發(fā)生有關(guān), 存在于85%以上的散發(fā)性結(jié)直腸癌中［4］。據(jù)國內(nèi)學者劉志貞等［5］研究APC基因失活在腺瘤的形成過程中就發(fā)揮一定的作用, 也提示APC蛋白缺失在大腸癌早期發(fā)生中起一定的作用。

P53是抑癌基因, 也是細胞凋亡的重要相關(guān)基因, 野生型P53可激活Bax基因, 從而解除bcl-2對細胞凋亡的抑制作用, 促進凋亡的發(fā)生。P53基因突變后, 失去了對端粒酶的抑制作用, 促進了細胞的永生化。Sood 等［6］的研究也表明P53和人類端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(HTRT)的表達呈明顯的正相關(guān)。Ki-67是存在于增生細胞核的一種非組蛋白核蛋白, 定位于第十號染色體。Ki-67抗原表達可反映腫瘤細胞的增生活性, 與惡性腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預后高度相關(guān)。

本研究觀察大腸腺瘤伴低級別上皮內(nèi)瘤變與高級別上皮內(nèi)瘤變的APC、P53表達情況, 發(fā)現(xiàn)伴低級別上皮內(nèi)瘤變的患者APC強表達, P53弱表達；伴高級別上皮內(nèi)瘤變APC弱表達, P53強表達。觀察在Ki-67≥20%與Ki-67＜20%不同患者中APC、P53的表達情況, 發(fā)現(xiàn)在Ki-67≥20%的患者中APC弱表達, P53強表達, 在Ki-67＜20%的患者中APC強表達, P53弱表達。所以APC與大腸腺瘤上皮內(nèi)瘤變程度呈負相關(guān), P53、Ki-67與大腸腺瘤上皮內(nèi)瘤變程度呈正相關(guān)。所以APC、P53、Ki-67聯(lián)合標記大腸腺瘤對大腸腺瘤的預后判斷起到了重要作用。

鑒于P53、Ki-67在大腸癌中的成熟應用, 加上APC對于大腸癌的早期發(fā)現(xiàn)的獨特性, 本文研究APC、P53、Ki-67在大腸腺瘤不同發(fā)展程度的表達情況得出, APC、P53、Ki-67聯(lián)合標記對大腸腺瘤的病期及預后發(fā)展進行評估, 指導臨床對大腸腺瘤的預后進行判斷, 為臨床做進一步處理提供依據(jù)。

［1］ Su LK, Steinbach G, Sawyer JC, et al.Genomic rearrangementsof the APC tumor-suppressor gene in familial adenomatous polyposis.Hum Genet, 2000, 106(1):101-107.

［2］ Yang J, Wang J, Zhou X, et al.Analysis of APC/beta-catenin genes mutations and Wnt signalling pathway in desmoid-type fibromatosis.Pathology, 2007, 39(3):319-325.

［3］ Andresen PA, Johansen T, Eide TJ, et al.Gene symbol: APC.Hum-Genet, 2007, 121(2):288.

［4］ Behrens J.The role of the Wnt signaling pathway in colorectal tumorigenesis.Biochem Soc Trans, 2005, 33(4):672.

［5］ 劉志貞, 李佩珍, 韓曉立, 等.大腸腺瘤及癌組織APC基因突變分析.中國藥物與臨床, 2006, 6(7):499.

［6］ Sood AK, Collin J, Jabbari S, et al.P53 null mutations are associated with a telomerase negative pbenotype in ovarian carcinoma.Cancer Biol Ther, 2002, 1(5):511.

Investigation of significance of APC, P53, Ki-67 in diagnosis of colorectal adenoma

WANG Li-hua.

Shenyang City Anorectal hospital, Shenyang 110002, China

Objective To investigate expressions of adenomatosis polyposis coli (APC), P53, and Ki-67 in different stages of colorectal adenoma, to summarize value of APC, P53 and Ki-67 in diagnosis of colorectal adenoma, and to analyze their clinical guidance significance.Methods A total of 132 colorectal adenoma patients received SP immumohistochemical staining.Their immumohistochemical outcomes were compared.Results P53 showed strong expression in colorectal adenoma complicated with high grade intraepithelial neoplasia, while APC showed strong expression in colorectal adenoma complicated with low grade intraepithelial neoplasia (P＜0.05).In patients with Ki-67 ≥20%, P53 had its strong expression, while APC showed strong expression in those with Ki-67 ＜20% (P＜0.05).Conclusion Combined marker of APC, P53 and Ki-67 provides assisted effect in pathological diagnosis of colorectal adenoma.This method provides clinical guidance for prognosis judgment and further clinical management.

Colorectal adenoma; Intraepithelial neoplasia; Adenomatosis polyposis coli; P53; Ki-67

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.28.013

2015-04-08］

110002 沈陽市肛腸醫(yī)院