李艷青 朱秀高
1.濰坊科技學(xué)院生物研發(fā)中心,山東壽光 262700;2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京 100000;3.武漢回盛生物科技有限公司,武漢 430042
2014年3月份,某養(yǎng)豬企業(yè)負(fù)責(zé)人反應(yīng)其場(chǎng)內(nèi)體質(zhì)量30~50kg左右的生長育肥豬從2013年開始經(jīng)常出現(xiàn)呼吸道疾病,使用多種藥物預(yù)防和治療均沒有明顯效果,發(fā)病率約為30%以上,病死率約5%,很多病豬后期成為僵豬,給生產(chǎn)成績帶來極大影響。
該豬場(chǎng)存欄母豬為700多頭,在同一個(gè)場(chǎng)內(nèi)采用分區(qū)式飼養(yǎng),母豬和保育豬群為A區(qū),生長育肥豬群為B區(qū),兩區(qū)之間為單一通道、設(shè)有大門和消毒池、直線距離約為200m,除技術(shù)人員外均為獨(dú)立負(fù)責(zé)。對(duì)豬群進(jìn)行全面檢查發(fā)現(xiàn)問題豬群主要存在以下癥狀:母豬群的淚斑出現(xiàn)率約為60%、返情率約為13%;保育豬群20%左右出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、消瘦,有的有輕微腹式呼吸等呼吸道癥狀;生長育肥豬群的發(fā)病豬主要表現(xiàn)為消瘦、咳嗽、腹式呼吸、體溫升高(平均為39℃左右)、有的耳尖出現(xiàn)干性壞死。
對(duì)5頭發(fā)病保育豬和生長育肥豬放血致死后解剖觀察,發(fā)現(xiàn)保育豬腫脹的關(guān)節(jié)內(nèi)有清亮或淡黃色的液體,心包液明顯增多、有的渾濁,肝臟表面有纖維素滲出形成的包膜,腹腔內(nèi)有零星纖維素滲出形成的淡黃色干酪樣凝塊;生長育肥豬的表現(xiàn)有少量與保育豬相似,普遍性的癥狀為肺臟腫脹、間質(zhì)明顯增寬,其他臟器無特征性病變。
現(xiàn)場(chǎng)采集不同胎次母豬血液30份、外觀健康與發(fā)病保育豬血液20份、外觀健康與發(fā)病生長育肥豬血液10份,共60份。同時(shí)采集解剖豬的肺臟、脾臟、淋巴結(jié)、肝臟等送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行抗體和抗原檢測(cè)。
綜合臨床觀察、病豬解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(圖1、2和表1)結(jié)果,確診豬群的癥狀是由副豬嗜血桿菌引起,同時(shí)群內(nèi)存在藍(lán)耳病病毒感染,且豬場(chǎng)流行毒株與疫苗免疫毒株存在基因差異。
圖1 組織病料及血清PCR檢測(cè)結(jié)果
圖2 PRRSV分離株與常用疫苗株的進(jìn)化分析
表1 各階段豬血清的抗體檢測(cè)結(jié)果
分別對(duì)豬群采取如下措施。
1)全場(chǎng)的藍(lán)耳疫苗免疫停止6個(gè)月;
2)母豬群每噸飼料中加入5%泰萬菌素1.5kg+定喘散1kg+綠益態(tài)1kg,每月1次,每次10d,全群飼喂,連續(xù)用5個(gè)月;
3)產(chǎn)房母豬每噸飼料中加入10%氟苯尼考600 g+復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉300g+綠益態(tài)1kg,臨產(chǎn)前飼喂7d;
4)現(xiàn)有保育豬及生長育肥豬每噸飲水中加入10%氟苯尼考800g+5%強(qiáng)力霉素1kg+復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉300g+綠益態(tài)1kg,連用5d,有嚴(yán)重呼吸道癥狀的用2.5%硫酸頭孢喹肟注射液按0.1mL/kg的劑量,每天注射1次,連用3d;
5)以后斷奶豬群在斷奶后,于每噸飼料中加入10%氟苯尼考600g+5%強(qiáng)力霉素1kg+定喘散1kg+綠益態(tài)1kg,連用7d;轉(zhuǎn)群后,于每噸飼料中加入10%氟苯尼考600g+5%強(qiáng)力霉素1kg+復(fù)方磺胺氯達(dá)嗪鈉300g+定喘散1kg,連用7d。
