王亞楠 韓瑩琰 范雙喜卜 斌

（北京農(nóng)學(xué)院植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 102206）

紫色葉用萵苣遺傳多樣性及親緣關(guān)系的TRAP分析

王亞楠 韓瑩琰 范雙喜*卜 斌

（北京農(nóng)學(xué)院植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 102206）

利用TRAP標(biāo)記對(duì)47份紫色葉用萵苣種質(zhì)進(jìn)行親緣關(guān)系及遺傳多樣性分析。20對(duì)引物組合共擴(kuò)增出多態(tài)性條帶430條，多態(tài)性比率（PPB）為67.08%。47份紫色葉用萵苣材料的遺傳相似系數(shù)在0.706 3～0.982 8之間，Nei’s基因多樣性指數(shù)（He）和Shannon’s信息指數(shù)（I）分別為0.255 3和0.397 6，遺傳多樣性水平較低。聚類分析結(jié)果表明，47份紫色葉用萵苣材料分為2大類群，第Ⅱ類群又分為5個(gè)亞類，葉片形態(tài)相似的種質(zhì)基本上聚在一起，親緣關(guān)系較近。

紫色葉用萵苣；TRAP標(biāo)記；遺傳多樣性

葉用萵苣（Lactuca sativaL.）是菊科萵苣屬一年或二年生草本植物，在世界范圍內(nèi)廣泛種植（Kristkova et al.，2008），也是菊科植物基因組計(jì)劃（Compositae Genome Project，http://compgenomics.ucdavis.edu/）研究的一個(gè)重要物種（Truco et al.，2007）。葉用萵苣原產(chǎn)于地中海沿岸，5世紀(jì)傳入中國(guó)，近年來(lái)大規(guī)模栽培，按葉色可分為綠色和紫色兩類，其中紫色葉用萵苣色澤艷麗，營(yíng)養(yǎng)成分含量較高，富含花青素，具有抗氧化、抗癌、抗心血管病、美容等保健功能（蔣先明，1999），受到育種者和消費(fèi)者的青睞。

對(duì)萵苣屬種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究歐美國(guó)家報(bào)道較多，多種標(biāo)記方法都有應(yīng)用（Hill et al.，1996；Dilpreet et al.，2011）。Kesseli 等（1991）利用RFLP標(biāo)記對(duì)67份萵苣屬種質(zhì)資源進(jìn)行多樣性分析，否定了栽培萵苣起源于柳葉萵苣（L.saligna）與刺毛萵苣（L. virosa）雜交的假說(shuō)。van de Wiel等（1999）利用SSR標(biāo)記推斷出栽培萵苣與野萵苣（L.serriola）的親緣關(guān)系較近。Simko（2009）利用EST-SSR標(biāo)記成功區(qū)分了96份栽培萵苣的不同亞種，并且能區(qū)分開(kāi)綠色萵苣和紫色萵苣。Uwimana等（2012）利用SSR標(biāo)記分析了歐洲萵苣屬種質(zhì)資源的居群結(jié)構(gòu)，根據(jù)雜交基因流向判斷出野萵苣在歐洲蔓延迅速的原因。

我國(guó)對(duì)葉用萵苣的研究主要集中在生理生化方面（范雙喜和伊東正，2002；聞婧 等，2011），關(guān)于葉用萵苣遺傳多樣性的研究較少，尤其是紫色葉用萵苣更加少見(jiàn)。李悅（2010）采用系統(tǒng)學(xué)和形態(tài)解剖學(xué)方法研究了中國(guó)萵苣屬及其近緣屬的親緣關(guān)系。劉麗娟（2008）利用SRAP標(biāo)記和形態(tài)標(biāo)記對(duì)50份萵苣材料進(jìn)行了遺傳多樣性分析，兩種聚類結(jié)果具有較好的相關(guān)性和符合度。

目標(biāo)區(qū)域擴(kuò)增多態(tài)性（target region amplified polymorphism，TRAP） 是 Hu和 Vick在 SRAP技術(shù)基礎(chǔ)上，利用EST序列設(shè)計(jì)定向引物，擴(kuò)增出與目標(biāo)基因序列相關(guān)的多態(tài)性片段的一項(xiàng)技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、效率高等優(yōu)點(diǎn)，在種質(zhì)資源鑒定評(píng)價(jià)、構(gòu)建遺傳圖譜、重要性狀基因標(biāo)記、輔助選擇育種與指紋分析等方面都有應(yīng)用（Hu & Vick，2003；杜曉華 等，2004；Hu et al.， 2005）。

