張峰　王帥

[摘要] 目的 通過對獻血者初篩血型錯誤原因分析，進而提高初篩血型的準確率，確保安全輸血。 方法 對170例初篩檢驗血型錯誤結果進行分析。 結果 初篩血型錯誤總人數(shù)170例。血型錯誤率為0.053%（排除弱凝集和亞型），各型錯誤構成比例中，A型誤定為AB型的比例最高，占25.3%，其次為AB型誤定為A型和AB型誤定為B型，各占10.0%，錯誤率最低為O型誤定為AB型，占1.8%。 結論 造成血型初篩錯誤的原因是多方面的，主要為人為和環(huán)境因素。

[關鍵詞] 無償獻血；初篩；血型；輸血

[中圖分類號] R446.6 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）21-0124-03

[Abstract] Objective To analyze the causes of error of blood type preliminary screening for blood donors， and to further improve the accuracy of preliminarily screened blood type， so as to ensure the safe blood transfusion. Methods A total of 170 cases with false results of preliminarily screened blood type were analyzed. Results Total number of people with false preliminarily screened blood type was 170. The false rate of blood type was 0.053% （excluding weak agglutination and sub-type）. Among the proportion of composition of each false type， the proportion of type A wrongly screened as type AB was the highest， accounting for 25.3%， followed by the proportion of type AB wrongly screened as type A and the proportion of type AB wrongly screened as type B， accounted for 10.0% for each. The lowest proportion was type O wrongly screened as type AB， accounted for 1.8%. Conclusion Causes of false preliminary screening of blood type are multifaceted， and the main causes are human factors and environmental factors.

[Key words] Voluntary blood donors； Preliminary screening； Blood type； Blood transfusion

輸血醫(yī)學發(fā)展到今天，同型輸注已成為最基本的準則，尤其是ABO的配合性同型輸注顯得尤為重要。輸血可治療疾病、挽救生命，正確的血型鑒定是安全輸血的前提，否則可能導致溶血性輸血反應，甚至危及生命。血站向臨床發(fā)送血型正確的血液是安全輸血的保證，作為輸血專業(yè)技術人員，我們在做血型鑒定時，就應嚴把血型鑒定第一關。初篩血型在獻血場所進行，目前是用紙板法做正定型，有一定的局限性，受時間、環(huán)境、溫度、人員等影響，檢驗結果存在一定的錯誤率[1]?，F(xiàn)對2011～2014年來我站獻血的319 530例中170份血型初篩檢驗錯誤的原因進行回顧性分析。

1 材料與方法

1.1 標本來源

2011～2014年來我站獻血人數(shù)共計319 530例，其中初篩血型錯誤170例。按照《中國輸血技術操作規(guī)程》中血液采集要求留樣采血，嚴重溶血、脂血、污染等標本不適用于本項檢測[2]。

1.2 試劑

標準抗-A、抗-B血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，試劑效價1：128）、標準A、B、O紅細胞（北京金豪制藥有限公司）。試劑均經(jīng)批檢及質控抽檢合格且在有效期內使用。

1.3 儀器設備

深圳愛康Metis全自動血庫系統(tǒng)及一次性梯形微板（血型專用），長春博德生物技術有限公司提供的血型正定型鑒定卡。

1.4方法

街頭采血初篩血型用紙板凝集法檢測，嚴格按照試劑盒說明書要求進行操作和結果判斷。用玻璃毛細管采集獻血者無名指末梢血液用抗-A、抗-B標準血清檢測正定型，肉眼判讀有無顆粒狀凝集。采血后留取血樣標本送實驗室復檢，用一次性v型微板在全Metis全自動血庫系統(tǒng)上同時做正反定型，正反定型血型不符時，用血型鑒定卡做進一步確認。凡有和初篩血型不符者，實驗室必須提取對應血袋編號進行重復確認，對疑難血型鑒定送往血型室采用血清學方法做進一步鑒定[3]。

1.5 試劑質控

抗A、抗B標準血清要求從效價、親和力、凝集力、特異性測定等幾個指標進行質控確認。ABO血型反定型用紅細胞要求無溶血、凝塊等現(xiàn)象發(fā)生，并與標準血清發(fā)生特異性反應。

