何丹丹， 張 磊， 劉 力， 吳曉俊， 程雪梅， 王長虹，*

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市復(fù)方中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上?！?01203；2.上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上?！?01203）

駱駝蓬子總生物堿改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能力

何丹丹1， 張 磊1， 劉 力1， 吳曉俊1， 程雪梅2， 王長虹1，2*

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市復(fù)方中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海201203；2.上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上海201203）

目的 采用多種小鼠記憶障礙模型篩選駱駝蓬子抗老年癡呆的有效部位（總生物堿和非生物堿部位）。方法采用避暗實(shí)驗(yàn)法分別對駱駝蓬子總生物堿和非生物堿部位對東莨菪堿和30%乙醇所致的記憶獲得性障礙和記憶再現(xiàn)障礙性小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響進(jìn)行考察。通過小鼠跳臺實(shí)驗(yàn)法進(jìn)一步驗(yàn)證有效部位對東莨菪堿、30%乙醇和亞硝酸鈉所致小鼠記憶獲得性障礙、記憶再現(xiàn)障礙及記憶鞏固障礙模型的改善作用。結(jié)果 避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明總生物堿在較高劑量下對東莨菪堿和30%乙醇所致記憶獲得性障礙和記憶再生性障礙有一定的改善作用（與模型組比較，可顯著延長小鼠潛伏期，P＜0.01）。小鼠跳臺實(shí)驗(yàn)法進(jìn)一步證明高劑量駱駝蓬子總生物堿對東莨菪堿和30%乙醇誘導(dǎo)的學(xué)習(xí)記憶障礙具有改善作用，但對亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙無明顯改善作用。結(jié)論 總生物堿是駱駝蓬子改善小鼠學(xué)習(xí)記憶的有效部位。

駱駝蓬；總生物堿；學(xué)習(xí)記憶障礙；避暗法；跳臺法；阿爾茨海默病

阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）又稱老年癡呆，屬于慢性神經(jīng)退行性疾病，是一種常見老年病，不可逆轉(zhuǎn)，無法徹底治愈。主要表現(xiàn)為記憶喪失和意識模糊，大腦機(jī)能下降，認(rèn)知行為和運(yùn)動行為發(fā)生障礙。因此尋找防治老年癡呆癥安全有效的藥物成為藥物研究的熱點(diǎn)。駱駝蓬Peganum harmala Linn為蒺藜科Zygophyllaceae駱駝蓬屬Peganum多年生草本植物，是我國維吾爾族、哈薩克族和蒙古族等民族沿用已久的民族藥，主治筋脈軟弱、骨關(guān)節(jié)痛、咳嗽痰多、偏癱健忘、神昏頭痛、月經(jīng)不調(diào)等癥［1］。駱駝蓬種子中的總生物堿含有量可達(dá)7%［2］，具有廣泛的藥理作用。Moura等［3-4］報(bào)道β-咔啉類生物堿能夠改善物體識別模型小鼠的記憶，并且具有較好的抗氧化活性。課題組前期采用薄層色譜生物自顯影技術(shù)發(fā)現(xiàn)了駱駝屬植物中一系列具有與加蘭他敏相近的乙酰膽堿酯酶（acetylcholinesterase，AChE）抑制活性的β-咔啉生物堿和喹啉生物堿，并進(jìn)一步證明駱駝蓬子中的活性生物堿對AChE和丁酰膽堿酯酶（butyrycholineesterase，BChE）分別表現(xiàn)出不同的選擇性抑制作用［5-7］。膽堿酯酶（cholinesterase，ChE）活性相對增高是認(rèn)知能力下降的原因之一，因此駱駝蓬子有望對阿爾茨海默病防治具有積極作用。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步采用小鼠避暗實(shí)驗(yàn)對駱駝蓬種子抗阿爾茨海默病的有效部位進(jìn)行篩選，并通過小鼠跳臺實(shí)驗(yàn)法進(jìn)一步確認(rèn)駱駝蓬子有效部位對乙醇致記憶再現(xiàn)障礙、東莨菪堿致小鼠記憶形成障礙和亞硝酸鈉致記憶鞏固障礙的影響。

1　材料

1.1實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠420只，（20±2）g，雌雄兼用，清潔級，由上海中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證編號：SCXK（滬）2012-0002。