生產(chǎn)上紫色葉用萵苣的栽培和研究水平遠(yuǎn)落后于綠色葉用萵苣，而且品種類型和數(shù)量有限，品種更新緩慢。部分種質(zhì)缺乏系譜背景，來(lái)源不明，給育種工作帶來(lái)不便。同時(shí)，各地頻繁引種導(dǎo)致品種混雜、退化現(xiàn)象嚴(yán)重。紫色葉用萵苣種質(zhì)資源創(chuàng)新和新基因發(fā)掘亟待解決。本試驗(yàn)首次對(duì)我國(guó)紫色葉用萵苣的遺傳多樣性進(jìn)行研究，利用TRAP標(biāo)記對(duì)47份紫色葉用萵苣種質(zhì)進(jìn)行親緣關(guān)系鑒定和種質(zhì)評(píng)價(jià)，了解其遺傳背景，為深入挖掘利用種質(zhì)資源、指導(dǎo)親本選配、提高育種效率提供理論 參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試47份紫色葉用萵苣材料由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所國(guó)家種質(zhì)資源中期庫(kù)、北京京研益農(nóng)科技發(fā)展中心、中蔬種業(yè)科技（北京）有限公司、河北青縣青豐種業(yè)有限公司提供，品種名稱及葉片形態(tài)特征見(jiàn)表1，來(lái)源地主要集中在北京和河北，有38份；其余的福建3份、山東2份、美國(guó)3份、日本1份。

1.2 試驗(yàn)方法

2012年2月25日溫室播種，3月28日定植于大棚，每個(gè)品種定植1個(gè)小區(qū)，25株，株距40 cm，兩側(cè)設(shè)置保護(hù)行，各小區(qū)管理水平一致。依據(jù)萵苣種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)（李錫香和王海平，2006）觀測(cè)、記錄葉片性狀。

在幼苗長(zhǎng)至5～6片真葉時(shí)分別取嫩葉，液氮速凍后于-80 ℃冰箱保存。利用植物基因組提取試劑盒（北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）提取DNA。采用1%瓊脂糖凝膠電泳及紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA質(zhì)量和濃度，并稀釋至30～50 ng·μL-1，-20 ℃冰箱保存待用。

引 物 序 列 參 照 Li和 Quiros（2001）、Hu等 （2005）的方法進(jìn)行設(shè)計(jì)，用葉片形態(tài)（葉形、葉面褶皺、葉尖、葉緣）差異較大的羅生1號(hào)、紅生1號(hào)、立生3號(hào)、大橡生1號(hào)4個(gè)品種進(jìn)行引物篩選，從60對(duì)引物中篩選出多態(tài)性明顯、條帶清晰、重復(fù)性好的20對(duì)引物組合，對(duì)47份紫色葉用萵苣種質(zhì)進(jìn)行遺傳分析。表2為試驗(yàn)所用引物序列，表3為TRAP分析所用引物組合。TRAPPCR 反應(yīng)體系（20 μL）：DNA 模板 2 μL（60～100 ng·μL-1），10×PCR Buffer（Mg2+free）2 μL，Mg2+1.6 μL（2.0 mmol·L-1），dNTP 0.8 μL（0.2 mmol·L-1）， 引 物 1.5 μL（0.75 μmol·L-1），Taq酶 0.2 μL（1.0 U），ddH2O 11.9 μL。PCR 擴(kuò)增程序：94 ℃預(yù)變性 5 min；94 ℃變性 45 s，35 ℃退火 45 s，72 ℃延伸 1 min，5 個(gè)循環(huán)；94 ℃變性 45 s，51 ℃退火 45 s，72 ℃延伸 1 min，35 個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物用6.0%變性聚丙烯酰胺電泳分離，銀染顯帶。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用人工讀帶在膠片觀察燈上觀測(cè)結(jié)果，根據(jù)引物遷移率和擴(kuò)增條帶的有、無(wú)分別記為1和0，構(gòu)建二元矩陣。采用POPGEN Version 1.31軟件計(jì)算遺傳多態(tài)性數(shù)據(jù)，包括多態(tài)性比率（PPB）、Nei’s基因多樣性指數(shù)（He）、Shannon’s信息指數(shù)（I）。 根 據(jù) Nei和 Li（1979） 的 方 法， 采 用NTSYS-pc 2.1軟件中的DICE法計(jì)算相似系數(shù)；采用UPGMA法進(jìn)行聚類分析，生成聚類圖。

