金妍　張?zhí)K偉

[摘要] 目的 探討不同滴度的抗核抗體（ANA）與抗核抗體譜的相關(guān)性及其與肝功能異常檢出率的臨床意義。 方法 將78例ANA陽(yáng)性患者根據(jù)結(jié)果滴度分為A組1∶100、B組1∶320和C組1∶1000。ANA定性檢測(cè)采用免疫熒光法；抗核抗體譜檢測(cè)采用免疫印跡法；ALT、AST、GGT采用速率法檢測(cè)；TP采用雙縮脲法檢測(cè)。 結(jié)果 各滴度ANA陽(yáng)性患者中ENA陽(yáng)性檢出率分別為A組63.33%、B組74.07%、C組80.95%。肝功能異常檢出率分別為20.00%、29.60%、47.60%。 結(jié)論 ANA陽(yáng)性患者肝功能損害檢出率高，隨著ANA滴度的升高肝功能損害檢出率也升高；ANA陽(yáng)性與肝功能損傷有相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞] 抗核抗體；抗核抗體譜；肝功能檢查；自身免疫性疾病

[中圖分類(lèi)號(hào)] R392.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）21-0094-03

[Abstract] Objective To investigate correlation of the ANA and antinuclear antibody spectrum， and clinical significance of the abnormal liver function rate. Methods A total of 78 cases of ANA positive were divided into group A（1∶100）， group B（1∶320） and group C（1∶1000）. ANA qualitative detection by immunofluorescence method； Antinuclear antibody spectrum detection using western blot method； ALT， AST， GGT were detected by the rate method； Biuret method was used to test TP. Results ENA positive detection rate were group A（63.33%）， group B（74.07%）， group C（80.95%）. The abnormal liver function rate was 20.00%， 29.60%， 47.60%. Conclusion Liver function abnormalities in patients with ANA positive rate is increased， abnormal liver function rate is also increased， so ANA is associated with the abnormal liver function.

[Key words] Anti nuclear antibodies； Antinuclear antibody； Liver function tests； Autoimmune diseases

自身免疫疾?。ˋID）是由多種自身抗體作用導(dǎo)致的機(jī)體多器官損傷性疾病，臨床表現(xiàn)多樣化，常見(jiàn)疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、干燥綜合征（SS）、混合性結(jié)締組織?。∕CTD）、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、自身免疫性肝炎（AIH）、原發(fā)性肝硬化（PBC）、系統(tǒng)性硬皮?。≒SS）、特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）等[1]。AID幾乎可累及人體的各系統(tǒng)、組織和器官，造成組織和器官的損傷，是主要的致殘性疾病之一。免疫性疾病中有許多自身抗體，抗核抗體ANA就是自身抗體的一種[2]。很多AID是以臨床癥狀出現(xiàn)前數(shù)月或數(shù)年即呈現(xiàn)自身抗體為特征的慢性疾病，自身抗體也可以預(yù)示疾病特異性、嚴(yán)重程度和進(jìn)展，通過(guò)研究抗核抗體和抗核抗體譜的關(guān)系，對(duì)其聯(lián)合檢查進(jìn)行疾病的輔助診斷、判斷疾病活動(dòng)程度、觀察治療效果、指導(dǎo)臨床用藥等方面有重要意義[3]。在自身免疫疾病中，伴隨著ANA陽(yáng)性，常可出現(xiàn)肝功能損害，抗核抗體與肝功能損害的聯(lián)系的探討對(duì)于臨床的及時(shí)保肝治療具有重大意義。但關(guān)于ANA與抗核抗體譜及肝功能異常的關(guān)系還少見(jiàn)報(bào)道。本文回顧性分析78例ANA陽(yáng)性并進(jìn)行抗核抗體譜和肝功能檢查的患者數(shù)據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

