秦佳晨，王新莊

（1.洛陽市高新區(qū)畜牧防疫檢疫中心，河南 洛陽　471000；2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院）

規(guī)?；膛鲎訉m內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定、藥物敏感性試驗及其致病性分析

秦佳晨1，王新莊2

（1.洛陽市高新區(qū)畜牧防疫檢疫中心，河南 洛陽471000；2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院）

通過調(diào)查平頂山市某規(guī)?；膛瞿膛Ｗ訉m內(nèi)膜炎的病原菌及其耐藥性，為下一步建立子宮內(nèi)膜炎病例模型和研究奶牛子宮內(nèi)膜炎的病因及發(fā)病機理提供基礎(chǔ)。該試驗采用細菌分離培養(yǎng)和微生物鑒定系統(tǒng)對所采集的樣品進行細菌分離培養(yǎng)、純化、鑒定；同時采用微量稀釋法測定所分離細菌的藥物敏感性，最后通過昆明小鼠腹腔接種進行致病性試驗。結(jié)果表明：從29份樣品中共分離到18種細菌，它們均對阿莫西林、氨芐西林存在較高的耐藥性，對環(huán)丙沙星、恩諾沙星、氟苯尼考均表現(xiàn)敏感，而對其他藥物的敏感性各種細菌間存在較大差異性；通過致病性試驗可知所分離的18種細菌中致病性最強的分別是大腸埃希菌、腦膜膿毒性金黃桿菌、停乳鏈球菌、蘇云金芽孢桿菌、產(chǎn)吲哚金黃桿菌，且它們均分離于產(chǎn)后兩月后患病牛的樣品中。

奶牛；子宮內(nèi)膜炎；病原菌；藥敏試驗；致病性試驗

子宮內(nèi)膜炎是引起奶牛產(chǎn)后不孕癥的主要因素，該病主要是因分娩時或產(chǎn)后子宮內(nèi)病原微生物的感染而引起。據(jù)統(tǒng)計由子宮內(nèi)膜炎引起的不孕癥占疾病性不孕的60%～70%［1］。在國外有資料表明，奶牛子宮內(nèi)膜炎的發(fā)病率在30%～40%左右。國內(nèi)報道，我國奶牛子宮內(nèi)膜炎的發(fā)病率約為20%～50%左右。母牛發(fā)生子宮內(nèi)膜炎后可使產(chǎn)犢間期延長、產(chǎn)奶量下降、死淘率增加、治療費用增加及治療期間奶源的廢棄。有研究表明，引起奶牛子宮內(nèi)膜炎的病因與病原微生物的感染、飼養(yǎng)管理水平、內(nèi)分泌紊亂及繼發(fā)性疾病等因素有關(guān)，但以病原微生物的感染為主。然而子宮內(nèi)膜炎患病牛在不同的地區(qū)不同的牛場從子宮內(nèi)容物中所分離的病原菌種類及各種細菌所占的比例均不相同。當(dāng)下在獸醫(yī)臨床上對于奶牛子宮內(nèi)膜炎的預(yù)防和治療普遍采用的是抗菌藥物，使得細菌的耐藥性日益突出。該試驗對平頂山市某奶牛場子宮內(nèi)膜炎患病牛子宮內(nèi)容物中的細菌進行分離鑒定、藥物敏感性試驗和昆明小鼠的致病性試驗，結(jié)果表明樣品中分離到的大腸埃希菌、腦膜膿毒性金黃桿菌、停乳鏈球菌、蘇云金芽孢桿菌、產(chǎn)吲哚金黃桿菌具有較強的致病性。以上5種致病性較強的細菌均存在于產(chǎn)后兩月齡以后的奶牛子宮樣品中，它們的持續(xù)存在可能是導(dǎo)致子宮內(nèi)膜炎難以治愈及子宮難以復(fù)舊的根本原因。該試驗著重對樣品中的細菌進行分離、鑒定，通過藥敏試驗分析細菌的耐藥性，通過致病性試驗獲得5種致病性較強的細菌，這些將對研究該規(guī)模場子宮內(nèi)膜炎的發(fā)病原因及致病機理提供基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品