表1 供試種質(zhì)名稱、來(lái)源地、葉片形態(tài)特征及TRAP擴(kuò)增結(jié)果

表2 試驗(yàn)所用TRAP引物序列

表3 20對(duì)TRAP引物組合對(duì)47份紫色葉用萵苣材料的擴(kuò)增結(jié)果

2 結(jié)果與分析

2.1 TRAP-PCR擴(kuò)增結(jié)果

利用20對(duì)引物組合對(duì)47份紫色葉用萵苣材料進(jìn)行TRAP-PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度200～1 000 bp；共擴(kuò)增出641條條帶，其中多態(tài)性條帶430條，平均每對(duì)引物獲得21.50條多態(tài)性條帶，多態(tài)性比率為67.08%；引物組合QGA7H07R-Sa12擴(kuò)增出的條帶數(shù)最多，達(dá)53條；引物組合GGB9J18R-Sa12擴(kuò)增條帶的多態(tài)性最高，多態(tài)性比率為97.06%（表3、圖1）。TRAP-PCR擴(kuò)增能檢測(cè)到特異擴(kuò)增位點(diǎn)的引物有7對(duì)，占引物對(duì)總數(shù)的35.00%。豐富的多態(tài)性條帶及對(duì)品種間稀有遺傳變異的檢測(cè)能力表明，TRAP技術(shù)對(duì)供試紫色葉用萵苣種質(zhì)具有較高的鑒別能力，適合分析該物種的遺傳多樣性。

2.2 遺傳變異性分析

由表1可知，供試47份紫色葉用萵苣材料擴(kuò)增出的條帶數(shù)在353～453條之間，平均為421條；多態(tài)性條帶數(shù)在146～246條之間，平均為214條。引物擴(kuò)增結(jié)果表明（表3），47份紫色葉用萵苣材料的 Nei’s基因多樣性指數(shù)在 0.187 1～0.314 2 之間，平均為 0.255 3；Shannon’s信息指數(shù)在 0.305 1～ 0.476 1之間，平均為 0.397 6；遺傳相似系數(shù)在 0.706 3～0.982 8 之間，平均為 0.837 0。20 號(hào)紅皺羅沙與46號(hào)紫色油麥菜、27號(hào)紅生1號(hào)與46號(hào)紫色油麥菜間的遺傳相似系數(shù)最小，均為0.706 3；25號(hào)美國(guó)紫葉生菜與29號(hào)意大利紫葉生菜間的遺傳相似系數(shù)最大，為0.982 8。47份紫色葉用萵苣種質(zhì)的Nei’s基因多樣性指數(shù)和Shannon’s信息指數(shù)較低，品種間相似系數(shù)較高，說(shuō)明供試紫色葉用萵苣材料的多樣性水平較低，遺傳背景狹窄。

圖1 引物組合GGB9J18R-Sa12對(duì)47份紫色葉用萵苣材料的擴(kuò)增結(jié)果

從表1還可以看出，2號(hào)w32、3號(hào)P-B1、13號(hào)紅帆、14號(hào)P-S6、20號(hào)紅皺羅沙、35號(hào)橡葉生菜等6份材料檢測(cè)到特異性位點(diǎn)，占總數(shù)的12.77%。這表明供試紫色葉用萵苣種質(zhì)雖然多樣性水平較低，但種質(zhì)間依然存在較高的遺傳分化。

2.3 聚類分析

根據(jù)DICE相似系數(shù)，采用UPGMA法構(gòu)建聚類圖（圖2），在相似系數(shù)0.813處將供試47份紫色葉用萵苣材料劃分為2個(gè)類群。

第Ⅰ類群共6份種質(zhì)，為42號(hào)、43號(hào)、44號(hào)、45號(hào)、46號(hào)、47號(hào)，全部為油麥菜類型，葉形偏 長(zhǎng)、披針形或長(zhǎng)橢圓形，葉面褶皺少，邊緣為不規(guī)則鋸齒狀；其余41份種質(zhì)劃分為第Ⅱ類群，在相似系數(shù)0.828處進(jìn)一步細(xì)分為5個(gè)亞類。

