王喜功，潘吉榮，張 峰

（1.山東省青島市中心醫(yī)院腫瘤介入科，山東 青島 266042；2.山東省青島市市立醫(yī)院東院區(qū)，山東 青島 266000）

射頻消融和微波消融治療原發(fā)性肝細(xì)胞癌的近期療效及對免疫功能的影響

王喜功1，潘吉榮2，張 峰1

（1.山東省青島市中心醫(yī)院腫瘤介入科，山東 青島 266042；2.山東省青島市市立醫(yī)院東院區(qū)，山東 青島 266000）

目的：探討射頻消融和微波消融治療原發(fā)性肝細(xì)胞癌的近期療效及對免疫功能的影響。方法：隨機(jī)將64例原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者分為射頻消融組和微波消融組，對2組患者的近期療效進(jìn)行評價，觀察記錄2組治療前后相關(guān)免疫功能指標(biāo)的變化，并與同期正常健康體檢者（對照組）進(jìn)行對比分析。結(jié)果：微波消融組術(shù)中消融時間明顯短于射頻消融組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。2組各免疫指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：射頻消融和微波消融治療原發(fā)性肝細(xì)胞癌均能取得較好的近期療效，均能明顯提高肝癌患者術(shù)后的免疫功能；微波消融由于消融時間更短、操作更簡單，有利于降低麻醉和其他不必要的手術(shù)風(fēng)險，一定程度上減少了由于手術(shù)損傷而造成的術(shù)后短期內(nèi)免疫功能下降的發(fā)生。

消融技術(shù)；癌，肝細(xì)胞

惡性腫瘤的局部熱消融治療是當(dāng)今國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。其對機(jī)體免疫功能的影響，已受到越來越多的關(guān)注［1］。射頻消融和微波消融是治療惡性腫瘤最常用的消融方法，在臨床療效和復(fù)發(fā)方面無顯著性差異［2-3］，但二者對患者免疫功能的影響方面研究較少。現(xiàn)對青島市中心醫(yī)院2012年1月至2013年12月應(yīng)用射頻消融和微波消融治療的64例原發(fā)性肝癌患者的近期療效及對免疫功能的影響進(jìn)行對比分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組64例均經(jīng)詳細(xì)病史采集、查體、影像學(xué)檢查并超聲引導(dǎo)下穿刺活檢病理證實(shí)為原發(fā)性肝細(xì)胞癌，符合第八界全國肝癌學(xué)術(shù)會議通過的原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。入選標(biāo)準(zhǔn)：①單個結(jié)節(jié)直徑≤5 cm，或最大結(jié)節(jié)直徑≤3 cm，結(jié)節(jié)數(shù)目≤3個；②術(shù)前無大血管浸潤及肝外轉(zhuǎn)移，無明確的靜脈、膽管癌栓；③凝血功能基本正常；④術(shù)前未進(jìn)行其他抗癌處理；⑤半年內(nèi)未接受過免疫調(diào)節(jié)治療。采用隨機(jī)數(shù)字表法將64例隨機(jī)分為射頻消融組和微波消融組。射頻消融組32例39個病灶，男23例，女9例；年齡36～75歲，平均（57.34±10.68）歲；單個癌結(jié)節(jié)直徑平均（2.32±1.64）cm，其中≤3 cm 28個，3～5 cm 11個；Child-Pugh分級：A級 22例，B級10例；術(shù)前血清AFP平均（1 032.73±726.46）ng/mL，其中AFP≥400 ng/mL 29例，＜400 ng/mL 3例。微波消融組32例41個病灶，男22例，女10例；年齡35～76歲，平均（57.82±10.37）歲；單個癌結(jié)節(jié)直徑平均（2.43±1.31）cm，其中≤3 cm 30個，3～5 cm 11個；Child-Pugh分級：A級21例，B級11例；術(shù)前血清AFP平均（1 063.27±738.69）ng/mL，其中AFP≥400 ng/mL 30例，＜400 ng/mL 2例。2組患者在性別、年齡、腫瘤大小及數(shù)量、術(shù)前肝功能及AFP水平等方面具有可比性（P＞0.05）。同時選擇同期30例正常健康體檢者作為對照組。患者均簽訂知情同意書自愿參與本次研究，并經(jīng)青島市中心醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 治療方法 超聲引導(dǎo)采用Philips IU 22彩超診斷儀，探頭頻率3.5MHz。患者均在局麻+靜脈輔助麻醉下行經(jīng)皮消融治療，消融范圍要超出腫瘤邊緣0.5～1 cm。微波消融采用冷循環(huán)微波消融儀（南京福中醫(yī)療高科有限公司生產(chǎn)），微波消融輸出功率40～60W，穿刺針MTC-180-2.0。射頻消融采用美國RATA射頻消融腫瘤治療系統(tǒng)，射頻消融輸出功率30～80W，RF發(fā)生器頻率460 kHz，電極針14 G套針。術(shù)中要密切觀察患者生命體征變化，并給予對癥處理。

