顏志成，謝天宇，王 榮，譚支良

（1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院，湖南 長沙410128；2.中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，湖南 長沙410128； 3. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特010018；4. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長沙410128）

甲烷（Methane，CH4)是一種主要的溫室氣體[1]，其增溫潛能是CO2的20～30 倍[2]。反芻家畜每年排放甲烷約80 Tg（1 Tg=1012 g），占人類活動排放總量的33%[3]。根據(jù)《中國畜牧業(yè)統(tǒng)計年鑒》統(tǒng)計，中國2010年奶牛存欄量已高達1 420.1 萬頭[4]。王榮等[5]報道，2010年中國奶牛胃腸道甲烷排放總量為0.87 Tg，占反芻家畜胃腸道甲烷排放總量的13.1%，超過山羊和綿羊胃腸道甲烷排放量及其比例，成為中國反芻家畜胃腸道甲烷排放第二大來源。另外，隨著居民生活水平的進一步提高，牛奶的需求量將越來越大，可以預(yù)測中國將來奶牛存欄量將會繼續(xù)增加。奶牛存欄量的增長亦會直接導(dǎo)致奶牛胃腸道甲烷排放總量大幅度增加，因此奶牛胃腸道甲烷排放的相關(guān)研究得到科學(xué)家們的高度關(guān)注。

奶牛采食量與溫度密切相關(guān)[6-7]。研究表明[8-9]，當環(huán)境溫度超過25℃時，奶牛的采食量會下降；當環(huán)境溫度達到30℃以上時，采食量急劇下降。奶牛在-20℃時的采食量比15 ℃左右時高約35%，當環(huán)境溫度超過25 ℃時，每升高1 ℃，奶牛干物質(zhì)采食量下降6%左右，奶牛在40℃時的采食量比在20 ℃時的采食量下降60%左右。另外，采食量也是影響甲烷排放的關(guān)鍵因素[10]。湖南地區(qū)冬春兩季的溫度變化明顯[11]，這可能影響奶牛采食量和胃腸道甲烷排放。因此，本試驗研究冬季和春季奶牛胃腸道甲烷排放的狀況，以揭示奶牛胃腸道甲烷排放的季節(jié)變化規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

試驗地點位于湖南望城白箬鋪奶牛飼養(yǎng)牧場。試驗分為冬季（2013年12月～2014年1月）和春季（2014年2月～2014年3月）兩個試驗期，每個試驗期選取相同的中國荷斯坦奶牛28 頭，其中犢牛4 頭、青年牛12 頭和泌乳牛12 頭。試驗期的喂料時間為上午5:30，下午16:00，自由飲水，精飼料飼喂量為體重的1%，粗飼料自由采食，每天記錄采食量。泌乳牛的擠奶時間為上午6:00 和下午17:00，機械擠奶，記錄試驗期的日產(chǎn)奶量，自由飲水。

1.2 試驗日糧

試驗日糧的粗料為稻草，犢牛、青年牛和泌乳牛的精飼料分別為普瑞納小牛精料補充料1216、干乳期精料補充料1512 和普瑞納奶牛精料補充料1812。四分法采集飼料樣品用于實驗室分析粗蛋白（CP）、飼料總能（GE）、酸性洗滌纖維（ADF）以及中性洗滌纖維（NDF）等[12]（詳見表1）。

表1 飼料營養(yǎng)成分

1.3 奶牛胃腸道甲烷測定方法

奶牛呼吸代謝室大小為12 m3，氣體流速約為190 m3/h。參考Storm 等[13]呼吸代謝室法測定奶牛胃腸道甲烷排放的方法，將試驗牛和飼料放入呼吸代謝室，進行連續(xù)48 h 密閉采樣。采集氣體樣本時使用50 m L注射器，每隔15 m in 在氣體收集盒中吸取30 m L 氣體注入10 m L 真空瓶中保存，48 h 內(nèi)在氣相色譜（安捷倫7 890 A）測定樣本氣體中甲烷濃度，根據(jù)甲烷濃度氣體流速計算胃腸道甲烷排放量(g/d)，計算公式參考Storm 等[13]。奶牛胃腸甲烷能（MJ/d）和甲烷量（g/d）分別由標準狀態(tài)下的甲烷燃燒值39.76 kJ/L 和密度0.717 g/L 換算，甲烷能和甲烷量之間用甲烷能量含量（55.65 g/d）換算。甲烷排放因子計算公式如下：