1.6 實驗操作程序

采用深圳愛康Metis全自動血庫系統(tǒng)自動加樣、孵育、離心、振蕩、判讀。在Metis軟件上編寫程序：樣本血清50 μL+25 μL標準紅細胞分別加到目標板的1～3排上；樣濃縮紅細胞10 μL+300 μL生理鹽水在預稀釋板上混勻稀釋，然后在目標板上4～6排分別加40 μL稀釋紅細胞及標準血清和抗-D各15 μL，加完后孵育4 min，然后在平板離心機上離心90 s后放在振蕩儀上振蕩混勻2 min，最后在判讀儀上判讀結果：①細胞均勻分布在v型板孔底的為陰性；細胞沉集于孔底中央形成一點的為陽性；判讀異?；蚱渌闆r打問號。②ABO正反定型一致在結果欄表示ABO血型，正反不一致或任意一孔為“？”，則打問號。采用試管法判讀或血型鑒定卡鑒定，若還無法鑒定樣本送血型室做進一步鑒定。

2 結果

2011年1月～2014年12月我站共319 530例無償獻血者標本中，初篩血型錯誤總人數(shù)170例。血型錯誤率0.053%（排除弱凝集和亞型），明顯低于文獻報道[4-6]。見表1。各型錯誤構成比例中，A型誤定為AB型的比例最高，占25.3%，明顯高于南平市的7.5%[7]，其次為AB型誤定為A型和AB型誤定為B型，各占10.0%，錯誤率最低為O型誤定為AB型，占1.8%。其中2011年血型差錯率最高，由于導致血型檢測錯誤的主要原因為人為和環(huán)境因素[8，9]，因此我站采取了一定的獎懲措施后，初篩血型錯誤有逐年下降趨勢。按照排列組合的方式各種血型錯誤分布情況統(tǒng)計結果，見表2。

3 討論

3.1 初篩血型錯誤的原因分析

3.1.1 技術因素 指尖穿刺出血不暢或不足時，可能會導致抗原量的不足、細胞與標準血清試劑比例不合適，其結果就是細胞過多而抗血清較少時出現(xiàn)的后帶現(xiàn)象，初篩時易導致A、B型錯判成O型或AB型錯判成A型或B型；甚至采集指尖血時因局部擠壓過重導致RBC數(shù)量減少，血漿量多產生而引起血型的錯判[10]，如O型錯判成AB型或A或B型；少數(shù)操作不熟練的工作人員在血型板上滴加試劑時，不小心產生氣泡將一種抗血清試劑濺落在另一區(qū)域或在抗血清與血液攪拌混勻時未注意清潔造成交叉污染等，致使A或B錯判成AB型；抗原-抗體反應時間不足，尤其是抗原性較弱的血樣時，凝集程度較弱，容易誤判結果，AB型錯判為A或B型。

3.1.2 責任心不夠 因為工作時注意力的不集中，初篩血型貼錯標簽，或者同時采集兩個獻血者，操作者操作不仔細，單子出現(xiàn)交叉而填錯、貼錯信息；抗A抗B互相滴反，工作人員責任心不強，造成誤判；采血人員登錄微機查詢信息時馬虎而出現(xiàn)填寫血型錯誤。

3.1.3 工作流程不合理 留樣貼簽過程控制不嚴密，當工作人員同時采集兩個獻血者、注意力又不集中、事先又把標簽預貼在留樣管上時就會導致錯型，而且出現(xiàn)錯血型的留樣管往往成對出現(xiàn)。事實上這種錯誤不僅是錯型原因之一，還對檢測結果的正確判斷帶來嚴重的后果，且當同型試管貼簽錯誤時更難以追蹤和發(fā)現(xiàn)，潛在危害更大，嚴重威脅到血液的安全性，一旦有問題的血液輸注到患者體內，造成的危害不可估量。

3.1.4環(huán)境因素 溫度過高或過低，均能影響試劑效價。夏季外出采血時標準抗血清效價隨溫度升高而降低，冬季環(huán)境溫度過低、試劑保存不當都會造成初篩血型結果錯誤。有實驗證明抗-B標準血清在保存過程中比抗-A標準血清效價下降要快[11]，因而導致B端凝集出現(xiàn)較A端慢，這可能將AB型錯判為A型的又一個原因。還有少部分人血清中冷凝集素含量較常人高，這種抗自身紅細胞的嗜異性冷抗體（IgM類）在低溫或某些病理情況下（自身免疫性貧血、EB病毒感染等）會表達高效價[12]，強烈冷凝集素假凝集可造成血型結果誤判；此外，當車內環(huán)境比較嘈雜、人流量較大時，會對工作人員的化驗及判讀工作帶來不利影響。

3.1.5 試劑因素 由于抗-B血清試劑效價本身較低，如果保存不當，在溫度較高的環(huán)境放置時間過長，則效價更容易偏低，誤把AB型錯判為A型。其中B型錯判為O型的情況最多。