在平頂山市某奶牛場確診為臨床型子宮內(nèi)膜炎的29頭患病牛采集子宮內(nèi)容物（樣品號標記為N1～N29）。子宮內(nèi)膜炎病牛的診斷主要是在臨床調(diào)查的基礎(chǔ)上，通過臨床癥狀及B型超聲診斷相結(jié)合的方法進行確診。

1.1.2藥品、試劑、儀器

阿莫西林對照品（規(guī)格100 mg，含量86%，批號K0221001），克拉維酸鉀（50 mg，130535-200301），氨芐西林（200 mg，85.8%，K0210906），替米考星對照品（200 mg，91.0%，K0310711），鹽酸環(huán)丙沙星（100 mg，100.0%，H0100803），恩諾沙星（100 mg，99.8%，H008094），頭孢噻呋（200 mg，87.5%，K0330406），頭孢氨芐（200 mg，94.2%，30408-200209），慶大霉素（200 mg，每毫克相當(dāng)于612慶大霉素單位，K0070806），安普霉素（200 mg，每毫克相當(dāng)于560安普霉素單位，K0230811），鹽酸四環(huán)素（200 mg，97.5%，130488-200403），多西環(huán)素（200 mg，86.0%，0485-9901），氯霉素（200 mg，99.5%，K0350706），氟苯尼考（100 mg，含量99.3%，K0301004），粘菌素（200 mg，每毫克相當(dāng)于粘菌素22156單位，K0270905），林可霉素（100mg，84.9%，K0101003），泰樂菌素（200 mg，每毫克相當(dāng)于泰樂菌素1026單位，K0160911），青霉素（100 mg，92.2%，K0251006），鏈霉素（300 mg，每毫克相當(dāng)于712單位，K0051201），鹽酸土霉素（200 mg，每毫克相當(dāng)于938土霉素單位，K0030712），磺胺氯吡嗪鈉（200 mg，H0281009），鹽酸金霉素（200 mg，94.5%，K0020710），紅霉素（200 mg，每毫克相當(dāng)于883紅霉素單位，K0120906），頭孢他啶（100 mg，84.2%，130484-200502），以上藥品均購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。肉湯A培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、雙抗巧克力瓊脂培養(yǎng)基、改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基、厭氧菌瓊脂、血液瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基等，購自青島淵博生物技術(shù)有限公司。SENSITITRE革蘭氏陽性鑒定板GPID（批號B9263P），SENSITITRE革蘭氏陰性鑒定板GNID（批號B0413）。全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（型號SENSITITRE ARIS 2X），生物顯微鏡（日本NIKON，型號ECLIPSE55I），電子分析天平（梅特勒-托利多儀器，型號XP205），隔水式培養(yǎng)箱（上海精宏實驗設(shè)備有限公司，型號GNP-9160），MILLI-Q純水儀（MILLIPORE公司），比濁儀，超凈工作臺（蘇凈安泰）等。

1.2方法

1.2.1奶牛子宮內(nèi)膜炎患

病牛子宮內(nèi)容物的采集

采用直腸把握子宮法人

工授精術(shù)式通過輸精管采集

子宮內(nèi)容物。由操作者通過直腸握住子宮角，將輸精管從陰門插入到子宮體、子宮角，再讓助手在輸精管端連接50 ml注射器抽取子宮內(nèi)容物。如不易抽出可先注入20～30 ml滅菌生理鹽水，由操作者按摩子宮壁使生理鹽水與子宮內(nèi)容物充分接觸后再抽取內(nèi)容物，并盡快將內(nèi)容物放入滅菌過的EP管用封口膜封口。