1.3 檢測指標(biāo)及儀器 于治療前及治療后1個月應(yīng)用美國Ci8200全自動生化免疫儀檢測血清AFP水平，于治療前、治療后3 d、治療后1個月應(yīng)用美國BD Facscalibur流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群水平。

1.4 近期療效評價 在消融治療后1個月通過隨診復(fù)查判斷近期療效。根治性消融：術(shù)前血清AFP水平升高者降至正常，超聲、CT、MRI或DSA顯示病灶完全消融，根治性消融邊緣在0.5～1 cm，無殘癌及腫瘤子灶；亞根治消融：血清AFP水平顯著下降，達(dá)到或接近正常，超聲、CT、MRI或DSA顯示病灶基本完全消融，但根治性消融邊緣不足0.5 cm，無殘癌及腫瘤子灶；姑息性消融：CT、MRI或血管造影可見病灶消融不全，或有殘癌及腫瘤子灶等［5］。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，方差齊性時采用t檢驗(yàn)，方差不齊時采用t’檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 術(shù)中消融時間 射頻消融組術(shù)中消融時間平均為（18.45±4.68）min，微波消融組為（11.27± 3.84）min，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.703，P=0.000）。

2.2 近期療效 治療1個月后，射頻消融組與微波消融組根治性消融率分別為92.31%（36/39）、95.12%（39/41），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.003，P=0.954）；亞根治消融率分別為7.69%（3/39）、4.88%（2/41），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.005，P=0.946）。對于≤3 cm腫瘤，射頻消融組與微波消融組根治性消融率分別為96.43%（27/28）、93.33%（28/30），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝0.004，P＝0.951）；對于3～5 cm腫瘤，射頻消融組與微波消融組根治性消融率分別為81.82%（9/11）、100.00%（11/11），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝0.550，P＝0.458）。射頻消融組和微波消融組治療1個月后血清AFP水平分別為（326.64±157.68）ng/mL、（319.87± 162.84）ng/mL，均較治療前明顯降低（t’=5.373，P= 0.000；t’=5.559，P=0.000），2組治療后AFP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.169，P=0.866）。

2.3 治療前 T淋巴細(xì)胞亞群水平 正常對照組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例以及CD4+/CD8+比值均明顯高于射頻消融組和微波消融組（P＜0.05），CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例明顯低于射頻消融組和微波消融組（P＜0.05）；射頻消融組和微波消融組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值分別為1.151、0.268、0.630、0.513，P值均＞0.05）（表1）。

表1 治療前T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

表1 治療前T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

注：與對照組比較，①t=8.669，P=0.000；②t=8.378，P= 0.000；③t=4.536，P=0.000；④t=19.783，P=0.000；⑤t=9.600，P= 0.000；⑥t=8.366，P=0.000；⑦t=5.107，P=0.000；⑧t=18.123，P= 0.000。

組別 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+射頻消融組 57.83±4.74①32.47±4.24②25.74±3.62③1.28±0.14④微波消融組 56.44±4.92⑤32.18±4.41⑥26.32±3.74⑦1.26±0.17⑧對照組 68.73±5.16 42.27±5.08 21.82±3.15 1.96±0.13

2.4 治療后3 d的T淋巴細(xì)胞亞群水平 治療后3 d，射頻消融組和微波消融組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例以及 CD4+/CD8+比值較治療前明顯降低，CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例較治療前明顯升高（t值分別為3.633、3.830、8.883、3.210；2.006、2.529、6.426、2.348，P＜0.05或P＜0.01），2組間T淋巴細(xì)胞亞群水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但射頻消融組各項(xiàng)指標(biāo)變化更為明顯，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）（表2，3）。

2.5 治療后1個月T淋巴細(xì)胞亞群水平 治療后1個月，射頻消融組和微波消融組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例及CD4+/CD8+比值較治療前明顯升高，CD8+的T淋巴細(xì)胞所占比例較治療前明顯降低（t值分別為 2.239、3.338、9.714、3.475；3.055、3.732、10.573、4.431，P＜0.05或P＜0.01）。2組間各項(xiàng)指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表4）。