第1亞類共17份種質(zhì)，1號(hào)和2號(hào)為半結(jié)球皺葉類型；5號(hào)為半結(jié)球直立類型；21號(hào)、22號(hào)、23號(hào)、24號(hào)、25號(hào)、29號(hào)、30號(hào)、31號(hào)的親緣關(guān)系較近，形態(tài)上表現(xiàn)為：葉片提琴形或長(zhǎng)橢圓形，葉面皺或微皺，葉尖圓或鈍尖，葉緣為不規(guī)則鋸齒狀或鈍齒狀；33號(hào)、38號(hào)、39號(hào)、40號(hào)的親緣關(guān)系較近，形態(tài)上表現(xiàn)為：葉片深裂宛如橡葉、近圓形、葉面褶皺較少、葉尖為銳尖、葉緣重鋸齒狀，此亞類中的36號(hào)、37號(hào)也具有相似形態(tài)，但是與這4份種質(zhì)的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。

第2亞類共18份種質(zhì)，全部為皺葉類型。9 號(hào)、10號(hào)、11號(hào)、12號(hào)、14號(hào)、16號(hào)、17號(hào)、18 號(hào)、19號(hào)、20號(hào)、26號(hào)的親緣關(guān)系較近，形態(tài)上表現(xiàn)為：葉面褶皺多、葉尖較圓、葉緣為重鋸齒狀或細(xì)鋸齒狀，此亞類中的13號(hào)、15號(hào)也具有相似形態(tài)，但與這11份種質(zhì)的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，其中13號(hào)紅帆的親緣關(guān)系最遠(yuǎn)，是美國(guó)引進(jìn)品種，表現(xiàn)出與國(guó)內(nèi)品種的差異；27號(hào)、28號(hào)與第1亞類中的21號(hào)、22號(hào)等種質(zhì)形態(tài)相似，32號(hào)、34號(hào)、41號(hào)與第1亞類中的33號(hào)、38號(hào)等種質(zhì)形態(tài)相似，但是這5份種質(zhì)卻歸為第2亞類，TRAP聚類結(jié)果與形態(tài)分類不完全相同可能是因?yàn)檫@幾份種質(zhì)的遺傳背景比較復(fù)雜，或者是TRAP所用引物擴(kuò)增區(qū)域的局限性造成的。

第3亞類包含3號(hào)和4號(hào)2份種質(zhì)，都是半結(jié)球直立類型，亦都是由北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心選育而成。

圖2 47份紫色葉用萵苣種質(zhì)TRAP聚類分析樹(shù)狀圖（UPGMA法）

第4亞類共3份種質(zhì)，6號(hào)、7號(hào)是半結(jié)球直立類型，由北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心育成；35號(hào)為皺葉類型，來(lái)自河北，其形態(tài)與7號(hào)相似，葉片倒卵形、葉面微皺、葉尖圓、葉緣呈不規(guī)則鋸齒狀。

第5亞類只有1份種質(zhì)8號(hào)，為半結(jié)球直立 類型。

聚類結(jié)果顯示（圖2），13號(hào)、14號(hào)、22號(hào)、23號(hào)等4份國(guó)外引進(jìn)品種與國(guó)內(nèi)品種不存在明顯的遺傳差異，表明其有共同的遺傳基礎(chǔ)；供試材料在地理來(lái)源聚類上混雜，沒(méi)有明顯的規(guī)律性，這與供試種質(zhì)的來(lái)源地主要集中在河北及北京地區(qū)有關(guān)，也可能是頻繁引種使紫色葉用萵苣種質(zhì)間某些基因相互滲入，打破了種質(zhì)的地域限制。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)采用的20對(duì)TRAP引物組合在47份紫色葉用萵苣種質(zhì)間均能擴(kuò)增出條帶，平均每對(duì)引物擴(kuò)增出多態(tài)性條帶21.50條，多態(tài)性比率為67.08%，可見(jiàn)采用TRAP標(biāo)記檢測(cè)紫色葉用萵苣種質(zhì)能產(chǎn)生較多譜帶，多態(tài)性位點(diǎn)豐富，這與Hu等（2005）在萵苣屬種質(zhì)上的擴(kuò)增結(jié)果相似，證明TRAP標(biāo)記具有穩(wěn)定的重復(fù)性。劉麗娟（2008）采用SRAP標(biāo)記對(duì)萵苣屬植物擴(kuò)增得到的引物多態(tài)性條帶平均為25.58條，表明TRAP標(biāo)記對(duì)紫色葉用萵苣的遺傳分析與SRAP具有可比擬的擴(kuò)增效率和圖譜。