1.2.2子宮內(nèi)容物中細菌的分離培養(yǎng)、純化及鑒定

將新鮮的子宮內(nèi)容物接種到肉湯A培養(yǎng)基，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中增菌18～24 h后，分別在血液瓊脂平板、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基、厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基中劃板培養(yǎng)。其中血液瓊脂平板放入37℃恒溫培養(yǎng)箱；馬鈴薯葡萄糖瓊脂和改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基放入25～30℃培養(yǎng)箱；厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基采用焦性沒食子酸法［7］放入燭缸內(nèi)培養(yǎng)。通過菌落形態(tài)特征及革蘭氏染色特性將各平板上生長的不同菌落挑出接種于肉湯A培養(yǎng)基，培養(yǎng)18～24 h后再劃板培養(yǎng)，接連幾次并結(jié)合顯微鏡觀察即可將所分離到的菌株純化。將純化好的細菌挑取單個菌落于5 ml去離子水中，并用先德比濁儀進行比濁使其達到0.5麥氏單位，按照鑒定系統(tǒng)的加樣步驟及使用程序進行。

1.2.3藥物敏感性試驗

藥物敏感性試驗采用微量肉湯稀釋法，向96孔V型板每板的第1列8個孔自上而下依次在96孔塑料微孔板上加入各種藥物15 μl，吸取32 μl已比濁好達到0.5麥氏單位的菌液于平皿中加入MH肉湯按1∶1000稀釋，用微量移液器將每板的第1列加入135 μl稀釋的菌液，以后各列加入75 μl菌液，第1列各孔混合均勻后吸出75 μl加入第2列各孔中，同法依次兩倍稀釋至第11列各孔，棄去75 μ l，每板的最后一列做空白對照。置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h，讀取結(jié)果，以無細菌生長孔內(nèi)所含抗菌藥物的最低濃度為最低抑菌濃度（MIC）。每株細菌至少做兩個以上重復(fù)試驗（平行試驗），取其平均值。每株細菌用3塊板，共用24種藥物。

1.2.4致病性試驗

將38只5周齡健康昆明小鼠，采用全價飼料飼喂使其體質(zhì)量達到25 g以上并注意觀察各自的健康狀況。將從奶牛子宮內(nèi)膜炎患病牛子宮內(nèi)容物中所分離出的18種細菌的新鮮培養(yǎng)物通過小鼠腹腔攻毒進行致病性試驗。

2　結(jié)果

2.1樣品的采集結(jié)果

該次試驗共采集不同年齡、胎次及產(chǎn)后不同時間段的子宮內(nèi)膜炎患病牛子宮內(nèi)容樣品29份，具體的樣品采集時間及編號結(jié)果見表1。

表1　母牛產(chǎn)后樣品的采集時間

2.2樣品中細菌的分離、培養(yǎng)結(jié)果（見表2和表3）

在29份樣品中，N13、N15、N20、N21 4份樣品未分離到細菌，其他樣品均分離到了細菌。從表2中可以看出樣品中有1種細菌存在的有13份樣品，占44.8%；樣品中有2種細菌存在的有3份樣品，占10.4%；樣品中有3種細菌存在的有5份樣品，占3.4%。在產(chǎn)后30 d內(nèi)的11份樣品中，N15、N20、N21號牛樣未分離到細菌，N2、N3、N16號牛樣均分離到了1種細菌，N14號牛樣分離到了3種細菌，N1、N4、N9號牛樣均分離到4種細菌，N11號牛樣分離到了6種細菌；在產(chǎn)后31～60 d內(nèi)的9份樣品中，N13號牛樣未分離到細菌，N8、N17、N22號牛樣均分離到了1種細菌，N5、N6、N27號牛樣均分離到了2種細菌，N10、N18號牛樣均分離到了3種細菌；在產(chǎn)后61～90 d的4份樣品中，N7、N19、N25號牛樣均分離到了1種細菌，N12號牛樣分離到了3種細菌；在產(chǎn)后91 d以上的5份樣品中，N23、N24、N26、N28號牛樣均分離到了1種細菌，N29號牛樣分離到了3種細菌。從采牛樣的胎次及分娩時是否發(fā)生了難產(chǎn)而經(jīng)過人工助產(chǎn)來看：采自初產(chǎn)牛的10份樣品中，除了N28號樣牛，其余9份牛樣均在分娩時發(fā)生了難產(chǎn)而人工助產(chǎn)過，因此說難產(chǎn)的發(fā)生與牛子宮內(nèi)膜炎的發(fā)病率有一定相關(guān)關(guān)系。初產(chǎn)牛的10份樣品中，N15、N20號牛樣未分離到細菌，N3、N16、N19、N28號牛樣均分離到了1種細菌，N10、N12號牛樣均分離到了3種細菌，N1號牛樣分離到了4種細菌，N11號牛樣分離到了6種細菌；從采自2胎牛的17份樣品來看，N13、N21號牛樣未分離到細菌，N7、N8、N22～N26號牛樣均分離到了1種細菌，N5、N6、N27號牛樣均分離到了2種細菌，N14、N18、N29號牛樣均分離到了3種細菌，N9號牛樣分離到了4種細菌；從采自3胎牛的2份樣品來看，N2號牛樣分離到了1種細菌，N4號牛樣分離到了4種細菌。