1.2藥品與試劑 駱駝蓬子總提物（上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所制備，批號20130110-ZT，總生物堿含有量30.5%）；駱駝蓬子總生物堿提取物（上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所制備，批號20130110-ZJ，總生物堿為65.4%）；駱駝蓬子非生物堿提取物（上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所制備，批號20130110-FJ，殘留總生物堿為8.2%）；鹽酸多奈哌齊片（Donepezil）（衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號110917A）；氫溴酸東莨菪堿注射液（上海禾豐制藥有限公司，生產(chǎn)批號120803）；95%乙醇、亞硝酸鈉等均為分析純試劑（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.3實(shí)驗(yàn)儀器 小鼠跳臺測試儀（成都泰盟科技有限公司）；RD1105-PA小鼠避暗測試儀/鼠博士-動物行為學(xué)分析系統(tǒng)（上海移數(shù)信息科技有限公司）；SENCO恒溫水浴鍋（上海申生科技有限公司）；RE-5210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。

2　方法與結(jié)果

2.1駱駝蓬子不同部位提取物的制備 取駱駝蓬種子2.0 kg分兩次提取，每次1.0 kg藥材中加入10倍量85%的乙醇浸泡12 h后，加熱回流提取2 h，按上述方法重復(fù)提取3次，將提取液合并后取1/3濃縮至流浸膏，烘干得總提取物；另取剩余上述提取液濃縮至流浸膏，采用1倍量4%的鹽酸溶液溶解浸膏，離心，得酸不溶性沉淀，烘干，得非生物堿部位；離心后酸水提取液，加適量飽和氫氧化鈉溶液調(diào)至pH 11，靜置24 h后，過濾，干燥沉淀，即得總生物堿提取物［2，8］。

2.2小鼠避暗法篩選駱駝蓬子改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的有效部位

2.2.1分組及給藥 將昆明種小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為12組，分別為空白組、模型組、陽性藥多奈哌齊組（3 mg/kg）、駱駝蓬子總生物堿高、中、低劑量組（28、14、7 mg/kg），按照總生物堿給藥劑量，同一水平下設(shè)駱駝蓬子總提物和非生物堿部位高、中、低劑量組。除空白組和模型組給予等體積生理鹽水外，其余各組每天固定時(shí)間灌胃給藥一次，連續(xù)給藥7 d，給藥劑量按照小鼠體質(zhì)量0.2 mL/10 g灌胃。

2.2.2對30%乙醇所致小鼠記憶再生性障礙的影響 取昆明種小鼠120只，動物按照“2.2.1”項(xiàng)分組及給藥方案給藥7 d，第8天給藥結(jié)束后30 min，進(jìn)行避暗實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練，避暗儀暗室底部銅柵通36 V、50 Hz交流電，先將小鼠放入避暗儀反應(yīng)箱中訓(xùn)練3 min，小鼠受到電擊逃往明室。正式測試開始時(shí)將小鼠背對洞口放入明室，小鼠進(jìn)入暗室則受到電擊，避暗儀自動記錄5 min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的次數(shù)（即為錯誤次數(shù)）和首次進(jìn)入暗室的時(shí)間（即為避暗潛伏期）。第9天給藥10 min后，除空白組給予等體積生理鹽水外，其余各組灌服30%乙醇0.1 mL/10 g，20min后進(jìn)行測試，記錄5min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的次數(shù)和首次進(jìn)入暗室的時(shí)間［9-10］。以首次進(jìn)入暗室的時(shí)間（逃避潛伏期，escape latency）和5 min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的次數(shù)（fault times）為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用單因素方差分析比較組間差異。

結(jié)果如表1所示，與空白組比較，模型組小鼠的潛伏期明顯減小，具有顯著差異（P＜0.01），錯誤次數(shù)雖然有增加趨勢，但是并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

與模型組比較，駱駝蓬子總生物堿高、中劑量給藥后小鼠潛伏期顯著增加（P＜0.01），而其他組別對潛伏期無明顯影響；多奈哌齊組也無明顯影響。所有組別的小鼠錯誤次數(shù)與模型組比較均無明顯差異。

表1　駱駝蓬子提取物對30%乙醇致小鼠記憶再生性障礙模型的影響（±s）Tab.1 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on 30%ethanol-induced memory retrieval im pairment in m ice（±s）

表1　駱駝蓬子提取物對30%乙醇致小鼠記憶再生性障礙模型的影響（±s）Tab.1 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on 30%ethanol-induced memory retrieval im pairment in m ice（±s）

