楊李廠，丁　雋，周新初，任伯民，謝　東，楊偉敏

（1. 上海睿智化學(xué)研究有限公司，上海 201203；2. 上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院，上海 200240；3. 江蘇省吳江田宇生物科技有限公司，蘇州 215222）

兩個(gè)群體巴馬小型豬血液生理生化指標(biāo)比較

楊李廠1，丁雋1，周新初2，任伯民3，謝東1，楊偉敏1

（1. 上海睿智化學(xué)研究有限公司，上海 201203；2. 上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院，上海 200240；3. 江蘇省吳江田宇生物科技有限公司，蘇州 215222）

目的比較兩個(gè)群體巴馬小型豬血液生理和生化學(xué)指標(biāo)。方法分別選取兩個(gè)群體4～8月齡的巴馬小型豬40頭（雌雄各半），測(cè)定其血液生理生化指標(biāo)，并進(jìn)行比較。結(jié)果對(duì)兩個(gè)群體巴馬小型豬血常規(guī)指標(biāo)比較，有9項(xiàng)指標(biāo)［紅細(xì)胞比積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板數(shù)（PLT）、中性粒細(xì)胞數(shù)（NE）、淋巴細(xì)胞數(shù)（LY）、單核細(xì)胞數(shù)（MO）、嗜酸粒細(xì)胞數(shù)（EO）、嗜堿粒細(xì)胞數(shù)（BA）］差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩個(gè)群體巴馬小型豬血液生化指標(biāo)比較，有8項(xiàng)指標(biāo)［丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總蛋白（TP）、堿性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）］差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論不同群體巴馬小型豬的血液生理、生化指標(biāo)存在一定差異，在藥物代謝、藥效以及毒理實(shí)驗(yàn)等研究中應(yīng)引起重視。

小型豬；血液生理；血液生化

上海是較早建立實(shí)驗(yàn)用小型豬地方標(biāo)準(zhǔn)的地區(qū)之一，該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)用小型豬的遺傳分類方法，規(guī)范了環(huán)境與設(shè)施的技術(shù)要求，為生物醫(yī)藥研究，生物制品生產(chǎn)，以及人體器官移植等研究和應(yīng)用提供了較標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由于豬在解剖學(xué)、生理學(xué)、營(yíng)養(yǎng)代謝等方面與人類相似，已經(jīng)被高校、科研院所以及外資研發(fā)機(jī)構(gòu)廣泛使用。小型豬的血液生理和生化指標(biāo)等是病理、生理以及毒理學(xué)研究工作的重要基礎(chǔ)性指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)選擇兩個(gè)群體普通級(jí)巴馬小型豬，分別檢測(cè)分析個(gè)體間部分血液生理和生化指標(biāo)以及性別間差異。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

1.1.1動(dòng)物來源4～8月齡普通級(jí)巴馬小型豬各40頭，雌雄各半，分別由上海華新特種養(yǎng)殖場(chǎng)（A單位） ［SCXK （滬） 2007-0013］ 和江蘇省吳江田宇生物科技有限公司（B單位）［SCXK（蘇）2011-0001］ 提供，種源來自廣西原產(chǎn)地。

1.1.2動(dòng)物飼養(yǎng)條件兩個(gè)群體均為普通級(jí)環(huán)境，室溫20 ～ 25 ℃，相對(duì)濕度30% ～ 80%，飼養(yǎng)管理方法基本相同，每日定時(shí)、定量飼喂飼料，自由飲水。

1.2方法

1.2.1血樣采集所有動(dòng)物采血前過夜禁食 （12～15 h），在清醒狀態(tài)下從前肢或是前腔靜脈取血，每只動(dòng)物采血量為4～5 mL，分別用于血液生理指標(biāo)和生化指標(biāo)的測(cè)定。

1.2.2血液生理指標(biāo)檢測(cè)取1 mL全血用EDTA抗凝，兩個(gè)群體分別以S y s me x X T-2 0 0 i v和HEMAVET950全自動(dòng)五分類動(dòng)物血液分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、白細(xì)胞數(shù)（W BC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞比積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞容積分布寬度（RDW）、血小板數(shù)（PLT）、中性粒細(xì)胞數(shù)（NE）、淋巴細(xì)胞數(shù)（LY）、單核細(xì)胞數(shù)（MO）、嗜酸粒細(xì)胞數(shù)（EO）、嗜堿粒細(xì)胞數(shù)（BA）等14項(xiàng)指標(biāo)。

