任敏，李敏，黃瀟，夏琴，劉聰

(成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 611137)

·中藥農(nóng)業(yè)·

眉山市栽培川芎品質(zhì)初步評(píng)價(jià)

任敏，李敏*，黃瀟，夏琴，劉聰

(成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 611137)

目的：對(duì)眉山市永壽鎮(zhèn)、洪雅縣栽培川芎的質(zhì)量進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，為川芎擴(kuò)大生產(chǎn)選擇新的適宜種植區(qū)域，并為眉山市川芎規(guī)范化種植發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。方法：測(cè)定眉山市栽培川芎生物產(chǎn)量、醇溶性浸出物、揮發(fā)油、阿魏酸含量、鎘及有機(jī)農(nóng)藥殘留量，并與道地產(chǎn)區(qū)彭州市敖平鎮(zhèn)進(jìn)行對(duì)比研究。結(jié)果：綜合生物產(chǎn)量、成分含量及重金屬鎘等結(jié)果，顯示眉山市永壽鎮(zhèn)及洪雅縣兩個(gè)產(chǎn)地川芎藥材質(zhì)量有一定差異。其中生物產(chǎn)量以眉山市永壽鎮(zhèn)與彭州敖平鎮(zhèn)的較高；三地阿魏酸及醇溶性浸出物含量均達(dá)到藥典限量要求(阿魏酸≥0.10%、醇溶性浸出物≥12.0%)，醇溶性浸出物以洪雅縣的最高，分別高出敖平鎮(zhèn)和永壽鎮(zhèn)0.11%、1.14%；阿魏酸及揮發(fā)油含量以永壽鎮(zhèn)的最高，其中揮發(fā)油含量分別高出敖平鎮(zhèn)及洪雅縣0.51%、0.21%；鎘量以永壽鎮(zhèn)最低，并符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(≦0.3 ppm)，為0.29 ppm，敖平鎮(zhèn)及洪雅縣分別高出限量的50.0%、70.0%；三地樣品中均未檢測(cè)出有機(jī)農(nóng)藥殘留。結(jié)論：永壽鎮(zhèn)產(chǎn)川芎藥材質(zhì)量較優(yōu)，可作為川芎新的種植區(qū)域進(jìn)行推廣。

川芎；永壽鎮(zhèn)；質(zhì)量評(píng)價(jià)；阿魏酸；鎘

川芎為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖。川芎系芎藭之產(chǎn)于四川者始，載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1]，列為上品，主要用于發(fā)散風(fēng)寒，祛風(fēng)止痛，為我國的傳統(tǒng)中藥，藥用歷史悠久。目前，由于川芎藥材市場(chǎng)價(jià)格波動(dòng)大導(dǎo)致農(nóng)戶種植川芎的積極性下降，以及城市規(guī)劃(統(tǒng)建點(diǎn)、川西大道、天然氣管道)占用農(nóng)田等原因，川芎傳統(tǒng)種植區(qū)域面積大規(guī)模減少[2]。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，2013年川芎種植面積較2012年減少了30%，同時(shí)，隨著產(chǎn)區(qū)土地工業(yè)污染不斷加重，川芎含鎘超標(biāo)較為普遍，并對(duì)土壤中鎘元素具有一定的富集作用[3]，使傳統(tǒng)種植區(qū)域面臨了巨大的挑戰(zhàn)，也成為了制約川芎產(chǎn)業(yè)化規(guī)模化發(fā)展的關(guān)鍵因素之一。

近年來，川芎有從傳統(tǒng)種植區(qū)向周邊擴(kuò)大發(fā)展的趨勢(shì)，其中眉山地區(qū)由于地勢(shì)平坦交通便利、空閑土地較多等原因已逐漸發(fā)展成了川芎重要的產(chǎn)區(qū)之一。在陳林等[4]研究中顯示眉山地區(qū)環(huán)境100%適宜于川芎栽培，銀玲[5]等也對(duì)眉山市彭山縣種植川芎進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示彭山川芎與道地產(chǎn)區(qū)的質(zhì)量之間沒有顯著性差異。但新發(fā)展的眉山市永壽鎮(zhèn)及洪雅縣栽培川芎質(zhì)量如何，與傳統(tǒng)種植區(qū)域的川芎質(zhì)量有何差異卻鮮有報(bào)道。 現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明川芎揮發(fā)油類成分具有治療心腦血管疾病等作用[6]，阿魏酸及其衍生物具有抑制血小板聚集等作用[7]?，F(xiàn)將彭州敖平鎮(zhèn)產(chǎn)川芎作為對(duì)照，測(cè)定藥材中鎘、揮發(fā)油、阿魏酸及生物產(chǎn)量等指標(biāo)，對(duì)眉山市永壽鎮(zhèn)、洪雅縣所產(chǎn)的川芎質(zhì)量進(jìn)行了初步的綜合評(píng)價(jià)，為川芎在眉山地區(qū)的擴(kuò)大生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料、儀器與試劑