本試驗(yàn)采用TRAP標(biāo)記對(duì)47份紫色葉用萵苣材料的親緣關(guān)系進(jìn)行分類，將其劃分為2大類群，第Ⅱ類群又劃分為5個(gè)亞類。依據(jù)Lebeda等 （2007）的分類方法可以將紫色葉用萵苣分為脆葉結(jié)球萵苣、綿葉結(jié)球萵苣、直立萵苣、皺葉萵苣和拉丁萵苣。采用 EST-SSR（Simko，2009）、AFLP（Hill et al.，1996） 和 SAMPL（Witsenboer et al.，1997）等分子標(biāo)記方法對(duì)萵苣屬種質(zhì)資源進(jìn)行多樣性分析，聚類結(jié)果與Lebeda等（2007）的劃分結(jié)果一致。本試驗(yàn)也得到了相似的聚類結(jié)果：供試47份紫色葉用萵苣種質(zhì)含有直立萵苣和皺葉萵苣2個(gè)類型，TRAP聚類結(jié)果基本上將2個(gè)類型區(qū)分開(kāi)了，第1、2亞類主要為皺葉萵苣，第3、4、5亞類主要為直立萵苣。

紫色葉用萵苣的主要食用部位是葉片，葉片性狀是其重要的形態(tài)特征。其中皺葉萵苣類型葉形、葉褶皺、葉尖、葉緣等葉片表型性狀存在較大差異（陳青君 等，2011）。卜斌（2013）對(duì)皺葉萵苣23個(gè)形態(tài)指標(biāo)的調(diào)查結(jié)果表明，葉尖、葉形、葉緣、葉褶皺等4個(gè)指標(biāo)相似的品種親緣關(guān)系較近。本試驗(yàn)在分子水平上驗(yàn)證了這一結(jié)果，33份皺葉萵苣種質(zhì)中在這4個(gè)指標(biāo)上相似的種質(zhì)基本聚在一起，表明可以依據(jù)這4個(gè)葉片性狀對(duì)皺葉萵苣進(jìn)行 分類。

按照植物學(xué)分類紫色葉用萵苣可劃分為3個(gè)變種：皺葉萵苣（L. sativavar.crispaL.）、結(jié)球萵苣（L. sativavar.capitataL.）、直立萵苣（L. sativavar.romanaGars）（蔣先明，1999）。油麥菜近年來(lái)栽培較為普遍，它的植物學(xué)分類一直有爭(zhēng)議，林辰壹等（2005）通過(guò)比較油麥菜、萵苣、菊苣的形態(tài)特征和生長(zhǎng)特性認(rèn)為其是萵苣的一個(gè)變種；金波等（2002）則認(rèn)為油麥菜是菊苣的一個(gè)變種。本試驗(yàn)中，TRAP聚類結(jié)果顯示紫色油麥菜（42號(hào)、43 號(hào)、44號(hào)、45號(hào)、46號(hào)、47號(hào)）被劃為第Ⅰ類群，與直立萵苣親緣關(guān)系較近，與散葉萵苣親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。由于供試材料覆蓋萵苣變種類型不全面，油麥菜及直立萵苣品種較少，不能確定油麥菜屬于萵苣的哪個(gè)變種，需要進(jìn)一步探討。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，供試紫色葉用萵苣種質(zhì)間差異較小，遺傳基礎(chǔ)狹窄，種質(zhì)間的遺傳相似系數(shù)總體偏高，變異范圍在 0.706 3～0.982 8 之間，Nei’s基因多樣性指數(shù)平均為0.255 3，Shannon’s信息指數(shù)平均只有0.397 6。Kesseli等（1991）認(rèn)為由于多系起源及復(fù)雜的馴化過(guò)程使萵苣具有豐富的形態(tài)和較高的遺傳多樣性；董潔等（2009）的研究表明紫色散葉萵苣主要數(shù)量性狀變異范圍大，蘊(yùn)藏著很大的選擇潛力。本試驗(yàn)結(jié)果與這兩者有所不同，可能是因?yàn)楣┰囎仙~用萵苣種質(zhì)類型單一，多為散葉類型，而葉用萵苣的變異主要發(fā)生在不同類型間，同一類型種質(zhì)間親緣關(guān)系較近，遺傳多樣性低。造成這種現(xiàn)象的原因一方面是紫色葉用萵苣是自花授粉植物，長(zhǎng)期自交繁育使群體內(nèi)基因逐漸純和，遺傳變異減少；另一方面可能是優(yōu)良品種的循環(huán)利用，在商業(yè)化育種中優(yōu)良種質(zhì)資源或相關(guān)基因被反復(fù)循環(huán)利用是常見(jiàn)的，在相近的種質(zhì)基因庫(kù)范圍內(nèi)育種，導(dǎo)致遺傳多樣性的降低，反映在形態(tài)特征上為表型相近。棉花、六倍體大麥等作物由于優(yōu)良種質(zhì)的循環(huán)利用也表現(xiàn)出遺傳多樣性降低（Bowman et al.，1996；van Esbroeck et al.，1998；Mikel，2013）。