式中EF 表示甲烷排放因子[甲烷單位：kg/（頭·年）]，GEI 表示總能量攝取[甲烷單位：MJ/（頭·日）]，Ym 表示甲烷轉(zhuǎn)化因子，飼料中總能轉(zhuǎn)化為甲烷的百分比。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法

試驗數(shù)據(jù)用Excel 初步記錄并做簡單處理，然后采用SPSS 12.0 軟件對數(shù)據(jù)利用一般線性模型（GLM）程序進行方差（ANOVA）分析。P<0.05 時，差異顯著。

2 結(jié)果與分析

從表2 可知，犢牛在冬季和春季的平均代謝體重分別為30.0 kg 和34.1 kg，差異不顯著；干物質(zhì)采食量分別為2.55 kg/d 和2.48 kg/d，差異不顯著。其他指標項如酸性洗滌纖維攝入量、中性洗滌纖維攝入量、粗蛋白攝入量、總能量攝取量、胃腸道甲烷排放量、甲烷排放因子和甲烷轉(zhuǎn)化因子在冬春兩季之間的差異也不顯著。這可能是因犢牛在冬春兩季的干物質(zhì)采食量變化不大而形成的結(jié)果。

表2 冬季和春季犢牛體重、采食和胃腸道甲烷排放量

從表3 可知，青年牛在冬季和春季的平均代謝體重分別為60.2 kg 和64.2 kg，差異不顯著；干物質(zhì)采食量分別為6.08 kg/d 和4.39 kg/d，差異顯著（P<0.05)；酸性洗滌纖維攝入量分別為1.71 kg/d 和0.83 kg/d，差異顯著 (P<0.05)；總能量攝取量分別為141 g/d 和123MJ/d，差異顯著(P<0.05) ；甲烷排放因子分別為6.10[kg /(頭·年)]和7.81[kg /(頭·年)]，差異顯著(P<0.05)；甲烷轉(zhuǎn)化因子分別為4.32%和6.24%，差異顯著（P<0.05）；中性洗滌纖維攝入量、粗蛋白攝入量和胃腸道甲烷排放量，差異不顯著。在反芻動物的日糧中，干物質(zhì)主要由粗纖維和粗蛋白組成。其中，粗纖維的主要參考指標是中性洗滌纖維（中性洗滌纖維包含纖維素、木質(zhì)素、不溶性灰分和半纖維素；酸性洗滌纖維包括纖維素、木質(zhì)素和不溶灰分；在組成上中性洗滌纖維可粗略認為包含酸性洗滌纖維；二者在測定方法上有所不同，故同列于表中）。所有采食量指標中，中性洗滌纖維攝入量和粗蛋白差異均不顯著，而干物質(zhì)采食量差異顯著，故干物質(zhì)采食量是引起酸性洗滌纖維攝入量變化的主要因素。青年牛采食的干物質(zhì)能量主要包括總能量攝取量與因甲烷排放損失的能量。在胃腸道甲烷排放量無差異的情況下，干物質(zhì)采食量與總能量攝取量差異顯著。這說明干物質(zhì)采食量是引起總能量攝取量變化的主要因素。另外，采食量是影響甲烷排放量變化的主要因素[16-18]，甲烷排放因子與甲烷轉(zhuǎn)化因子是甲烷排放量的主要參數(shù)。在干物質(zhì)采食量差異顯著的情況下，甲烷排放因子與甲烷轉(zhuǎn)化因子差異顯著而甲烷排放量差異不顯著。這說明干物質(zhì)采食量是引起甲烷排放因子與甲烷轉(zhuǎn)化因子變化的主要因素。綜上所述可知：干物質(zhì)采食量是引起酸性洗滌纖維攝入量、總能量攝取量、甲烷排放因子和甲烷轉(zhuǎn)化因子變化的主要因素。