1.2.3血液生化指標(biāo)的檢測(cè)取3 mL 非抗凝血離心分離血清，A單位小型豬采用Olympus AU400全自動(dòng)生化分析儀，B單位小型豬采用魅力2000全自動(dòng)生化分析儀，檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（CRE）、尿素氮（BUN）、總膽紅素（TBIL）、甘油三酯（TG）、葡萄糖（GLU）、總膽固醇（TC）等11項(xiàng)生化指標(biāo)。

1.2.4數(shù)據(jù)處理檢測(cè)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x- ± s）表示，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。兩樣本均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1血液生理指標(biāo)

表1結(jié)果表明，兩個(gè)群體巴馬小型豬的14項(xiàng)血液生理學(xué)指標(biāo)中，HCT、MCV、MCHC、PLT、NE、LY、MO、EO、BA存在顯著性差異（P＜0.05）。A單位巴馬小型豬的14項(xiàng)血液生理學(xué)指標(biāo)，雌雄間RBC、HGB、HCT、MCH、MCHC、RDW、 LY差異顯著（P＜0.05），B單位雌雄間HCT、MCV、PLT、LY差異顯著（P＜0.05）。

兩個(gè)群體雄性巴馬小型豬間比較，RBC、HCT、MCV、MCHC、PLT、RDW、NE、LY、MO、BA差異顯著（P＜0.05）；雌性小型豬間比較，RBC、HGB、MCV、MCHC、PLT、NE、LY、MO、EO差異顯著（P＜0.05）。

2.2血清生化指標(biāo)

兩個(gè)群體血清生化指標(biāo)中前者的A L T、AST、ALP、CRE和TC水平都低于后者，而TP、BUN、TG高于后者（P＜0.05）。A單位小型豬雌雄間ALB、ALP、TC有顯著性差異（P＜0.05），B單位雌雄間AST、ALT、ALB存在顯著差異（P＜0.05）。兩個(gè)群體雄性巴馬豬間比較，ALT、AST、ALP、TP、CRE、TG、TC差異顯著（P＜0.05），雌性間ALP、TP、ALB、TBIL、CRE差異顯著（P＜0.05）（表2）。

3　討論

巴馬小型豬產(chǎn)自廣西巴馬瑤族自治縣，是中國優(yōu)良的地方小型豬品種。上海市華新特種養(yǎng)殖場(chǎng)和江蘇省吳江田宇生物科技有限公司都是從廣西巴馬縣原種場(chǎng)引進(jìn)純種巴馬香豬，然后形成獨(dú)立的封閉群。

表 1　兩個(gè)群體普通級(jí)巴馬小型豬血液學(xué)指標(biāo)

表 2　普通級(jí)巴馬小型豬血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

3.1巴馬小型豬血液生理生化指標(biāo)

與馮媛媛等［1］檢測(cè)的中國實(shí)驗(yàn)用小型豬9項(xiàng)血液生理生化指標(biāo)相比，除B單位巴馬小型豬群體的MCHC均值較大，A、B兩個(gè)單位小型豬群體其余8項(xiàng)指標(biāo)均接近于中國實(shí)驗(yàn)用小型豬；在11項(xiàng)血清生化指標(biāo)中，兩個(gè)群體小型豬分別有6項(xiàng)和8項(xiàng)與之接近，其他指標(biāo)都較低。與陳克研等［2］報(bào)道的遼寧地區(qū)飼養(yǎng)的巴馬小型豬的血液生理生化對(duì)比，只有WBC數(shù)據(jù)差異大，其他數(shù)據(jù)都較接近；血清生化數(shù)據(jù)中ALT、TP、ALB、BUN較接近，其他參數(shù)值或高或低。胡延廷等［3］測(cè)定了在山東飼養(yǎng)的巴馬小型豬相應(yīng)的參數(shù)，血液生理指標(biāo)中RBC、HGB、HCT、PLT和MCHC與A、B兩個(gè)群體間的差異較大，其余數(shù)據(jù)相近；血清生化大多接近，但ALP、TP、TBIL、TG偏低。本文數(shù)據(jù)與連林生等［4］報(bào)道的版納小型豬各參數(shù)值差異大，但接近郭雄明等［5］研究的五指山小型豬的各指標(biāo)數(shù)值。綜上所述，不同地區(qū)飼養(yǎng)的巴馬小型豬血液學(xué)生理生化指標(biāo)都存在差異，總體數(shù)據(jù)偏差范圍不大；不同品種小型豬之間有些差異較大，有些數(shù)據(jù)接近。

