張偉明

【摘 要】 目的：探討乙型肝炎病毒DNA定量與乙肝兩對半及血清酶ALT的關(guān)系。方法：對135例乙型肝炎病毒陽性的患者血清采用FQ-PCR定量法測定HBV-DNA含量，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定乙肝兩對半，并采用全自動生化分析儀定量檢測血清酶活性。結(jié)果：小三陽與大三陽妊娠期婦女的HBV-DNA量比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；HBsAg+、抗-HBc+模式的HBV-DNA定量與大三陽患者相比差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但與小三陽患者相比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），而且HBV-DNA定量檢測不同范圍中的血清酶檢測的結(jié)果比較差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論：乙肝兩對半檢測中主要為大三陽及小三陽模式，而且乙型肝炎病毒DNA定量與乙肝兩對半及血清酶含量具有一定的相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎；HBV-DNA定量；乙肝兩對半；血清酶ALT

【中圖分類號】R512.6+2 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2015）11-0130-02

我國將乙型肝炎疫苗預防納入國家計劃免疫范疇以來，乙型肝炎表面抗原攜帶率特別是5歲以內(nèi)兒童的HBsAg攜帶率明顯下降至0.96%，達到WHO要求標準[1]。本文通過采用熒光定量多聚酶鏈式反應檢測HBV-DNA的復制量，研究乙型肝炎病毒DNA量與乙肝兩對半及血清酶ALT的關(guān)系對發(fā)病機制進行初步探討，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1.1 一般資料 選取135例2012年8月至2014年6月在我院就診的乙型肝炎病毒感染患者作為研究對象，其中男76例，女59例，年齡12～72歲，平均年齡（38.54±6.42）歲。所有患者經(jīng)過乙肝兩對半檢測有1項及1項以上陽性，且半年內(nèi)未接受抗乙型肝炎病毒治療[2]。

1.2 檢驗方法

1.2.1 血清HBV-DNA定量 采用熒光定量PCR法，通過熒光定量多聚酶鏈式反應實時、動態(tài)檢測HBV-DNA的復制量。本實驗室為通過廣東省PCR實驗室檢測認證的基因診斷先進實驗室，所有操作人員均為持有PCR實驗室上崗證的專業(yè)人員[3]。

1.2.2 乙肝兩對半檢測 乙肝兩對半定性檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），采用試劑盒進行檢測，操作參照試劑盒說明，采用酶標儀（TECANSPECTRA）讀取并記錄檢測結(jié)果。

1.2.3 血清酶ALT檢測 血清酶（ALT）能催化谷氨酸和丙氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)棣?酮戊二酸和丙酮酸，廣泛存在于肝、心、腦等組織內(nèi)，以肝臟含量最高，是最敏感的肝功能檢測指標之一。本研究采用奧林巴斯AU5800全自動生化分析儀進行檢測，試劑購自中生北控生物技術(shù)有限公司，ALT 參考值為 0～55 U/ L，本觀察組設(shè)定 ALT ≥110 U/ L 為肝炎活動。

1.3 統(tǒng)計學處理方法 采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學處理，將血清HBV-DNA量經(jīng)對數(shù)處理轉(zhuǎn)換成log10 IU/ml，統(tǒng)計結(jié)果以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義P<0.01為差異具有高度統(tǒng)計學意義，其中血清HBV-DNA量與乙肝兩對半之間的關(guān)系采用卡方檢驗， HBV-DNA量與血清酶ALT的關(guān)系采用趨勢檢驗。

2 結(jié)果

2.1 血清HBV-DNA量與乙肝兩對半之間的關(guān)系 大三陽組患者，共有32例，占23.7%，HBV-DNA量總陽性率即HBV-DNA定量>3log10IU/ml的患者比率為96.9%，且其中HBV-DNA量>5 log10IU/ml有29例占90.6%。

小三陽組56例，占41.5%，HBV-DNA定量檢測總陽性率為39.3%，HBV-DNA量>5log10IU/ml有10例，占17.9%。與大三陽組的HBV-DNA定量相比較差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

HBsAg+、抗-HBc+組共25例，HBV-DNA定量檢測總陽性率為36%，與大三陽組的HBV-DNA定量情況相比較差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01），與小三陽組的HBV-DNA定量情況相比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 血清HBV-DNA定量與血清酶ALT的關(guān)系 將HBV-DNA定量檢測不同范圍中血清酶檢測的結(jié)果進行統(tǒng)計比較，統(tǒng)計結(jié)果見表2。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，大三陽組以及HBsAg+、抗-HBs+、HbeAg、抗-HBc+組患者的HBV-DNA量>5log10IU/ml患者所占比例均很高，表明患者體內(nèi)HBV復制很活躍，說明HBV前C區(qū)基因發(fā)生突變但復制仍活躍[3]。小三陽中有HBV-DNA量在3～5 log10 IU/ml之間的有12例，占21.4%，HBV-DNA量>5log10IU/ml有10例，占17.9%，說明有部分HBV前C區(qū)基因產(chǎn)生變異，使得HbeAg不表達，但是HBV病毒復制仍比較活躍?？?Hbe+、抗-HBc+組和抗-HBs+、抗-HBc+組患者中均有16.7%的患者HBV-DNA量在3～5 log10 IU/ml之間的，表明了HbeAg陰性及HbsAg陰性時血清中仍然存在一些HBV病毒，推測其原因可能是因為HBV病毒的S區(qū)發(fā)生了點突變，導致HBsAg抗原性發(fā)生改變，從而使得濃度較低的HbsAg抗原不能被檢測出來[5]，因此應予以重視。

本研究顯示HBV-DNA定量與血清酶ALT的關(guān)系，在HBV-DNA量<3log10 IU/ml時，血清酶ALT異常的比例為21.4%，HBV-DNA量在3～5 log10 IU/ml之間時，血清酶ALT異常的比例為55.0%，而HBV-DNA量>5log10IU/ml，血清酶ALT異常的比例為68.9 %，差異具有高度統(tǒng)計學意義，說明HBV病毒的復制活性及載量嚴重影響乙肝活動，從而證明了乙型肝炎病毒復制活躍是導致肝功能指標發(fā)生異常的重要原因，乙型肝炎的重要治療措施是抗病毒治療。

參考文獻

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[2]楊勇， 王占科， 陳鑫， 等. 乙肝病毒DNA定量水平和乙型肝炎病毒標志物定量檢測指標相關(guān)性研究[J]. 解放軍醫(yī)藥雜志， 2014，26（10）： 78-80.

[3]羅獻偉， 王建軍. 安徽省2006年1-59歲人群乙型病毒性肝炎感染狀況的血清流行病學調(diào)查[J]. 中華疾病控制雜志， 2013，17（2）： 156-159.

[4]劉惠媛， 李晶. 妊娠婦女乙型肝炎病毒感染的臨床特征[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志， 2013， 7（23）： 10473-10475.

[5]張文， 張紅玉， 曾年偉. HbeAg 定量陽性和乙肝DNA的相關(guān)性研究及臨床價值[J]. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生， 2011， 27： 338-339.

（收稿日期：2015.03.14）