遺傳多樣性低這一結(jié)果也反映了我國(guó)紫色葉用萵苣的育種現(xiàn)狀，目前在國(guó)內(nèi)生產(chǎn)中占較大份額的是綠色結(jié)球萵苣，紫色葉用萵苣雖然逐漸受到重視，但育種基礎(chǔ)薄弱。此外，中國(guó)不是葉用萵苣的起源中心，品種多為國(guó)外引進(jìn)，后來(lái)選育的品種也多為進(jìn)口品種的衍生后代，自主育成的紫色葉用萵苣品種很少。同時(shí)，由于頻繁引種，紫色葉用萵苣存在同物異名或同名異物現(xiàn)象，如25號(hào)美國(guó)紫葉生菜與29號(hào)意大利紫葉生菜兩個(gè)品種來(lái)自不同的種子公司，但遺傳相似系數(shù)為0.982 8，很可能是同物異名。在今后的育種工作中應(yīng)充分挖掘、利用含有特異等位基因的品種，選擇遺傳差異大、親緣關(guān)系遠(yuǎn)的品種為雜交親本，逐漸豐富、擴(kuò)寬紫色葉用萵苣的遺傳基礎(chǔ)，提高育種效率。

卜斌．2013．葉用萵苣種質(zhì)資源形態(tài)標(biāo)記聚類分析〔碩士論文〕．北京：北京農(nóng)學(xué)院．

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Analysis of Genetic Diversity and Relationship in Purple Lettuce by TRAP Technique

WANG Ya-nan，HAN Ying-yan，F(xiàn)AN Shuang-xi*，BU Bin

（DepartmentofPlantScienceandTechnology，BeijingAgriculturalCollege，Beijing102206，China）

TRAP technique was used to analyze the genetic diversity and relationship of 47 purple lettuce（Lactuca sativaL. ） species．20 pairs of TRAP primers amplified polymorphic bands were 430，and the polymorphic rate was 67.08%．The genetic similarity coefficient was 0.706 3-0.982 8．The average Nei’s gene diversity index and Shannon’s information index were 0.255 3 and 0.397 6，respectively，indicating that the low degree of genetic diversity in purple lettuce．The cluster analysis divided these 47 species into 2 major groups，and the Ⅱ group could be devided into 5 subgroups．The species with similar leaf morphology were clustered together，they had closer genetic relationship．

Purple lettuce；TRAP marker；Genetic diversity

王亞楠，女，碩士研究生，專業(yè)方向：葉用萵苣種質(zhì)資源與分子標(biāo)記應(yīng)用，E-mail：wynxueshu369@163.com

*通訊作者（Corresponding author）：范雙喜，男，教授，博士生導(dǎo)師，專業(yè)方向：蔬菜生理與分子機(jī)理，E-mail：fsx20@163.com

2014-02-25；接受日期：2014-04-21

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31372057），現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系北京市葉類蔬菜創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)專項(xiàng)（blvt-02），北京市科技新星計(jì)劃項(xiàng)目（2010B020）