郭曉宇，馮小明，牛廷獻(xiàn)，申　健，王行高

（蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院動物實驗科，蘭州 730050）

蕨麻小型豬的血液生理生化指標(biāo)初探

郭曉宇，馮小明，牛廷獻(xiàn)，申健，王行高

（蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院動物實驗科，蘭州 730050）

目的比較不同海拔地區(qū)飼養(yǎng)的蕨麻小型豬血液生理生化指標(biāo)差異，為蕨麻小型豬的實驗動物化提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。方法高原地區(qū)（甘南，3 200 m）蕨麻小型豬（1組）采集血樣后，將該群小型豬移至中度高原地區(qū)（蘭州，1 500 m）飼養(yǎng)，分別于飼養(yǎng)3個月（2組）和6個月（3組）時采集血樣，測定和比較10項血液生理指標(biāo)和32項血液生化指標(biāo)。結(jié)果2組性別間部分血液生理生化指標(biāo)存在差異（P＜0.05或P＜0.01），1組、3組性別間無差異。1組與2、3組比較，雌性血液生理指標(biāo)中紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）等8項有明顯變化（P＜0.05或P＜0.01），生化指標(biāo)乳酸脫氫酶（LDH）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）有差異（P＜0.05或P＜0.01）。雄性血液生理指標(biāo)白細(xì)胞計數(shù)（WBC）等7項有明顯變化（P＜0.05或P＜0.01），生化指標(biāo)較多有明顯變化（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論蕨麻小型豬由高原引至中度高原地區(qū)飼養(yǎng)，部分血液生理生化指標(biāo)受到生長環(huán)境、氣候條件、營養(yǎng)水平、養(yǎng)殖方式的影響，但大多仍然具有高原特性，適合作為高原病研究的實驗動物，在中度高原地區(qū)對蕨麻小型豬進(jìn)行實驗動物化培育具有可行性。

蕨麻小型豬；不同海拔；血液生理生化；高原特性

蕨麻豬又名合作豬，是高寒農(nóng)牧區(qū)通過放牧采食進(jìn)行飼養(yǎng)的原始地方小型豬種，主要分布在甘肅省甘南藏族自治州。甘南大部分地區(qū)海拔3 000 m以上，平均氣溫1.7℃，高原蕨麻小型豬已經(jīng)適應(yīng)這種海拔高氣候寒冷的自然條件，具有適應(yīng)高原環(huán)境的特點［1］，且遺傳背景清晰，長期以來自繁自養(yǎng)，沒有受到其周邊豬血緣的影響［2］，相對于其他品種豬在應(yīng)用于動物實驗方面有自身優(yōu)勢，尤其是在高原疾病模型的建立方面。對其進(jìn)行實驗動物化培育，使其符合實驗動物科學(xué)的要求，能夠為高原醫(yī)學(xué)研究提供獨特品系。本文探討蕨麻小型豬在不同海拔地區(qū)飼養(yǎng)一段時間后，血液生理生化指標(biāo)的差異，為蕨麻小型豬的實驗動物化研究與應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1　材料與方法

1.1動物

蕨麻小型豬來源于甘肅甘南藏族自治州合作市瑪曲縣的蕨麻小型豬群體，10月齡成年蕨麻小型豬29頭，體質(zhì)量15 kg，其中雌性17頭，雄性12頭。蕨麻小型豬采食蕨麻等牧草的根、莖、籽及農(nóng)作物的落葉，終年以放牧為主。

1.2實驗方法

對該批小型豬（海拔3 200 m，年平均氣溫1.7 ℃）采集血樣（1組，高原）后移置蘭州市（中度高原，海拔1 500 m，年平均氣溫10.3 ℃）飼養(yǎng)，自然溫度、濕度和光照，自由飲水，上下午各投料一次，飼喂玉米面、麥麩、草粉、豆餅及米糠的混合飼料，飼養(yǎng)3個月（2組）、6個月（3組）分別采集血樣。禁食不禁水12 h，在清醒狀態(tài)下采集前腔靜脈血，分別用EDTA-K2真空采血管和非抗凝真空采血管收集血樣，用于生理生化指標(biāo)檢測。

抗凝血輕輕混勻后，用Sysmex EX-2100全自動血液分析儀檢測血液生理指標(biāo): 白細(xì)胞計數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCMH）、血小板（PLT）、紅細(xì)胞分布列寬變異系數(shù)（RDW-CV）和細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW-SD）；非抗凝血1 500 r/min離心20 min分離血清，用日立7600全自動生化分析儀檢測血液生化指標(biāo)：乳酸脫氫酶（LDH）、乳酸脫氫酶同工酶-1（LDH-1）、α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、天門冬氨基酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、AST/ALT、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（G）、A/G、間接膽紅素（IBIL）、堿性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（GGT）、鈣（Ca）、磷（P）、鉀（K）、鈉（Na）、氯（Cl）、二氧化碳（CO2）、陰離子間隙（AG）、葡萄糖（Glu）、尿素（UREA）、肌酐（CRE）、尿素/肌酐（BUN/ CREA）、尿酸（UA）、滲透壓（OSM）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）。

1.3數(shù)據(jù)分析

2　結(jié)果

2.1血液生理指標(biāo)的比較

同組性別間比較: 1組蕨麻小型豬性別間各生理指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。中度高原飼養(yǎng)3個月（2組），雄性RBC和HCT極顯著高于雌性（P＜0.01），HGB顯著高于雌性（P＜0.05），其余指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。中度高原飼養(yǎng)6個月（3組），性別間差異并無統(tǒng)計學(xué)意義（表1）。