表3 冬季和春季青年牛體重、采食和胃腸道甲烷排放量

從表4 可知，泌乳牛在冬季和春季的平均代謝體重分別為103 kg 和104 kg，差異不顯著；產(chǎn)奶量分別為15.8 kg/d 和12.2 kg/d，差異不顯著。干物質(zhì)采食量、酸性洗滌纖維攝入量、中性洗滌纖維攝入量、粗蛋白攝入量和總能量攝取量，差異不顯著。胃腸道甲烷排放量分別為249 g/d 和363 g/d，差異顯著 (P<0.05)。甲烷排放因子分別為13.9 kg/（頭·年）和20.2 kg/（頭·年），差異顯著(P< 0.05)，甲烷轉(zhuǎn)化因子分別為4.26%和5.74%，差異顯著（P<0.05)。采食量是影響甲烷排放量的主要因素。產(chǎn)奶牛在冬春兩季所有采食量指標、能量攝入量、產(chǎn)奶量差異不顯著，而甲烷排放量差異顯著且春季高于冬季，這說明產(chǎn)奶牛春季攝入飼料轉(zhuǎn)化成甲烷的甲烷轉(zhuǎn)化因子顯著高于冬季；另外，甲烷排放因子與甲烷轉(zhuǎn)化因子成正相關(guān)關(guān)系，故春季的甲烷排放因子將顯著高于冬季，這些推斷結(jié)果與本試驗的試驗數(shù)據(jù)結(jié)果一致。

表4 冬季和春季泌乳牛體重、產(chǎn)奶量、采食和胃腸道甲烷排放量

從圖1 和2 可以看出，隨干物質(zhì)采食量的增加，胃腸道甲烷排放量隨著增加。將冬春兩季奶牛干物質(zhì)采食量和胃腸道甲烷排放量建立回歸方程，冬季奶牛干物質(zhì)采食量與其胃腸道甲烷排放量存在如下回歸關(guān)系：Y=17.04 X+11.11（R2=0.902，P<0.000 1，n=28）。春季奶牛干物質(zhì)采食量與胃腸道甲烷排放量存在如下回歸關(guān)系：Y=22.36 X+30.76（R2=0.892，P<0.000 1，n=28）。上述結(jié)果表明，干物質(zhì)采食量是影響甲烷排放量的主要因素，這也驗證了前人的研究結(jié)果——采食量是影響甲烷排放量的主要因素。

相同日糧模式下，處于不同季節(jié)的奶牛，其在不同溫度條件下能量消耗和營養(yǎng)需要不同，導(dǎo)致干物質(zhì)采食量亦會有所不同。黃峰等[19]在不同季節(jié)對（環(huán)境溫度）奶牛干物質(zhì)采食量變化的研究中發(fā)現(xiàn)，春季（25.6 ℃）奶牛的干物質(zhì)采食量最大,冬季（18.0 ℃）次之。陳喜斌等[20]報道生長期薩能山羊5 ℃的干物質(zhì)采食量低于18 ℃。許貴善等[21]發(fā)現(xiàn)青海綿羊在夏季、秋季和冬春季干物質(zhì)采食量存在極顯著差異（P<0.01），其中夏季干物質(zhì)采食量最高，而冬春季干物質(zhì)采食量最低。本試驗中，青年牛冬季干物質(zhì)采食量顯著高于春季，而犢牛和泌乳奶牛兩季節(jié)干物質(zhì)采食量差異不顯著。湖南望城白箬鋪奶牛飼養(yǎng)牧場平均氣溫冬季為5.8 ℃，春季為18.0 ℃，相比犢牛和泌乳奶牛，季節(jié)溫度對湖南地區(qū)青年牛干物質(zhì)采食量影響更大。另外，丁耿芝等[22]報道，不同季節(jié)反芻動物接受日照時間的長短也會影響采食量，日照時間越長，食欲越強，干物質(zhì)采食量越高。