注：與空白組比較，**P＜0.01；與模型組比較，△△P＜0.01

組別動物數(shù)劑量/（mg·kg-1）潛伏期/ s錯誤次數(shù)/次空白組10—135±94 1.0±0.0模型組10—31±43**1.6±2.0多奈哌齊組10 3 52±39 1.8±1.1駱駝蓬子總生物堿組10 7 29±36 2.6±2.0 10 14 121±84△△1.5±1.6 10 28 115±68△△1.0±0.8駱駝蓬子總提物組10 7 24±34 1.7±1.0 10 14 76±67 1.6±1.4 10 28 68±47 1.4±2.0駱駝蓬子非生物堿組10 7 18±20 3.1±2.7 10 14 35±69 1.9±1.5 10 28 41±51 1.8±1.0

2.2.3對東莨菪堿所致小鼠記憶獲得性障礙的影響 另取昆明種小鼠120只，動物按照“2.2.1”項(xiàng)分組及給藥方案給藥7 d，第8天給藥結(jié)束20 min后，除空白組腹腔注射等體積生理鹽水外，其余各組腹腔注射東莨菪堿5 mg/kg（0.25 mg/mL），10 min后進(jìn)行避暗實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練。第9天給藥20 min后進(jìn)行測試，記錄5 min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的次數(shù)和首次進(jìn)入暗室的時(shí)間。以首次進(jìn)入暗室的時(shí)間（逃避潛伏期，escape latency）和5 min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的次數(shù)（fault times）為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用單因素方差分析比較組間差異。

結(jié)果如表2所示，與空白組比較，模型組小鼠的潛伏期明顯減小，具有顯著差異（P＜0.01），同時(shí)，錯誤次數(shù)雖然有增加的趨勢，但是并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

與模型組比較，駱駝蓬子總生物堿高劑量組小鼠潛伏期顯著增加（P＜0.01），而其他組別對潛伏期無明顯影響；多奈哌齊組也無明顯影響。所有組別的小鼠錯誤次數(shù)與模型組比較均無明顯差異。

表2　駱駝蓬子提取物對東莨菪堿所致記憶獲得性障礙模型的影響（±s）Tab.2 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on scopolam ine-induced m emory acquisition im pairment in m ice（±s）

表2　駱駝蓬子提取物對東莨菪堿所致記憶獲得性障礙模型的影響（±s）Tab.2 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on scopolam ine-induced m emory acquisition im pairment in m ice（±s）

注：與空白組比較，**P＜0.01；與模型組比較，△△P＜0.01

組別動物數(shù)劑量/（mg·kg-1）潛伏期/ s錯誤次數(shù)/次空白組10—101±96 1.1±0.9模型組10—28±21**1.7±1.0多奈哌齊組10 3 23±37 1.5±1.0駱駝蓬子總生物堿組10 7 11±7.9 1.3±0.7 10 14 61±96 1.7±1.4 10 28 96±85△△1.1±0.9駱駝蓬子總提物組10 7 24±33 1.8±1.4 10 14 42±88 1.2±0.9 10 28 25±38 2.4±1.2駱駝蓬子非生物堿組10 7 12±13 2.2±0.6 10 14 60±63 1.7±0.7 10 28 29±29 1.5±0.9

2.3小鼠跳臺法考察駱駝蓬子總生物堿對小鼠記憶障礙行為學(xué)的影響

2.3.1分組及給藥 將昆明種小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，分別為空白組、模型組、陽性藥多奈哌齊組（3 mg/kg）、駱駝蓬子總生物堿高、中、低劑量組（28、14、7 mg/kg）。動物按照“2.2.1”項(xiàng)給藥方式給藥。

2.3.2駱駝蓬子總生物堿對30%乙醇所致小鼠記憶再生性障礙的影響 取昆明種小鼠60只，動物按照“2.3.1”項(xiàng)分組及“2.2.1”項(xiàng)給藥方案。第8天給藥結(jié)束后30 min進(jìn)行跳臺訓(xùn)練。進(jìn)行跳臺訓(xùn)練時(shí)，先將小鼠輕輕放在跳臺上，使其熟悉箱內(nèi)環(huán)境3 min，然后給予36 V電壓訓(xùn)練5 min，以小鼠雙足同時(shí)按觸銅柵為觸電，視為錯誤反應(yīng)。第9天給藥10min后，除空白組給予等體積生理鹽水外，其余各組灌服給30%乙醇0.1mL/10g，20 min后進(jìn)行測試，記錄5min內(nèi)小鼠第一次跳下站臺的時(shí)間和5min跳下站臺的次數(shù)。以跳下站臺時(shí)間（逃避潛伏期，escapelatency）和跳下站臺次數(shù)（faulttimes）為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用單因素方差分析比較組間差異。