收集2014年9～12月汕頭中心醫(yī)院檢測(cè)ANA陽(yáng)性的患者88例，對(duì)其進(jìn)行篩選，排除10例沒(méi)有在同一次抽血進(jìn)行抗核抗體譜和肝功能檢查的患者，對(duì)剩余的78例進(jìn)行分組；根據(jù)結(jié)果滴度分為A組1∶100（n=30）、B組1∶320（n=27）和C組1∶1000（n=21），各例均有在同一次抽血檢查進(jìn)行抗核抗體、抗核抗體譜和肝功能檢查。

1.2 主要試劑與儀器

抗核抗體檢測(cè)試劑盒和抗核抗體譜檢測(cè)試劑盒購(gòu)自歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司。肝功能檢查試劑盒購(gòu)自美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司，采用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特AU5821-1全自動(dòng)分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 方法

1.3.1 ANA定性檢測(cè) 免疫熒光法：將稀釋的血清標(biāo)本與生物載玻片一起孵育，若IgG、IgA、IgM抗體結(jié)合相應(yīng)核抗原，則為陽(yáng)性。二次孵育時(shí)，由于熒光素標(biāo)記的抗體與抗原結(jié)合，可在熒光顯微鏡先觀察到特異性熒光。結(jié)果判斷：抗體的滴度可根據(jù)不同稀釋度血清所產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度進(jìn)行判斷，見(jiàn)表1。

1.3.2 抗核抗體譜 免疫印跡法：第一次孵育時(shí)，稀釋血清與檢測(cè)膜反應(yīng)，陽(yáng)性標(biāo)本的特異性抗體與對(duì)應(yīng)的抗原反應(yīng)，再加入酶標(biāo)抗體孵育，加入底物，便可產(chǎn)生顏色反應(yīng)。結(jié)果判斷：肉眼觀察，如果結(jié)果為陽(yáng)性反應(yīng)條膜上出現(xiàn)相應(yīng)的結(jié)合印跡，沒(méi)有出現(xiàn)條形印跡的項(xiàng)目即為陰性。

1.3.3 肝功能檢測(cè) 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）、總蛋白（TP）均用Beckman DXC800全自動(dòng)生化儀上機(jī)檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料多組間比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANA陽(yáng)性患者抗核抗體譜各項(xiàng)目檢出率

78例ANA陽(yáng)性患者中檢出抗核抗體譜陽(yáng)性有56例，占71.79%；56例ENA陽(yáng)性患者抗SSA抗體檢出40例，占陽(yáng)性結(jié)果的86.95%；A組抗核抗體譜檢出陽(yáng)性19例，陽(yáng)性率63.33%；B 組抗核抗體譜檢出20例，陽(yáng)性率74.07%；C組抗核抗體譜檢出陽(yáng)性17例，陽(yáng)性率80.95%；檢出率C組高滴度組大于B組中滴度組，B組大于A組低滴度組；抗SSA抗體的檢出率最高，達(dá)37.18%。見(jiàn)表2。

2.2 ANA陽(yáng)性各組患肝功能異常指標(biāo)檢出率

78例ANA陽(yáng)性患者中肝功能異常者為46例，占58.97%（46/78）； 其中，肝酶增高異常24例，占52.17%（24/46）；有4例所有肝酶全部升高?？偟鞍譚P增高共32例，清蛋白/球蛋白A/G倒置的共有30例，總蛋白增高且清蛋白/球蛋白A/G降低的患者共有35例，占76.09%（35/46），肝功能異?；颊叩臋z出率C組大于B組，B組大于A組，組間兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表3。