1.1 材料

將彭州市小魚洞鎮(zhèn)的苓種分別在彭州市敖平鎮(zhèn)、眉山市永壽鎮(zhèn)及眉山市洪雅縣進(jìn)行川芎種植試驗(yàn)，于2013年4月下旬，在3個(gè)產(chǎn)地分別采集8批樣品，共計(jì)24批，每批樣品采集樣方面積設(shè)置為5 m2。所有樣品均經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)李敏教授鑒定，為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖。藥材樣品詳表見表1。

表1 藥材來源

1.2 儀器

Agilenttechnologies1200高效液相色譜儀(四元梯度泵、1260Infinity標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器、1260DAD檢測(cè)器)；色譜柱：KromasilC18(5 μm，250 mm×4.6 mm)；KQ-500DB數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；BP-12ls精密電子天平(浙江精密儀器有限公司)；101型電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；DZKW-4電子恒溫水浴鍋(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)。

1.3 試劑及試藥

阿魏酸對(duì)照品(批號(hào)：A-002-120911，供含量測(cè)定，HPLC≥98%，成都瑞芬思生物科技有限公司)；甲醇為色譜純；乙醇及其余試劑均為分析純級(jí)別。

2 方法和結(jié)果

2.1 性狀鑒別研究

照《中華人民共和國藥典》2010版一部川芎項(xiàng)下性狀及附錄Ⅱ項(xiàng)下藥材、飲片取樣法和檢定通則進(jìn)行[4]。敖平鎮(zhèn)及永壽鎮(zhèn)川芎多呈結(jié)節(jié)狀拳形團(tuán)塊，洪雅縣的多呈分散狀拳形團(tuán)體。藥材表面均灰褐色，粗糙皺縮，或殘存鱗葉，有多數(shù)平行隆起的輪節(jié)，頂端有凹陷的類圓形莖痕。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，不易折斷，斷面多灰黃色，散有黃棕色的油室，形成層環(huán)呈波狀。

2.2 川芎生物產(chǎn)量測(cè)定研究

將24批樣品，于55 ℃烘干，烘干后撞去泥土及須根，稱重并換算成生物產(chǎn)量，結(jié)果見表2。眉山市永壽鎮(zhèn)、洪雅縣兩個(gè)產(chǎn)地川芎生物產(chǎn)量與道地產(chǎn)區(qū)敖平鎮(zhèn)的稍有差異，分別高1.47%和低23.71%。

表2 不同產(chǎn)地川芎藥材生物產(chǎn)量結(jié)果 kg·667 m-2

2.3 成分含量測(cè)定研究

2.3.1 醇溶性浸出物含量測(cè)定 按照《中華人民共和國藥典》2010版一部川芎項(xiàng)下方法測(cè)定醇溶性浸出物含量[8]，結(jié)果見表3。

2.3.2 揮發(fā)油含量測(cè)定 阮琴等[9]選擇3種不同方法提取川芎揮發(fā)油，并進(jìn)行了GC-MS分析鑒定，研究結(jié)果表明水蒸氣蒸餾提取的川芎揮發(fā)油中內(nèi)酯類有效成分含量相對(duì)較高。本實(shí)驗(yàn)參照《中華人民共和國藥典》2010版一部附錄XD乙法水蒸氣蒸餾提取并測(cè)定藥材揮發(fā)油含量，結(jié)果見表3。

2.3.3 阿魏酸含量測(cè)定 參照《中華人民共和國藥典》2010版一部川芎項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定。

2.3.3.1 色譜條件 色譜柱為KromasilC18(5 μm，250 mm×4.6 mm)：流動(dòng)相為甲醇-1%醋酸溶液(30∶70)；檢測(cè)波長321 nm；流速1.0 mL·min-1，柱溫30 ℃，進(jìn)樣量10 μL。對(duì)照品溶液、供試品溶液的色譜圖見圖1～2。

圖1 阿魏酸對(duì)照品的色譜圖

圖2 川芎供試品的色譜圖

2.3.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對(duì)照品100 μg，置5 mL棕色容量瓶中，加70%甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，得濃度為20.0 μg·mL-1的對(duì)照品溶液。

2.3.3.3 樣品溶液的制備 取各樣品藥材粉末(過四號(hào)篩)0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，密塞后稱定重量，水浴加熱回流30 min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，微孔濾膜(0.45 μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取對(duì)照品溶液2，5，10，15，20 μL進(jìn)樣，以阿魏酸峰面積積分值為縱坐標(biāo)，其含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程為y=27.884 864 8x-1.148 941 7，r=0.999 9，阿魏酸含量在0.04～0.50 μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

2.3.3.5樣品含量測(cè)定 精密吸取樣品溶液10 μL進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定樣品含量。結(jié)果見表3。

由表3可知醇溶性浸出物含量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)(≥12.0%)。以洪雅縣的最高，分別比敖平鎮(zhèn)及永壽鎮(zhèn)高0.11%、1.14%；揮發(fā)油含量以永壽鎮(zhèn)的最高，分別高出敖平鎮(zhèn)及洪雅縣0.51%、0.21%；阿魏酸含量均高出藥典標(biāo)準(zhǔn)(≥0.10%)的2～3倍，以永壽鎮(zhèn)的最高，分別比敖平鎮(zhèn)及洪雅縣高0.03%、0.08%。