圖1 冬季奶牛攝入量和胃腸道甲烷排放量的回歸關(guān)系

圖2 春季奶牛攝入量和胃腸道甲烷排放量的回歸關(guān)系

采食量是影響甲烷排放的最主要因素之一。趙一廣[23]對肉用綿羊甲烷排放的研究發(fā)現(xiàn)，肉用綿羊的甲烷排放量與日糧干物質(zhì)采食量之間存在顯著線性正相關(guān)關(guān)系（P<0.01）。Yan 等[24]通過測定299 頭泌乳期和16 頭干奶期荷斯坦奶牛甲烷排放的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，甲烷排放量與干物質(zhì)采食量有明顯的正相關(guān)性（R2=0.75）。這些結(jié)果說明，家畜胃腸道甲烷排放量隨著采食量的增加而增加。在本試驗中，青年牛冬季干物質(zhì)采食量顯著高于春季，犢牛和泌乳奶牛冬季和春季的干物質(zhì)采食量差異不明顯。可以預(yù)測，青年牛冬季奶牛胃腸道甲烷排放高于春季，而犢牛與泌乳奶牛兩季節(jié)奶牛胃腸道甲烷排放無顯著差異。但本研究結(jié)果與預(yù)測不一致，三個生長期奶牛春季甲烷排放一致高于冬季。這說明，本試驗中的季節(jié)因素并不是主要通過影響奶牛干物質(zhì)采食量進而影響奶牛胃腸道甲烷排放，奶牛胃腸道甲烷排放還受甲烷轉(zhuǎn)化因子的影響，三個生長期奶牛春季的甲烷轉(zhuǎn)化因子高于冬季。

春季奶牛胃腸道甲烷轉(zhuǎn)化因子高于冬季可能是由于冬春兩季的溫度差異影響奶牛消化方式和瘤胃發(fā)酵類型進而影響能量轉(zhuǎn)化效率所致。王麗鳳[25]報道，低溫可提高日糧在反芻動物瘤胃的流通速率，而使其甲烷產(chǎn)量降低。游玉波[26]報道，高溫與低溫相比，瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸的總濃度顯著下降，乙酸比例增加，丙酸和丁酸比例減小。孫斌[27]等報道，在不同季節(jié)，奶牛夏季胃腸道甲烷排放量最多，冬季排放量最少，且隨著環(huán)境溫度的降低，瘤胃發(fā)酵更趨于丙酸發(fā)酵，甲烷產(chǎn)量下降。

奶牛采食量和胃腸道甲烷排放量的回歸關(guān)系圖中的斜率為單位采食量的胃腸道甲烷排放。冬季和春季干物質(zhì)采食量的胃腸道甲烷排放分別為17.04 g/kg（0.95 MJ/kg）和22.46 g/kg（1.25 M J/kg）。該結(jié)果同樣說明，奶牛春季胃腸道甲烷排放的轉(zhuǎn)化效率高于冬季。M ills 等[14]在奶牛甲烷排放估算模型中的干物質(zhì)采食量的胃腸道甲烷排放為0.92 MJ/kg，明顯低于本試驗結(jié)果。M ills 的模型是基于11個試驗、43 頭泌乳奶牛數(shù)據(jù)庫建立的，其平均粗飼料比例（54%）明顯高于本試驗，可能是由于本試驗牛場飼養(yǎng)水平偏低，尤其粗飼料稻草的質(zhì)量過低、適口性較差，導(dǎo)致粗飼料采食量偏低，而高比例精飼料會在瘤胃中快速發(fā)酵，導(dǎo)致較高的單位干物質(zhì)采食量的甲烷排放量增大。

3 結(jié)論與討論

（1）冬春兩季顯著影響奶牛胃腸道甲烷排放，這可能是因冬春兩季的溫度和光照時間等因素引起。相比冬季，春季奶牛甲烷轉(zhuǎn)化因子較高，導(dǎo)致其胃腸道甲烷排放顯著提高。

（2）春季甲烷轉(zhuǎn)化因子顯著高于冬季，這可能是因季節(jié)影響奶牛對日糧的消化利用和瘤胃發(fā)酵方式和日糧能量利用效率。

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