宋志琦 楊利峰 周向梅 趙德明

摘 ?要：炎性肉芽腫是指在局部形成主要由巨噬細(xì)胞和炎細(xì)胞構(gòu)成的境界清楚的結(jié)節(jié)狀的慢性炎癥。病灶根據(jù)致炎因子的不同可分為感染性肉芽腫和異物性肉芽腫。畜禽疫苗注射是對(duì)畜禽的應(yīng)激性刺激，根據(jù)機(jī)體個(gè)體狀況，可能出現(xiàn)過敏、應(yīng)激反應(yīng)，但是如果加強(qiáng)觀察，及時(shí)用腎上腺激素等藥物急救治療，可以減少損失。疫苗免疫不當(dāng)對(duì)養(yǎng)禽業(yè)的損失比較嚴(yán)重，但是對(duì)于相關(guān)癥狀的組織病理學(xué)觀察和診斷材料報(bào)道較少。因此，作者對(duì)病例詳細(xì)描述并加以總結(jié)，為生產(chǎn)實(shí)踐中相關(guān)疾病的診斷提供依據(jù)。

關(guān)鍵字：肉芽腫性炎癥;疫苗免疫;組織病理學(xué)診斷

中圖分類號(hào)：S858.312.16+6 ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B ? ? 文章編號(hào)：1673-1085（2015）05-0009-03

1 ?材料與方法

1.1 ?送檢動(dòng)物臨床資料 ?河南永達(dá)育成期白羽肉雞（15～18周齡），注射疫苗不久后皮下及內(nèi)臟（肝臟、脾臟、腎臟等）發(fā)生肉芽腫狀變化。

1.2 ?送檢方法 ?10%福爾馬林液固定組織樣品。

1.3 ?試驗(yàn)方法

1.3.1 ?取材 ?清點(diǎn)送檢的樣本，無誤后，進(jìn)行病理系統(tǒng)編號(hào)，在肝臟、脾臟、腎臟等癥狀較為嚴(yán)重部位，用手術(shù)刀片切取大小為1cm×1cm組織。

1.3.2 ?制片 ?標(biāo)本經(jīng)常規(guī)組織處理，石蠟包埋，5μm切片。

1.3.3 ?染色 ?采用最為常用的HE染色法，步驟如下：邁耶氏蘇木精10min→水洗2min→1%鹽酸酒精3s→水洗2min→0.5%氨水5min→水洗2 min→伊紅1.5min→80%酒精2min→90%酒精3 min→無水酒精I(xiàn) 3min→無水酒精Ⅱ5min→二甲苯I 3min→二甲苯Ⅱ5min→中性樹膠封片→鏡檢。

1.3.4 ?圖像獲取 ?光學(xué)顯微鏡觀察，采集數(shù)碼圖像。

2 ?結(jié)果

2.1 ?皮下肉芽腫脹物 ?低倍鏡下（圖1），看不到完整的皮膚結(jié)構(gòu)，肌纖維結(jié)構(gòu)疏松、斷裂、腫脹，整個(gè)組織彌散分布噬堿性較強(qiáng)的大小不等、形狀不規(guī)則的紫色團(tuán)塊;高倍鏡下（圖2～3），可以看出紫色團(tuán)塊為多核巨細(xì)胞，細(xì)胞核數(shù)量和密度不等，噬堿性強(qiáng)，有的為長梭形，有的聚集到一起形成圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)。同時(shí)可以看到大量上皮樣細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在組織間分布。上皮樣細(xì)胞胞體較大，胞漿豐富，細(xì)胞之間境界不清，其胞核呈圓形或卵圓形，染色質(zhì)少，呈空泡狀，可見核仁，胞體很大。多核巨細(xì)胞的胞核形態(tài)與上皮樣細(xì)胞相似，數(shù)目可達(dá)幾十個(gè)，甚至百余個(gè)，排列在細(xì)胞周邊部，呈馬蹄形或環(huán)形，胞漿豐富。

2.2 ?脾臟肉芽腫脹物 ?低倍鏡下（圖4），脾臟被膜高度腫脹，局部淤血出血，紅髓和白髓結(jié)構(gòu)不明顯，界限不清。同樣，整個(gè)脾臟彌散分布噬堿性較強(qiáng)的大小不等、形狀不規(guī)則的紫色團(tuán)塊;高倍鏡下（圖5～6），可以看出紫色團(tuán)塊為多核巨細(xì)胞，細(xì)胞核數(shù)量和密度不等，噬堿性強(qiáng)，有的為長梭形，有的聚集到一起形成圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)。可見上皮樣細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。上皮樣細(xì)胞胞體較大，胞漿豐富，細(xì)胞之間境界不清，其胞核呈圓形或卵圓形，染色質(zhì)少，呈空泡狀，可見核仁，胞體很大。多核巨細(xì)胞的胞核形態(tài)與上皮樣細(xì)胞相似，數(shù)目可達(dá)幾十個(gè)，甚至百余個(gè)，排列在細(xì)胞周邊部，呈馬蹄形或環(huán)形，胞漿豐富。