3 討論

自身免疫疾病AID是指機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)自身成分的抗體或細(xì)胞性免疫效應(yīng)的現(xiàn)象。由此而引起自身組織的損傷并出現(xiàn)臨床癥狀。自身免疫病大都為原發(fā)性，少數(shù)為繼發(fā)性。前者與遺傳因素密切相關(guān)，預(yù)后多數(shù)不良，常呈慢性遷延[4]。自身免疫病的篩選指標(biāo)可以選擇ANA，抗核抗體ANA是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分脫氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱，能與所有動(dòng)物的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)，主要存在于血清中，也可存在于胸水、關(guān)節(jié)滑膜液和尿液中。ENA 即抗可溶性抗原?？箍扇苄钥乖璄NA抗體是針對(duì)核內(nèi)可提取性核抗原的一種自身抗體，有10余種，主要為抗核糖核蛋白抗體（RNP）和酸性核蛋白（Sm）抗體。所謂ENA是指在鹽水中可溶解的一部分核抗原。ANA與ENA聯(lián)合檢測(cè)可以提高AID的檢出率，對(duì)AID的診斷、治療及預(yù)后做出有益的評(píng)估[6，7]。本文結(jié)果顯示，各滴度ANA陽(yáng)性患者中ENA陽(yáng)性的檢出率分別為A組低滴度組63.33%、B組中滴度組74.07%、C組高滴度組80.95%，隨著ANA滴度的升高，ENA陽(yáng)性的檢出率也對(duì)應(yīng)升高。ANA為陽(yáng)性結(jié)果的患者ENA并不一定陽(yáng)性，而是隨著ANA滴度的升高ENA檢出率也升高，因此，兩者的陽(yáng)性率并不完全吻合，而是存在一定的檢測(cè)誤差，但是隨著ANA滴度的升高，兩個(gè)結(jié)果的陽(yáng)性率趨向于吻合，即高滴度時(shí)檢測(cè)的誤差影響較小。因此本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以充分證明結(jié)論，即ANA滴度的升高ENA陽(yáng)性的檢出率也對(duì)應(yīng)升高。

自身免疫疾病AID是指機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)自身成分的抗體或細(xì)胞性免疫效應(yīng)的現(xiàn)象。由此而引起自身組織的損傷并出現(xiàn)臨床癥狀，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，經(jīng)常累及多個(gè)臟器器官，肝臟是最容易受到侵犯的器官，也是人體合成多種蛋白質(zhì)的主要器官，是重要的免疫器官。本文結(jié)果顯示，C組高滴度組的肝功能異常檢出率大于B組中滴度組，而B(niǎo)組又大于A組低滴度組，由此可見(jiàn)肝功能異常的檢出率隨著ANA滴度的升高而升高。AID可以產(chǎn)生大量的自身抗體累及臟器器官，臟器器官受損又可誘導(dǎo)產(chǎn)生自身抗體，因此自身抗體的水平高低可以反映臟器的受損程度[8-13]。ANA可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答水平，導(dǎo)致機(jī)體臟器受到自身的免疫性損傷。

從本文來(lái)看，ANA的檢測(cè)對(duì)于AID患者的確診有重要的意義，ANA陽(yáng)性與ENA的陽(yáng)性率矛盾主要是因兩種物質(zhì)的檢測(cè)方法的靈敏度不同導(dǎo)致，但是在高濃度的自身抗體時(shí)，這種檢測(cè)的誤差的影響較小，因此ENA檢測(cè)陽(yáng)性率隨著ANA的滴度而發(fā)生變化，高滴度ANA時(shí)ENA的檢測(cè)陽(yáng)性率也高。ANA陽(yáng)性與肝功能損傷有一定的關(guān)聯(lián)性，隨著ANA的濃度的升高，對(duì)于肝臟的損傷程度也升高，肝功能檢測(cè)陽(yáng)性率隨著ANA的滴度在升高。但ANA陽(yáng)性患者的ENA檢查結(jié)果并非一定為陽(yáng)性，兩者的陽(yáng)性率并不完全吻合，對(duì)其進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)有利于對(duì)自身免疫疾病進(jìn)行輔助診斷。因此ANA的不同滴度檢測(cè)對(duì)于自身免疫性疾病的診斷、治療、預(yù)后的判斷具有重要的臨床意義，對(duì)自身免疫性疾病引起的器官損傷特別是肝臟的損傷診斷具有一定的意義。

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（收稿日期：2015-04-21）