豬場(chǎng)使用處理方案1個(gè)月后回訪,反饋原有發(fā)病豬的癥狀已經(jīng)消失,生長恢復(fù)正常,個(gè)別成為僵豬的仔豬進(jìn)行了淘汰處理,后續(xù)斷奶仔豬及生長育肥豬應(yīng)用后的發(fā)病率明顯降低,母豬正在按計(jì)劃方案繼續(xù)使用。
根據(jù)對(duì)豬場(chǎng)的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室診斷及與豬場(chǎng)各方面人員的溝通,分析本次豬群發(fā)病的主要原因?yàn)樗{(lán)耳疫苗的使用不合理,疫苗毒株與流行毒株匹配度不高,免疫后產(chǎn)生的抗體不能對(duì)豬體有充分的保護(hù)作用,造成豬群出現(xiàn)PRRSV亞臨床感染,進(jìn)一步導(dǎo)致其他疾病易感,如副豬嗜血桿菌病等,因此疾病處理過程中應(yīng)在治標(biāo)的同時(shí)兼顧治本,否則病原很難從場(chǎng)內(nèi)控制。自2006年國內(nèi)暴發(fā)HP-PRRSV感染后,高致病性毒株疫苗的推出雖然暫時(shí)控制了豬群的發(fā)病,但高致病性疫苗和經(jīng)典性疫苗的共存給豬場(chǎng)選擇合適的疫苗造成了困難。在豬場(chǎng)服務(wù)中,筆者發(fā)現(xiàn)很多豬場(chǎng)由于疫苗選擇不當(dāng)而造成病毒在場(chǎng)內(nèi)的持續(xù)性蔓延,同時(shí)給其他疾病的控制也帶來極大干擾。依據(jù)現(xiàn)有免疫學(xué)經(jīng)驗(yàn),針對(duì)變異性較大的病毒,使用血清型和基因型與流行株一致的毒株制備的疫苗對(duì)感染的保護(hù)力最高,如禽流感(AI)H5亞型疫苗已經(jīng)根據(jù)流行毒株的變異,進(jìn)行了多次改進(jìn)。Frossard等對(duì)從2003年到2007年分離到的100株歐洲型PRRSV進(jìn)行了分析,結(jié)果顯示與90年代的毒株相比病毒已經(jīng)發(fā)生了變異,以O(shè)RF7序列為模型分析顯示每年每個(gè)位點(diǎn)的置換率為3.8×10-3[1]。張軍杰等對(duì)從502份血清中分離到的HP-PRRSV進(jìn)行的基因分析顯示,分離株與JXA-1的同源性為87.1%~100%[2]。因此,豬場(chǎng)進(jìn)行PRRS的免疫時(shí)應(yīng)首先確定場(chǎng)內(nèi)流行毒株與各類疫苗毒株的同源性,選用同源性最高的疫苗毒株進(jìn)行免疫可從最大程度上獲得高保護(hù)力。本案例中,豬場(chǎng)是在免疫某經(jīng)典株疫苗3個(gè)月后出現(xiàn)的生產(chǎn)不穩(wěn)定、發(fā)病率增加,聽從建議停用6個(gè)月后,再次選用了另一與其場(chǎng)內(nèi)病毒處于同一進(jìn)化分支的疫苗株進(jìn)行免疫,至今生產(chǎn)中沒有出現(xiàn)過原有病例。此外,Zhao等研究發(fā)現(xiàn)泰萬菌素具有明顯的抑制PRRSV感染導(dǎo)致的肺炎病變[3],Stuart的研究指出泰萬菌素能夠抑制PRRSV的細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖[4]。PRRS不穩(wěn)定場(chǎng)除了合理選擇使用疫苗,還應(yīng)在豬群特別是母豬群中使用泰萬菌素以減少PRRSV在場(chǎng)內(nèi)的流行、降低病毒感染造成發(fā)病的機(jī)率。
診斷在疾病處理過程中具有重要作用。近年來豬病的表現(xiàn)越來越復(fù)雜,很多豬病的典型臨床癥狀已經(jīng)很少見到,且混合感染問題更加突出,影子病的存在進(jìn)一步增加了疾病誤診的可能,因此當(dāng)前疾病診斷應(yīng)采用一些已經(jīng)證實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)室方法,以確保診斷結(jié)果的可靠性,這樣才能為疾病的處理提供正確方向。本案例中就同時(shí)采用了PCR和ELISA兩種方法進(jìn)行綜合診斷,并為最終確診提供了重要的參考數(shù)據(jù)。
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