表2　每份樣品中分離到的細菌數(shù)

表3　采樣牛的胎次及分娩時是否實施助產(chǎn)

2.3細菌的染色結(jié)果（見表4）

表4　分離到的細菌革蘭氏染色特性

從表4中可以看出，該次試驗共分離出18種（52株）細菌，其中革蘭氏陰性菌有28株，占53.8%；革蘭氏陽性菌有24株，占46.2%。從細菌的形態(tài)上分類，球菌有8株，占15.4%；球桿菌有2株，占3.8%；桿菌有42株，占80.8%。說明該奶牛子宮內(nèi)膜炎患病牛的子宮內(nèi)容物中病原菌以革蘭氏陰性菌為主，而在細菌形態(tài)上以桿菌為主。

2.4細菌的鑒定結(jié)果

該試驗共對29頭子宮內(nèi)膜炎患病奶牛子宮內(nèi)容物進行分離、純化、鑒定，共鑒定出細菌18種。其中有12份樣品中有蠟樣芽孢桿菌存在，占樣品數(shù)的71.4%；有6份樣品中存在奧斯陸莫拉菌，占樣品數(shù)的24%；有5份樣品中存在大腸埃希菌，占樣品數(shù)的20%；有4份樣品中存在鏈球菌，占樣品數(shù)的16%；蘇云金芽孢桿菌、淺黃金色單胞菌、耶爾森菌屬、產(chǎn)吲哚金黃桿菌、產(chǎn)堿假單胞菌各有3份樣品中存在，占樣品數(shù)的12%；玫瑰色庫克菌與成團泛菌各有2份樣品中存在，占樣品數(shù)的8%；屎腸球菌、表皮葡萄球菌、棒狀桿菌屬、痢疾志賀菌、食酸代爾夫特菌、腦膜炎膿毒性金黃桿菌各有1份樣品中存在，占樣品數(shù)的4%。由此可見，平頂山地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎患病牛子宮內(nèi)容物中病原菌以蠟樣芽孢桿菌、奧斯陸莫拉菌、大腸埃希菌、鏈球菌為主，其次是蘇云金芽孢桿菌、淺黃金色單胞菌、耶爾森菌屬、產(chǎn)吲哚金黃桿菌、產(chǎn)堿假單胞菌，最后是玫瑰色庫菌、成團桿菌、屎腸球菌、表皮葡萄球菌、棒狀桿菌屬、痢疾志賀菌、食酸代爾夫特菌、腦膜膿毒性金黃桿菌。