表3 不同產(chǎn)地川芎成分含量測(cè)定結(jié)果 s

2.4 川芎重金屬及農(nóng)藥殘留量測(cè)定研究

分別委托四川省食品藥品質(zhì)量檢驗(yàn)所及四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析檢測(cè)中心對(duì)不同產(chǎn)地川芎樣品重金屬鎘含量和有機(jī)農(nóng)藥殘留量(六六六、DDT、五氯硝基苯)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見表4。永壽鎮(zhèn)樣品重金屬鎘的含量符合WM2-2004《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》，鎘為0.3 mg·kg-1(GB/T5009.15-1996)要求[5]，而敖平鎮(zhèn)、洪雅縣分別高出標(biāo)準(zhǔn)限量的50.0%及70.0%。3個(gè)產(chǎn)地川芎藥材中均未檢測(cè)出有機(jī)農(nóng)藥殘留。

表4 不同產(chǎn)地川芎鎘(Cd)及有機(jī)農(nóng)藥殘留量測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論與討論

三地川芎藥材以敖平鎮(zhèn)及永壽鎮(zhèn)栽培的川芎生物產(chǎn)量較高，洪雅縣的最低；川芎成分含量間無明顯差異，醇溶性浸出物及阿魏酸含量均達(dá)到藥典要求；三地中僅永壽鎮(zhèn)川芎藥材含鎘量達(dá)到行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。通過對(duì)三地川芎在生物產(chǎn)量、成分含量和金屬鎘含量等方面進(jìn)行了綜合分析，結(jié)果顯示眉山市東坡區(qū)永壽鎮(zhèn)栽培川芎藥材質(zhì)量較佳，可以考慮作為新的川芎種植區(qū)域進(jìn)行推廣。

眉山地區(qū)與主產(chǎn)區(qū)彭州敖平鎮(zhèn)相比，緯度較低，年平均氣溫較高。光和熱會(huì)影響植株的光合、呼吸、蒸騰等物質(zhì)代謝過程，從而影響植物的有效物質(zhì)積累過程。結(jié)合當(dāng)?shù)厣a(chǎn)環(huán)境，永壽鎮(zhèn)作為川芎新的種植區(qū)，其川芎規(guī)范化種植技術(shù)仍需要進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)樣品量較少，僅初步對(duì)眉山兩地川芎進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)，后期將收集更多的樣品，并增加研究及測(cè)定內(nèi)容，全面評(píng)價(jià)眉山地區(qū)栽培川芎的質(zhì)量。

植物對(duì)土壤鎘的吸收主要由土壤鎘含量和植物遺傳學(xué)特性決定[11]，川芎根莖中鎘又是低背景、高富集，在今后的研究中將對(duì)種植區(qū)域土壤含鎘量進(jìn)行測(cè)定，從土壤改良及品種選育出發(fā)解決川芎鎘超標(biāo)問題，促進(jìn)其出口創(chuàng)匯。

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Preliminary Quality Evaluation of CultivatedRhizomaChuanxionginMeishanCity

REN Min，LI Min*，HUANG Xiao，XIA Qin，LIU Cong

(College of Pharmacy，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，China；The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine，Chengdu 611137，China；State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research，Development and Utilization of Chinese Medicine Resources，Chengdu 611137，China)

Objective：To evaluate the quality ofRhizomachuanxiongplanted in Yongshou and Hongya Town in MeiShan City preliminarily，for the purpose of selection of a new and suitable cultivation areas for expand the production ofRhizomachuanxiong，and provide a scientific basis for the development ofRhizomachuanxiongstandardized cultivation.Methods：Biological yield，alcohol-soluble extract，ferulic acid，volatile oil，cadmium and inorganic pesticide residues ofRhizomachuanxiongfrom Meishan and Aoping of genuine producing area were measured and compared.Results：The results of integrated biomass production，ingredients and cadmium revealed that the quality ofRhizomachuanxiongplanted in Yongshou and Hongya was varied.Biological yield of samples from Yongshou and Aopin reached a higher level.Ferulic acid content and alcohol-soluble extract content of all samples met the Chinese pharmacopoeia requirements(ferulic acid 0.10%，alcohol-soluble extract 12.0% or higher).Alcohol-soluble extract content of samples from Hongya was 0.11%，1.14% higher than that of sample from Aoping and Yongshou，respectively.The ferulic acid and volatile oil content of samples from Yongshou was the highest，which was 0.51%，0.21% higher than that of samples from Aoping and Hongya，respectively.The cadmium content of samples from Yongshou was the lowest，with an average value of 0.28ppm and reached the industry standard(≦0.3 ppm).The cadmium content of samples from Aoping and Hongya was 50.0%，70.0% higher than the standard，respectively.Pesticide residues were not detected in any samples.Conclusion：Rhizomachuanxiongplanted in Yongshou have the better quality，and Yongshou can be promoted as a new area forRhizomachuanxiongcultivation.

Rhizomachuanxiong；Yongshou town；quality evaluation；ferulic acid；cadmium

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.2.013

2014-10-14)

*

李敏，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥品種、質(zhì)量及資源研究；E-mail：028limin@163.com