影響血液生理生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的因素很多，除人為因素、試劑因素和儀器等，個(gè)體生理因素非常重要［6，7］。例如，老齡動(dòng)物和年輕動(dòng)物相比，腎功能衰退，肌酐清除率變低，雄性肌酐水平一般高于雌性；通常TC的水平也是雌性比雄性稍高。Kawaguchi等［8］研究結(jié)果顯示，雌性小型豬TC偏高，0月齡的小型豬的ALP、TBIL、TC、TG和GLU高于年齡較大的動(dòng)物，而ALT較低。本實(shí)驗(yàn)兩群體雌性小型豬TC 與其報(bào)告結(jié)果一致，也都是雌性水平比雄性水平稍高；兩群體血常規(guī)雌雄間差異指標(biāo)多；血清生化差異指標(biāo)相對(duì)較少，兩群體差異指標(biāo)比例都是3/11，與Kawaguchi［8］研究結(jié)果相同。

3.2飼養(yǎng)環(huán)境與飼料標(biāo)準(zhǔn)化對(duì)巴馬小型豬血液生理

生化指標(biāo)的影響

眾所周知，動(dòng)物繁育和實(shí)驗(yàn)的飼養(yǎng)環(huán)境、飲食對(duì)其血液生理、生化指標(biāo)有很大的影響，不同的飼養(yǎng)環(huán)境，特別是微生物學(xué)狀況的控制不盡相同，也可能是導(dǎo)致不同地區(qū)巴馬實(shí)驗(yàn)小型豬血液生理生化指標(biāo)的差異。陳克研等［2］從廣西巴馬瑤族自治縣引進(jìn)巴馬小型豬，然后在遼寧地區(qū)飼養(yǎng)并檢測(cè)其血液生理生化指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)與原產(chǎn)地提供的部分指標(biāo)存在顯著性差異，可能也是與生活環(huán)境和管理上的差異有關(guān)。本試驗(yàn)中兩個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)所采用的飼料都屬于加工飼料，主要營(yíng)養(yǎng)成份與比例相近（粗蛋白≥12%，粗脂肪≥2%，粗纖維≤8%），但在各自配方上存在差異，可能是造成有些指標(biāo)差異的因素之一。

3.3建立SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)小型豬的意義

隨著多地實(shí)驗(yàn)用小型豬地方標(biāo)準(zhǔn)的建立，為規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)合格實(shí)驗(yàn)小型豬提供了指導(dǎo)依據(jù)，在動(dòng)物種源、遺傳控制良好的前提下，本文作者認(rèn)為，繁育生產(chǎn)SPF級(jí)巴馬實(shí)驗(yàn)小型豬是減少群體差異的方法之一。目前，國際上常用的哥廷根小型豬為SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)用豬，已在世界發(fā)達(dá)地區(qū)被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和新藥研發(fā)領(lǐng)域，成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。由此可見，盡快培育SPF級(jí)巴馬實(shí)驗(yàn)小型豬，將是提升我國實(shí)驗(yàn)用豬標(biāo)準(zhǔn)化并使相應(yīng)的研究成果得到國際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的一個(gè)有效途徑。

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Q95-33

B

1674-5817（2015）03-0230-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.03.011

2014-10-25

上海市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物創(chuàng)新行動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目 （13140900200）

楊李廠（1981-），男，碩士在讀，研究方向: 動(dòng)物生理/生化。E-mail: lchyang@chempartner.cn

楊偉敏，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，研究方向: 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理。E-mail: wmyang1@chempartner.cn