2.5樣品中所分離細菌的體外藥物敏感性試驗結(jié)果

對樣品中所分離的18種細菌在不同類藥物中選用2～3種藥物（共選取24種藥物）進行藥敏試驗。每種細菌對24種藥物的藥敏試驗結(jié)果均在2～3次平行試驗的基礎(chǔ)上取平均數(shù)所得。從試驗結(jié)果可以看出：所分離的18種細菌對阿莫西林、氨芐西林均存在較高的耐藥性［除食酸代爾夫特菌（對氨芐西林的MIC值為64 μg.ml-1）外的所有細菌對阿莫西林和氨芐西林的MIC值均為128 μg.ml-1或以上］，但當(dāng)阿莫西林、氨芐西林與克拉維酸合用時多數(shù)細菌又較為敏感。而大腸埃希菌、表皮葡萄球菌、玫瑰色庫克菌、棒狀桿菌屬對阿莫西林、氨芐西林與克拉維酸合用仍表現(xiàn)為耐藥，但MIC值均有所降低。蠟樣芽孢桿菌對慶大霉素、安普霉素、粘菌素、鏈霉素表現(xiàn)為耐藥，而對其他藥物較為敏感。奧斯陸莫拉菌對粘菌素、紅霉素、林可霉素表現(xiàn)為耐藥，對青霉素表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。蘇云金芽孢桿菌對安普霉素、粘菌素、鏈霉素、林可霉素均耐藥，對頭孢噻呋和慶大霉素表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。耶爾森菌屬對青霉素表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。乳房鏈球菌對慶大霉素、安普霉素及鏈霉素耐藥，對土霉素表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。大腸埃希菌對林可霉素耐藥，對頭孢氨芐表現(xiàn)為中介，而對其他藥物均敏感。表皮葡萄球菌對四球素、替米考星、金霉素、紅霉素、林可霉素均耐藥，而對其他藥物較為敏感。淺黃金色單胞菌對頭孢他啶耐藥，對青霉素表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。產(chǎn)堿假單胞菌對粘菌素、林可霉素、頭孢他啶均耐藥，而對其他藥物較為敏感。玫瑰色庫克菌對慶大霉素、安普霉素、粘菌素、鏈霉素均耐藥，對青霉素表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。屎腸球菌對頭孢噻呋、安普霉素、粘菌素、鏈霉素、頭孢他啶均耐藥，而對其他藥物較為敏感。棒狀桿菌屬對四環(huán)素、多西環(huán)素、替米考星、土霉素、金霉素、紅霉素、林可霉素均耐藥，而對其他藥物較為敏感。成團泛菌對粘菌素、土霉素耐藥，而對其他藥物較為敏感。志賀氏菌屬對四環(huán)素、替米考星、青霉素、鏈霉素、土霉素、金霉素、紅霉素、林可霉素耐藥，對頭孢他啶表現(xiàn)為中介，而對其他藥物較為敏感。停乳鏈球菌對安普霉素、粘菌素、青霉素、土霉素、紅霉素、林可霉素耐藥，而對其他藥物較為敏感。

2.6致病性試驗結(jié)果

將38只健康成年昆明小鼠隨機分為19組并將小鼠編號，其中1～18組為各種細菌的攻毒組；19組為空白對照組（腹腔注射等量的生理鹽水）。將18種細菌的新鮮培養(yǎng)物通過腹腔注射0.5 ml/只（約1.05×109cfu/ml）進行攻毒。攻毒后注意觀察小鼠的精神、飲食及死亡情況，連續(xù)觀察72 h以上并記錄小鼠傷亡情況。對于死亡小鼠及時剖解，并取病變臟器回收所接種的細菌。結(jié)果表明：樣品中所分離的大腸埃希菌、腦膜膿毒性金黃桿菌、停乳鏈球菌、蘇云金芽孢桿菌、產(chǎn)吲哚金黃桿菌在腹腔攻毒后2 d內(nèi)均可使昆明小鼠致死，并可從剖檢后病變臟器中分離到攻毒時所接種的細菌。

3　分析與討論

對平頂山市某奶牛場確診為臨床型子宮內(nèi)膜炎的29頭患病牛子宮內(nèi)容物進行了分離培養(yǎng)、鑒定，共分離出18種細菌。由此可見，產(chǎn)后子宮內(nèi)的細菌種類較多。從產(chǎn)后患病牛樣品的采集時間及每份樣品中分離到的細菌數(shù)可以看出，該場子宮內(nèi)膜炎患病牛的子宮內(nèi)容物中病原菌以單一細菌存在為主。這與趙紅瓊［3］、楊克禮［4］、陳現(xiàn)偉［5］等報道的奶牛子宮內(nèi)膜炎的感染以單一菌株感染為主相一致。

