章春宇莊程劉曉茵
(1長春市健康教育中心,吉林 長春 130021;2長春市朝陽區(qū)衛(wèi)生局衛(wèi)生監(jiān)督所;3長春醫(yī)學高等專科學校,130031)
微波輔助提取半枝蓮多糖工藝優(yōu)化
章春宇1,3莊程2劉曉茵3
(1長春市健康教育中心,吉林 長春 130021;2長春市朝陽區(qū)衛(wèi)生局衛(wèi)生監(jiān)督所;3長春醫(yī)學高等專科學校,130031)
目的:研究微波輔助提取半枝蓮多糖的最佳工藝條件。方法:以半枝蓮多糖的提取率和多糖含量為指標,采用正交試驗篩選最佳微波提取工藝。結果:微波輔助提取的最佳工藝條件為:微波提取時間6 m i n,微波功率700 W,料液比1∶15(g/m L)。結論:本實驗優(yōu)選的工藝準確、方便、快捷,可用于半枝蓮多糖的提取。
半枝蓮;多糖;微波提?。还に噧?yōu)化
半枝蓮(Scutellaria barbata D.D on.)為唇形科植物半枝蓮的干燥全草,味辛、苦,性寒,歸肺、肝、腎經,具有清熱解毒、化瘀利尿的功效[1]。半枝蓮主產于江蘇、浙江、福建、廣西和廣東等地,現代藥理研究表明半枝蓮具有抗癌、免疫調節(jié)等作用,半枝蓮的主要有效成分為黃酮類、多糖和揮發(fā)性物質[2]。本研究采用微波輔助提取半枝蓮多糖,在單因素實驗基礎上,設計正交試驗優(yōu)化了半枝蓮粗多糖的提取工藝,旨在為半枝蓮多糖的深度開發(fā)及應用提供理論依據。
1.1 儀器
T1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普西通用儀器責任有限公司),電子天平BS224S(賽多利斯科學儀器北京有限公司)。
1.2 試藥
半枝蓮(購于長春市藥材公司),標準品:無水葡萄糖(飛宇生物科技有限公司,含量大于98%,批號:FY 18720206)。苯酚、濃硫酸、乙醇等均為分析純。
2.1 半枝蓮樣品液的制備
稱取適量半枝蓮,粉碎過篩后制成半枝蓮顆粒,脫脂后依據微波提取方法正交試驗設計方案到得供試樣品液,見圖1。
圖1 半枝蓮樣品液制備流程
2.2 提取條件因素水平設定
經預試驗研究發(fā)現,對半枝蓮多糖提取影響較大的因素有提取時間(A)、功率(B)、料液比(C),因此選擇這3個因素做為考察因素,每個因素選取3個水平,按L9(33)正交表安排試驗,每個試驗均平行兩份,正交因素水平見表1。
表1 半枝蓮提取正交試驗因素水平
2.3 半枝蓮多糖的測定方法[3]
半枝蓮多糖的測定以葡萄糖為標準品,采用硫酸-苯酚比色法。
2.3.1 標準樣品溶液的配制精密稱取0.014 8 g干燥至恒重的無水葡萄糖,加入 100 m L容量瓶中,用水溶解至刻度,使成148.1 μg/m L即得。
2.3.2 標準曲線的制備分別精密吸取上述標準樣品溶液 0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 m L至 10 m L容量瓶中,然后依次加入1.8,1.6,1.4,1.2,1.0 m L蒸餾水,再各加1.0 m L 6%苯酚試劑,混勻,精密加入5 m L濃硫酸,振搖后放置 5 m i n,置沸水浴中加熱15 m i n,立即轉入冷水浴中冷卻至室溫,以蒸餾水為空白,在490 nm波長處測定吸收度,即得標準曲線,以濃度C對吸收度A回歸方程:
A=1.087 6C+ 0.005 6,
r=0.999 2。
2.3.3 半枝蓮多糖樣品溶液的測定取1 m L半枝蓮樣品溶液,經過與2.3.2相同操作,帶入標準曲線,測得多糖含量。
根據表1進行正交試驗,獲得正交試驗結果,見表2;方差分析結果,見表3。
表2 半枝蓮提取正交試驗
由表2的極差可知,各因素對半枝蓮多糖得率影響大小順序為A(時間)>C(料液比)>B(微波功率)。表3的方差分析表明,提取時間、微波功率和料液比均對多糖得率具有顯著影響,從試驗結果來看,半枝蓮多糖微波提取的最佳工藝條件為A1B3C1,即:時間6 m i n,功率700 W,料液比1∶15 g/m L。
表3 半枝蓮提取方差分析表
本文采用L9(33)的正交試驗對半枝蓮多糖的提取工藝進行了優(yōu)化篩選,以多糖的含量為考察指標,用苯酚-硫酸法對半枝蓮多糖進行含量測定,確定了最佳制備工藝,整個提取工藝操作簡便,為半枝蓮多糖的進一步開發(fā)利用,提供了理論基礎和依據。
[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:109-110.
[2] 張秀娟,楊姍姍.半枝蓮多糖體內抗腫瘤及其免疫調節(jié)作用的實驗研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2008,4(2):54-56.
[3] 紀耀華,紀躍芝,馬愛民,等.微波法提取大黃多糖最佳工藝優(yōu)化研究[J].中藥材,2009,32(8):1291-1293.
Optimization of Microwave-Assisted Extraction of Polysaccharides from Scutellaria Barbata
Zhang Chunyu1,3,Zhuang Cheng2,Li u X i aoyi n3(1 H eal t h Educat i on Inst i t ut e of Changchun Ci t y,Ji l i n Changchun 130021,Chi na;2 H eal t h Supervi si on Inst i t ut e of Chaoyang H eal t h Bureau of Changchun Ci t y;3 Changchun M edi cinal Col l ege,130031)
Objective:To st udy t he opt i m al process of m i crow ave-assi st ed ext ract i on of pol ysacchari des from Scutellaria barbata.Methods:The ext ract i on rat e of pol ysacchari des from Scutellaria barbata and t he pol ysacchari de cont ent w ere used as t he i ndexes and t he ort hogonal t est w as carri ed out t o eval uat e t he m i crow ave-assi st ed ext ract i on process.Results:The condi t i ons of opt i m al m i crow ave-assi st ed ext ract i on t echnol ogy w ere as fol l ow s,t he ext ract i on t i m e w as 6 m i ns,t he m i crow ave pow er w as 700 W and t he rat i o of m at eri al t o l i qui d w as 1∶15(g/m L).Conclusion:The opt i m i zed process w as accurat e,si m pl e and rapi d,and i t can be used for t he ext ract i on of pol ysacchari des from Scutellaria barbata.
Scutellaria Barbata;Pol ysacchari des;M i crow ave Ext ract i on;Process O pt i m i zat i on
10.3969/j.i ssn.1672-5433.2015.04.008
2014-12-29)
吉林省教育廳“十一五”科學技術研究項目(〔2013〕546)
章春宇,女,副主任藥師。研究方向:藥品質量標準。通訊作者E-m ai l:526416900@qq.com