組間同性別比較：2組雌性RBC、HGB和RDW-SD顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；2組WBC和PLT與1組差異顯著（P＜0.05）；2組HCT與1組有極顯著差異（P＜0.01）；3組RDW-CV顯著下降（P＜0.01），其余詳見表1。

2.2血液生化指標(biāo)的比較

同組性別間比較：1組蕨麻小型豬，Ca雄性高于雌性（P＜0.05），A/G、OSM、LDL雄性顯著低于雌性（P＜0.05）。中度高原飼養(yǎng)3個月（2組），LDH、LDH-1、HBDH、P、OSM雄性高于雌性（P＜0.05），A/G、GGT、Ca、Na顯著高于雌性（P＜0.01），ALB顯著低于雌性（P＜0.01），其余指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)意義。中度高原飼養(yǎng)6個月（3組），雌雄間比較，CK、GGT極顯著高于雌性（P＜0.01），CK-MB、AST、AG顯著高于雄性（P＜0.05），其余指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)意義（表2）。

表 1　蕨麻小型豬血液生理指標(biāo)的比較

表 2　蕨麻小型豬血液生化指標(biāo)的比較

組間同性別比較：2組雌性LDH、 ALT的有顯著變化（P＜0.01，P＜0.05），2組雄性LDH、HBDH、CK、CK-MB、ALB、GGT、TG、TC有顯著變化（P＜0.05或P＜0.01），其余詳見表2。

3　討論

血液生理生化指標(biāo)是動物標(biāo)準(zhǔn)化的重要指標(biāo)之一，對了解動物的生理狀態(tài)有指導(dǎo)意義［3］，是病理學(xué)、生理學(xué)、毒理學(xué)研究以及探討人類疾病發(fā)病機制的重要參考指標(biāo)［4］。蕨麻小型豬的生理生化指標(biāo)有過報道，但僅是引進(jìn)到平原地區(qū)長時間飼養(yǎng)后采血測定的結(jié)果［5］，與其原產(chǎn)地血液樣本比較未見報道。本實驗對于蕨麻小型豬作為高原醫(yī)學(xué)實驗動物的標(biāo)準(zhǔn)化研究具有重要意義。

蕨麻小型豬同組性別間部分血液生理生化指標(biāo)差異顯著，可能與不同性別動物的營養(yǎng)需求、物質(zhì)代謝及適應(yīng)能力相關(guān)。由于部分指標(biāo)可能受到健康及營養(yǎng)等因素的影響，此外雄性數(shù)量相比雌性較少，因此需要進(jìn)一步增加樣本數(shù)測量確認(rèn)。

本實驗所選動物均為成年個體，除飼養(yǎng)時間的影響外，主要影響因素是生長環(huán)境的變化，由海拔3 200 m的高原移至1 500 m的中度高原。蕨麻小型豬長期生長在海拔3 000 m的高原環(huán)境，已經(jīng)適應(yīng)了氧分壓低、紫外線強、寒冷晝夜溫差變化大等特點的環(huán)境，機體功能相應(yīng)發(fā)生了適應(yīng)性的變化，具有低氧適應(yīng)性。而血液生理特征正是機體適應(yīng)低氧環(huán)境的一個重要表現(xiàn)，血液生理指標(biāo)能直接反應(yīng)機體對低氧環(huán)境的適應(yīng)性［6］。組間同性別比較，RBC、HGB和HCT低于高原地區(qū)的原因可能是在中度高原缺氧有所緩解，在缺氧環(huán)境下紅細(xì)胞代償性增加，通過增殖以及合成血紅蛋白來提高攜氧能力，以適應(yīng)高海拔缺氧環(huán)境［7-11］。

TG及常量元素P、Ca、Na、K有顯著差異，可能原因是飼養(yǎng)方式與營養(yǎng)水平對其有一定的影響。LDH、CK、AST的來源與心肌有關(guān)，該三項指標(biāo)高原地區(qū)蕨麻小型豬明顯低于中度高原地區(qū)，說明在高原地區(qū)蕨麻小型豬適應(yīng)了高原環(huán)境，心、肝、腎等重要器官在高原缺氧環(huán)境中功能正常［12］。

動物血液生理生化指標(biāo)主要由先天遺傳因素決定，但會受后天環(huán)境因素的影響，其波動范圍構(gòu)成每種動物特有的生物學(xué)特性參數(shù)［13］。蕨麻小型豬引至中度高原地區(qū)飼養(yǎng)繁殖后其部分血液生理生化指標(biāo)受到生長環(huán)境、氣候條件、營養(yǎng)水平、養(yǎng)殖方式的影響，但由于其對高原低氧環(huán)境有較強的耐受力和適應(yīng)性，更適合建立高原病動物模型。

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Q95-33

B

1674-5817（2015）03-0234-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.03.012

2014-05-08

2015-01-07

甘肅省技術(shù)研究與開發(fā)專項計劃（編號1205TCYA010）

郭曉宇（1986-），女，碩士，研究方向: 人類疾病動物模型的建立及相關(guān)研究。E-mail: heihaguo@126.com

王行高（1966-），男，高級工程師，研究方向: 醫(yī)學(xué)實驗設(shè)備的研發(fā)及應(yīng)用。E-mail: 1310621616@qq.com