分離到的病原菌有蠟樣芽孢桿菌、奧斯陸莫拉菌、大腸埃希菌、鏈球菌、蘇云金芽孢桿菌等18種，這與淮安地區(qū)［6］、金華地區(qū)［7］報道的奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌類似。但各種病原菌在樣品中存在的比例不完全相同。從所分離細菌的革蘭氏染色情況來看，該場奶牛子宮內(nèi)膜炎的病原菌以革蘭氏陰性菌為主（占53.8%）［8-9］。這與陳現(xiàn)偉［5］、趙紅瓊［3］、許微微［10］等人報道的在奶牛子宮內(nèi)膜炎致病菌中陽性菌檢出率很高及王國卿、田文儒［11］等人報道的產(chǎn)后正常奶牛子宮內(nèi)細菌的變化規(guī)律中陽性菌檢出率較高不一致，這可能是菌群的地域性差異。

從藥敏試驗結(jié)果可以看出，所分離的18種細菌對阿莫西林、氨芐西林均存在較高的耐藥性。但當(dāng)阿莫西林、氨芐西林與克拉維酸合用時所有細菌的MIC值均有所下降，可以推測所分離的這些細菌可能已經(jīng)能夠產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。從所分離的18種細菌的藥敏試驗結(jié)果可以看出，18種細菌對環(huán)丙沙星、恩諾沙星、氟苯尼考均表現(xiàn)為敏感，因此在臨床治療上推薦使用氟喹諾酮類、氯霉素類藥物及兩者與β-內(nèi)酰胺酶抑制劑合用可能效果較為理想。但在臨床用藥時應(yīng)使用足夠的劑量和適當(dāng)?shù)寞煶?，并注意定期輪換。

從致病性試驗結(jié)果可以看出，在樣品中所分離到的18種細菌中致病性最強的是大腸埃希菌、腦膜膿毒性金黃桿菌、停乳鏈球菌、蘇云金芽孢桿菌、產(chǎn)吲哚金黃桿菌。這些致病性較強的細菌并非在每份樣品中都存在，特別是N15、N20、N21號牛樣品中未分離到細菌仍患有子宮內(nèi)膜炎。以上5種致病性較強的細菌均是從產(chǎn)后兩月后的子宮內(nèi)膜炎患病牛的樣品中分離到的，這些致病性細菌的存在可能是導(dǎo)致子宮仍沒有復(fù)原的主要原因。引起子宮內(nèi)膜炎的病因是復(fù)雜的，通常是由多種復(fù)雜的因素相互作用的結(jié)果，而細菌是多種復(fù)雜因素中的主要因素之一。

［1］黃啟庫，胡愛民.高滲鹽水配合洗泌泰栓治療慢性子宮內(nèi)膜炎［J］.中國奶牛，1992，（4）：34.

［2］崔保安.動物微生物學(xué)［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005：325-326.

［3］趙紅瓊，黃燕，陳杖榴，等.新疆地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及其對抗菌藥的敏感性試驗［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2005，（2）：16-19.

［4］楊克禮，潘玲，章孝榮.奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌分離試驗［J］.中國奶牛，2006，（8）：39-41.

［5］陳現(xiàn)偉.規(guī)?；瘓瞿膛Ｗ訉m內(nèi)膜炎病原菌的分離及鑒定［J］.AnimalHusbandry&Veteri nary Medicine，2008，40（2）：72-74.

［6］杜光波，徐莉，高夢寧.奶牛子宮內(nèi)膜炎主要病原菌的調(diào)查［J］.畜牧與獸醫(yī)，2007，39（4）：24-26.

［7］麻延峰，王宏艷，黃利權(quán)，等.金華地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及藥敏試驗［J］.中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2007，29（8）：641-644.

［8］孔祥峰，胡元亮，楊龍圣，等.奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及中藥的抑菌作用［J］.畜牧與獸醫(yī)，2005，37（9），15-18.

［9］吳明樓，劉士喜，蘇輝，等.奶牛子宮內(nèi)膜炎分泌物病原菌和病理學(xué)探討［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，31（1）：106-107.

［10］許微微，侯振中，王海峰.奶牛子宮內(nèi)膜炎厭氧菌的分離鑒定［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2006，（6）：73-74.

［11］王國卿，田文儒.產(chǎn)后健康奶牛和子宮內(nèi)膜炎患牛子宮內(nèi)細菌的研究［D］.哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文，2000：4-5.

S858.23

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1004-5090（2015）12-0003-04

2015-10-05）