王 清，唐德娟，李源念，劉 波

（黔西南州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，貴州 興義 562400）

大蒜提取物作為一種新型的生物源農(nóng)藥，其本身具有較高的藥有價(jià)值，同時(shí)大蒜提取物也具有較強(qiáng)的抗真菌性［1－4］。據(jù)報(bào)道，大蒜提取液對(duì)豌豆白粉病、豌豆莖枯病、絲核菌等植物病原真菌都有一定的抑制作用［5］。醫(yī)生們稱大蒜為“天然的廣譜抗生素”，其具有廣譜抗菌作用。大蒜中的植物殺菌素主要為大蒜素及多種含硫的化合物。蒜素是大蒜抗菌性的主要成分，是由蒜氨酸酶作用于蒜氨酸（基質(zhì)）后生成的。

試驗(yàn)測(cè)定了大蒜水溶性提取物對(duì)青霉病菌（P.italicum）、灰霉病菌（B.cinerea）、黑根霉（R.nigricans）等植物病原菌的抑制效果。旨在為開發(fā)高效、安全、經(jīng)濟(jì)的新型無(wú)公害植物源農(nóng)藥奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

青霉病菌（P.italicum）、灰霉病菌（B.cinerea）、黑根霉（R.nigricans）。

1.2 大蒜品種

興義本地大蒜。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 大蒜水溶性提取物的制備

大蒜提取物的制備：稱取新鮮大蒜去皮500g，將其置于體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇中表面消毒1min，然后用無(wú)菌水沖洗3次置于組織勻漿機(jī)中，加入100ml無(wú)菌水，4 000r／min搗成糊狀，在轉(zhuǎn)入50ml離心管中，于4℃下10000r／min離心10min，靜置后，取其上清液0.45μm 微孔濾膜過濾備用。

1.3.2 青霉病菌、灰霉病菌、黑根霉的培養(yǎng)

在無(wú)菌條件下將青霉、根霉、灰霉病菌接入PDA 平板上。青霉、根霉、灰霉3種菌每樣接3個(gè)重復(fù)，接好后將其放入恒溫箱中培養(yǎng)，根霉、灰霉生長(zhǎng)較快，6d后可以用于試驗(yàn)，青霉生長(zhǎng)較慢，需要10d后可以用于試驗(yàn)。

1.3.3 大蒜提取物對(duì)青霉病菌、灰霉病菌、黑根霉的抑制作用

將大蒜提取物稀釋為1.5g／ml、1.25g／ml、1.0g／ml、0.75g／ml、0.5g／ml、0.25g／ml，分 別 取0.1mL 均 勻 涂 抹 于PDA 平板上，貼上標(biāo)簽。用打孔器將培養(yǎng)好的青霉接入培養(yǎng)皿內(nèi)。每個(gè)濃度做3次重復(fù)，同時(shí)設(shè)置無(wú)菌水作為對(duì)照，將培養(yǎng)皿放入恒溫箱中培養(yǎng)。5d后觀察記錄并計(jì)算抑制效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 大蒜提取物對(duì)青霉病菌（P.italicum）的抑制作用

從表1可以看出，當(dāng)大蒜提取物的濃度為0.75g／ml時(shí)，其可以完全抑制青霉病菌的生長(zhǎng)，當(dāng)濃度低于0.75g／ml時(shí)，其隨著濃度的下降，對(duì)青霉的抑制作用也在下降，即大蒜提取物的濃度與其對(duì)青霉病菌的抑制率成正相關(guān)。

表1 大蒜提取物對(duì)青霉病菌的抑制作用Table 1 Effects of garlic extracton Penicillium italicum

2.2 大蒜提取物對(duì)灰霉病菌（B.cinerea）的抑制作用

從表2可以看出，當(dāng)大蒜提取物的濃度為1g／ml時(shí)，其基本可以完全抑制灰霉病菌的生長(zhǎng)，當(dāng)濃度低于1g／ml時(shí)，其隨著濃度的下降，對(duì)灰霉病菌的抑制作用也在下降，即大蒜提取物的濃度與其對(duì)灰霉病菌的抑制率成正相關(guān)。

表2 大蒜提取物對(duì)灰霉病菌的抑制作用Table 2 Effects of garlic extract on Botrytis cinerea

2.3 大蒜提取物對(duì)黑根霉（R.nigricans）的抑制作用

表3 大蒜提取物對(duì)黑根霉的抑制作用Table 3 Effects of garlic extract on Rhizopus nigricans

從表3可以看出，不同濃度的大蒜提取物對(duì)黑根霉的抑制效果不同，當(dāng)大蒜提取物的濃度為1.5g／ml時(shí)，其可以完全抑制黑根霉的生長(zhǎng)，當(dāng)濃度低于1.5g／ml時(shí)，其隨著濃度的下降，對(duì)黑根霉的抑制作用也在下降，即大蒜提取物的濃度與其對(duì)黑根霉的抑制率成正相關(guān)。

3 結(jié)論與討論

隨著人們生活水平的日益提高，農(nóng)產(chǎn)品安全問題更加嚴(yán)峻?；瘜W(xué)藥劑雖有強(qiáng)力的殺菌作用，并在保障農(nóng)產(chǎn)品高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)方面發(fā)揮巨大的作用，但用化學(xué)藥劑來(lái)防治病害勢(shì)必帶來(lái)農(nóng)藥殘留和環(huán)境的污染，長(zhǎng)期使用，還會(huì)導(dǎo)致植物病原菌產(chǎn)生抗藥性，迫使人們不得不加大使用藥量，將會(huì)造成環(huán)境問題更加嚴(yán)重。植物源農(nóng)藥具有低毒、低殘留、不易產(chǎn)生抗藥性、易與其他藥物相混配等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)其已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn)之一。試驗(yàn)測(cè)定了大蒜提取物對(duì)青霉病菌（Penicillium italicum）、灰霉病菌（Botrytis cinerea）、黑根霉（Rhizopus nigricans）生長(zhǎng)的抑制效果。結(jié)果表明大蒜提取物對(duì)3種植物病原菌的生長(zhǎng)都有明顯的抑制作用。將為尋找植物源農(nóng)藥和大規(guī)模推廣應(yīng)用提供參考。

［1］ 王剛，韓艷霞，王云帆.利用大蒜提取物防治白菜黑斑病研究［J］.北方園藝，2006，（06）：159－160.

［2］ 王少偉.大蒜提取物防治白菜黑斑病研究［J］.開封教育學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，（02）：44.

［3］ 宋衛(wèi)國(guó)，李寶聚，劉開啟.大蒜化學(xué)成分及其抗菌活性機(jī)理研究進(jìn)展［J］.園藝學(xué)報(bào)，2004，（02）：263－268.

［4］ 宋衛(wèi)國(guó)，李寶聚，石延霞，等.大蒜提取物抑制番茄灰霉菌活性測(cè)定［J］.中國(guó)蔬菜，2005，（08）：21－22.

［5］ 蘇美瓊，楊柏崇，成密紅，等.大蒜的功效及綜合利用研究進(jìn)展［J］.西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2003，（04）：151－156.