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2.3 ?腎臟肉芽腫脹物 ?低倍鏡下（圖7），腎臟正常結(jié)構(gòu)消失，整個(gè)組織高度腫脹，炎性細(xì)胞浸潤，腎臟出血，壞死。腎小管可見蛋白管型，腎小管上皮脫落。間質(zhì)有蛋白樣物質(zhì)浸潤。同樣，整個(gè)脾臟彌散分布噬堿性較強(qiáng)的大小不等、形狀不規(guī)則的紫色團(tuán)塊;高倍鏡下（圖8～9），可以看出紫色團(tuán)塊為多核巨細(xì)胞，細(xì)胞核數(shù)量和密度不等，噬堿性強(qiáng)，有的為長梭形，有的聚集到一起形成圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)?？梢娚掀蛹?xì)胞和巨噬細(xì)胞。上皮樣細(xì)胞胞體較大，胞漿豐富，細(xì)胞之間境界不清，其胞核呈圓形或卵圓形，染色質(zhì)少，呈空泡狀，可見核仁、胞體很大。多核巨細(xì)胞的胞核形態(tài)與上皮樣細(xì)胞相似，數(shù)目可達(dá)幾十個(gè)，甚至百余個(gè)，排列在細(xì)胞周邊部，呈馬蹄形或環(huán)形，胞漿豐富。

3 ?小結(jié)與討論

白羽肉雞接種疫苗后主要表現(xiàn)以增生為主的炎癥改變。病理學(xué)觀察，形成以巨噬細(xì)胞和類上皮細(xì)胞增生為主的肉芽腫[1，2]。在接種局部的真皮層、皮下組織乃至肌層、各個(gè)臟器，可見大量密集的巨噬細(xì)胞及多少不等的類上皮細(xì)胞增生，形成特征性肉芽腫，在肉芽腫內(nèi)可散在多少不等的嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤。肉芽腫的周邊部也見上述相同的炎性細(xì)胞浸潤及大量纖維組織增生包繞[3]。在上述巨噬細(xì)胞、類上皮細(xì)胞肉芽腫內(nèi)可見由嗜中性粒細(xì)胞形成的小膿腫;或者由郎罕氏巨細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及類上皮細(xì)胞構(gòu)成的小肉芽腫。

畜禽疫苗注射是對(duì)畜禽的應(yīng)激性刺激，根據(jù)機(jī)體個(gè)體狀況，可能出現(xiàn)過敏、應(yīng)激反應(yīng)。但是如果加強(qiáng)觀察，及時(shí)用腎上腺激素等藥物急救治療，可以減少損失[4]。禽類的免疫主要途徑有：肌肉注射、皮下注射和滴鼻免疫等。操作者一定要根據(jù)疫苗的性質(zhì)、雞的體況、大小選用不同的免疫方法。只有方法正確了，才能既達(dá)到預(yù)防效果，又能確保雞安全，否則易導(dǎo)致免疫失敗[5]。無論是對(duì)母禽進(jìn)行免疫注射還是對(duì)仔雞進(jìn)行免疫注射，操作者都要嚴(yán)格按照操作規(guī)程作好注射用具、注射部位的消毒工作。要每只雞逐一細(xì)心注射，不能馬虎了事，從而保證免疫效果。另外，在注射過程中，一旦雞出現(xiàn)過敏反應(yīng)，應(yīng)立即采取果斷措施，做好隔離和治療工作。注射疫苗后，操作人員不能馬上離開現(xiàn)場，應(yīng)觀察約半個(gè)小時(shí)后確認(rèn)所有雞均正常方能離去[6]。

參考文獻(xiàn)：

[1]馬毓梅，翟佳，林萍萍，等. 藥物緩釋劑和卡介苗聯(lián)合應(yīng)用構(gòu)建大鼠局限性炎性肉芽腫模型效果觀察[J]. 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2006，41（5）：854-857.

[2] ?馬毓梅，林萍萍，趙松，等. 大鼠局限性炎性肉芽腫模型的建立[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，26（3）：176-178.

[3] ?蔡巖，趙曉青，李繼宏，等.乙型肝炎卡介苗聯(lián)合疫苗免疫豚鼠及小鼠的病理學(xué)研究[J].微生物學(xué)雜志，2012，32（6）：82-86.

[4] ?段永麗，劉循林，鄒永東. 畜禽疫苗注射要注意的問題[J].農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù)，2011（24）：31.

[5] ?焦光軍.畜禽疫苗使用存在的問題及對(duì)策[J]. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2012（1）：217.

[6] ?李光裕，許志廣，程霞，等.防疫注射禽流感疫苗時(shí)應(yīng)注意的問題[J].中國畜禽種業(yè)，2008，4（8）：87-88.