表2 治療后3 d的T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

表2 治療后3 d的T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

組別 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+射頻消融組53.47±4.86 28.62±3.79 28.71±3.78 0.98±0.13微波消融組53.96±4.97 29.47±4.16 28.56±3.89 1.03±0.11 t或t’值 0.399 0.854 0.156 1.661 P值 0.691 0.396 0.876 0.102

表3 治療后3 d的T淋巴細(xì)胞亞群各指標(biāo)變化程度比較（±s）

表3 治療后3 d的T淋巴細(xì)胞亞群各指標(biāo)變化程度比較（±s）

CD4+/CD8+降低射頻消融組 4.13±2.42 3.76±1.83 3.84±2.17 0.28±0.13微波消融組 2.48±1.13 2.68±1.23 2.26±1.73 0.21±0.12 t或t’值 3.495 2.771 3.221 2.238 P值 0.001 0.006 0.002 0.029組別 CD3+降低（%）CD4+降低（%）CD8+升高（%）

表4 治療后1個月T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

表4 治療后1個月T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

組別 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+射頻消融組60.48±4.73 36.17±4.62 22.76±3.23 1.62±0.14微波消融組60.16±4.82 36.47±4.78 22.48±3.17 1.66±0.13 t或t’值 0.268 0.255 0.350 1.184 P值 0.790 0.799 0.728 0.241

3 討論

射頻消融和微波消融在消融范圍、熱場分布等方面存在若干差異，擁有各自的優(yōu)勢和不足［6］。射頻凝固形狀接近球形，對于血供較少的球形腫瘤，宜選擇此種消融方法，而對于較大腫瘤以及腫瘤鄰近區(qū)域血管較豐富的腫瘤往往效果不夠理想。微波熱場溫度較高，對血管的凝固能力更強(qiáng)，凝固形狀類似橢圓形，對于較大腫瘤及血供豐富的腫瘤，宜選擇微波消融治療［7］。另外，對于同樣大小的腫瘤，微波消融時間僅為多級射頻消融時間的一半左右，更有利于降低麻醉及其他手術(shù)風(fēng)險，提高手術(shù)的安全性，尤其是對于一些難以耐受長時間麻醉的患者。大量研究［2-3］表明，微波消融治療肝癌作為一種更新的治療手段，其療效與射頻消融相似。本研究中，治療1個月后，射頻消融組和微波消融組根治性消融率和血清AFP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但目前尚缺乏對二者治療肝癌遠(yuǎn)期生存率方面的大規(guī)模隨機(jī)對照研究。

惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體免疫功能關(guān)系密切，肝癌患者常因免疫功能下降出現(xiàn)外周血T淋巴細(xì)胞亞群紊亂，細(xì)胞免疫功能處于抑制狀態(tài)［1，8］，主要表現(xiàn)為CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例以及CD4+/ CD8+比值下降，CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例升高。本研究中，治療前射頻消融組和微波消融組肝癌患者CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例及CD4+/CD8+比值均明顯低于正常對照組，CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例明顯高于正常對照組，也提示肝癌患者細(xì)胞免疫功能明顯下降。而癌細(xì)胞?？稍跈C(jī)體失去免疫控制的狀態(tài)下迅速增殖而形成新的癌灶［9］。因此，肝癌患者術(shù)后的免疫功能直接關(guān)系著腫瘤的復(fù)發(fā)和臨床預(yù)后。常規(guī)的肝癌根治術(shù)在切除腫瘤的同時，也對機(jī)體造成了較大的損傷，給免疫系統(tǒng)造成了嚴(yán)重的破壞，也在一定程度上增加了腫瘤復(fù)發(fā)的可能。郭亞軍等［10］對肝癌術(shù)后外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化的研究中發(fā)現(xiàn)，術(shù)后患者的免疫功能進(jìn)一步降低，術(shù)后30 d開始逐漸恢復(fù)，大多數(shù)患者雖然在術(shù)后40 d左右恢復(fù)術(shù)前水平，但仍低于正常水平。熱消融在直接造成腫瘤細(xì)胞凝固壞死的同時，能減少甚至解除腫瘤對機(jī)體的免疫抑制，從而增加免疫細(xì)胞數(shù)量，提高免疫功能。王青等［11］對接受射頻消融治療的原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行回顧性分析，結(jié)果顯示，射頻消融后3 d外周血 CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例以及CD4+/CD8+比值無明顯變化，消融后7、14 d的CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例及CD4+/CD8+比值均較治療前明顯升高。 陳理明等［12］和闞曉等［13］分別通過對原發(fā)性肝癌射頻消融、微波消融治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化的研究發(fā)現(xiàn)，消融治療后1周外周血CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例及CD4+/CD8+比值均明顯高于治療前，CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例明顯低于治療前，提示消融治療后1周患者免疫功能明顯增強(qiáng)。而本研究中，消融治療后3 d，射頻消融與微波消融組患者外周血CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例及CD4+/CD8+比值均較治療前進(jìn)一步降低，CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例進(jìn)一步升高（P＜0.05或P＜0.01），與王青等［11］的研究結(jié)果不一致，而與郭亞軍等［10］的研究結(jié)論相似，這可能與術(shù)中肝臟、血管處理造成損傷出血，以及患者自身合并癥等有關(guān)。微波消融組術(shù)后早期免疫功能進(jìn)一步下降的程度明顯低于射頻消融，可能與微波消融時間更短、操作更簡單、更有利于降低麻醉及不必要的手術(shù)風(fēng)險有關(guān)。消融治療后1個月，2組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞所占比例及CD4+/CD8+比值較治療前明顯升高，CD8+T淋巴細(xì)胞所占比例較治療前明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），提示消融治療后1個月肝癌患者機(jī)體免疫抑制狀態(tài)得到了明顯的改善；而射頻和微波消融治療的T淋巴細(xì)胞亞群水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示2種消融方式對根本性提高肝癌患者免疫功能的作用相當(dāng)。