3.1.6 亞型因素 因亞型抗原弱或試劑對亞型檢出的局限性，而導致血型初篩錯誤。

3.2 減少血型初篩錯誤的對策

①加強操作人員的責任心和責任感，完善管理和監(jiān)督機制。即使在獻血場所的獻血者較多時，工作人員也要做到各司其職、各負其責，不慌亂不馬虎，細心、耐心，嚴格按照SOP操作，控制關鍵點，采集完畢后進行常規(guī)血型復檢，減少錯誤率。所有信息必須做到一一核對，確保檢驗信息和體檢表信息、獻血條碼信息一致，核對無誤后審核人再把信息錄入電腦，最后在工作結束后核對一下各型試管個數(shù)與電腦上是否一致，避免留樣錯誤。以高標準的質量意識貫穿于工作始終，嚴防差錯的發(fā)生。②加強操作人員的專業(yè)技能培訓及考核，夯實理論基礎，掌握抗原抗體反應原理與技術要求，嚴格遵守標準操作規(guī)程，把握好試劑與紅細胞的反應比例，適當增加抗血清量以及減少全血量，確保檢測時間的充分，防止試劑出現(xiàn)交叉污染和效價降低。對血型檢測崗人員在上崗前進行理論考試及操作考核，經(jīng)考核合格后方準予獨立上崗。③優(yōu)化工作流程，強化采前、采中、采后核對制度。應明確規(guī)定貼簽的步驟和要求，一次只對一袋血液和同源血樣管貼簽，貼簽后應與征詢表進行核對[13]。一方面要認真核查實驗結果，另一方面要核對血樣標本與血袋采血編號、獻血者姓名、血型，確保貼標簽、填寫血型、計算機信息錄入等原始記錄準確無誤，便于追蹤。獻血人員多時，要保證有足夠的工作人員，安排足夠的初篩人員及時做好獻血人群的分流安排，嚴格按照SOP規(guī)程文件進行操作，精力集中，工作認真細致，減少或避免ABO定型錯誤。④改善獻血環(huán)境。獻血車內應配備冷暖空調，保持車內溫度濕度相對穩(wěn)定，抗原-抗體理論最適反應溫度為4℃～25℃[14]，抗血清用完后及時放冰箱保存，以防止效價降低影響檢測效果。⑤提高實驗室對亞型等疑難血型的鑒定技術水平。ABO亞型的抗原結構、性能、數(shù)量和抗原位點與正常的ABO血型抗原有一定差異，運用吸收放散實驗對亞型的鑒定非常重要，但是由于亞型種類較多再加上糖類抗原機構的復雜性，進一步的鑒定還需要結合基因分型的結果進行綜合判斷，我們也相信還有新的亞型有待發(fā)現(xiàn)[15]。⑥實驗室檢測ABO血型時要建立標準操作規(guī)程，按照國家標準技術規(guī)范進行檢測。在血型鑒定工作中，工作人員應具有較高質量意識和操作水平，正確使用檢測儀器，維護保養(yǎng)好檢測儀器，確保儀器檢測性能穩(wěn)定[16]。確保血型試劑在有效期內使用，盡量保證實驗所需的環(huán)境溫度及試劑保存溫度，以便排除因試劑本身質量問題引起的錯誤。⑦建立差錯管理體系，減少血型初篩錯誤發(fā)生。2013年初我站結合相關法律法規(guī)和質量體系文件增加了質量管理規(guī)定，對除亞型外的血型初篩錯誤問題進行獎懲和通報，這對減少血型初篩錯誤起到了很大的作用。2013年，我站采血總例數(shù)為83 388例，出現(xiàn)的血型初篩錯誤46例，錯型率為0.055%；2014年我站采血總例數(shù)為86 254例，出現(xiàn)的血型初篩錯誤為35例，錯型率為0.041%，無論從數(shù)量還是比率上，初篩血型錯誤都呈現(xiàn)出大幅減少的趨勢。

綜上，ABO血型的定型準確性是輸血安全一個基礎而重要的前提，向臨床提供的血液，ABO血型必須完全正確，這是采供血機構的義務。通過對產生血型初篩錯誤的原因進行深入細致的調查分析，建立并實施有效的預防措施，不斷完善差錯管理體系，減少血型初篩錯誤，降低臨床輸血風險，提高血液采集、檢測質量，確保臨床用血安全。

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（收稿日期：2015-03-18）