熱消融引起機(jī)體抗腫瘤免疫增強(qiáng)機(jī)制尚不十分明確，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)資料，其提高免疫功能的原因主要包括：①熱消融能減輕或消除患者的腫瘤負(fù)荷，使免疫抑制得到緩解，從而促進(jìn)免疫功能恢復(fù)；②熱消融后腫瘤局部形成了類似疫苗的作用，有利于誘發(fā)抗腫瘤免疫功能［14-16］；③熱消融產(chǎn)生的熱效應(yīng)使腫瘤抗原改變，從而使腫瘤抗原性增強(qiáng)［15］；④熱消融產(chǎn)生的熱量導(dǎo)致局部炎性反應(yīng)，造成炎性細(xì)胞浸潤，使細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)增強(qiáng)；⑤熱消融可促進(jìn)淋巴細(xì)胞活化，通過所釋放細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力［16-20］。

綜上所述，射頻消融和微波消融治療原發(fā)性肝細(xì)胞癌均能取得較好的近期療效，均能明顯提高肝癌患者術(shù)后的免疫功能，而微波消融由于消融時間更短、操作更簡單，有利于降低麻醉和其他不必要的手術(shù)風(fēng)險，可能會在一定程度上減少由于手術(shù)損傷而造成的術(shù)后短期內(nèi)免疫功能下降的發(fā)生。

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Recent curative effect and influence on the immune function of radiofrequency ablation and m icrowave ablation in treatment of primary hepatocellular carcinoma

Wang Xigong，PAN Jirong*，ZHANG Feng.*Qingdao Municipal Hospital，

Qingdao，266000，China.

Objective：To investigate the recent curative effect and influence on the immune function of radiofrequency ablation and microwave ablation in treatment of primary hepatocellular carcinoma.M ethods：64 cases with primary hepatocellular carcinoma were randomly divided into radiofrequency ablation group and microwave ablation group.The recent curative effect of both group were evaluated，changes of immune indices before and after treatment were recorded and comparatively analyzed with healthy subjects（control group）during the same period.Results：The ablation time of microwave ablation group was significantly shorter than that of radiofrequency ablation group（P＜0.01）.There was no significant difference in various immune indices between the two groups（P＞0.05）.Conclusions：The radiofrequency ablation and microwave ablation in treatment of primary hepatocellular carcinoma can obtain a good curative effect recently，improve immune function in patients with live cancer after operation.Microwave ablation has shorter ablation time and simpler operation，so it is conducive to reduce the risk of anesthesia and other unnecessary surgery，to a certain extent may reduce the occurrence of postoperative immune function decline which is caused by the operation damage in the short term.

Ablation techniques；Carcinoma，hepatocellular

2014-09-20）

10.3969/j.issn.1672-0512.2015.01.014

潘吉榮，E-mail：pjrqdmh@126.com。