結(jié)果如表3所示，與空白組比較，模型組小鼠潛伏期和錯誤次數(shù)均明顯減少，具有極顯著性意義（P＜0.01）。

與模型組比較，駱駝蓬子總生物堿低、中劑量對潛伏期無明顯影響。而高劑量時(shí)小鼠潛伏期明顯增加（P＜0.05），多奈哌齊對小鼠潛伏期均無明顯影響。

與模型組比較，駱駝蓬子總生物堿所用劑量組均明顯降低小鼠犯錯次數(shù)（P＜0.01）。多奈哌齊亦可明顯減少小鼠犯錯次數(shù)（P＜0.01）。

表3　駱駝蓬子總生物堿對30%乙醇致小鼠記憶再生性障礙模型的影響（±s）Tab.3 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaon30%ethanol-inducedmemoryretrievalimpairmentinmice（±s）

表3　駱駝蓬子總生物堿對30%乙醇致小鼠記憶再生性障礙模型的影響（±s）Tab.3 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaon30%ethanol-inducedmemoryretrievalimpairmentinmice（±s）

注：與空白組比較，**P＜0.01；與模型組比較，△△P＜0.01

組別動物數(shù)劑量/（mg·kg-1）潛伏期/ s錯誤次數(shù)/次空白組10-130±1031.1±0.7模型組10-27±35**5.3±2.4**多奈哌齊組10344±511.4±1.7△△駱駝蓬子總生物堿組10763±712.1±1.4△△91475±1221.2±1.3△△1028221±86△△0.9±1.1△△

2.3.3駱駝蓬子總生物堿對東莨菪堿所致小鼠記憶獲得性障礙的影響 另取昆明種小鼠60只，動物按照“2.3.1”項(xiàng)分組及“2.2.1”項(xiàng)給藥方案。第8天給藥結(jié)束20min后，除空白組腹腔注射等體積生理鹽水外，其余各組腹腔注射東莨菪堿5 mg/kg（0.25mg/mL），10min后進(jìn)行跳臺實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練。第9天給藥20min后進(jìn)行測試，記錄5min內(nèi)小鼠第一次跳下站臺的時(shí)間和5min跳下站臺的次數(shù)。以跳下站臺時(shí)間（逃避潛伏期，escapelatency）和跳下站臺次數(shù)（faulttimes）為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用單因素方差分析比較組間差異。

結(jié)果如表4所示，與空白組比較，模型組小鼠潛伏期明顯減少，具有顯著性意義（P＜0.01），同時(shí)錯誤次數(shù)明顯增加（P＜0.05）。

與模型組比較，駱駝蓬子總生物堿低、中劑量對潛伏期無明顯影響。而高劑量時(shí)小鼠潛伏期明顯增加（P＜0.05）。多奈哌齊組亦無明顯差異。所有組別犯錯次數(shù)均無明顯差異。

表4　駱駝蓬子總生物堿對東莨菪堿所致記憶獲得性障礙模型的影響（±s）Tab.4 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaonscopolamine-inducedmemoryacquisitionimpairmentinmice（±s）

表4　駱駝蓬子總生物堿對東莨菪堿所致記憶獲得性障礙模型的影響（±s）Tab.4 Effectsoftotalalkaloidextractsfromtheseedsof P.harmalaonscopolamine-inducedmemoryacquisitionimpairmentinmice（±s）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05

組別動物數(shù)劑量/（mg·kg-1）潛伏期/ s錯誤次數(shù)/次空白組10—230±1100.6±0.8模型組10—22±36**2.1±1.4*多奈哌齊組10310±131.8±1.3駱駝蓬子總生物堿組107107±1141.6±1.4 101462±961.0±0.8 928120±132△1.5±1.5

2.3.4駱駝蓬子總生物堿對亞硝酸鈉所致記憶鞏固性障礙小鼠的影響 另取昆明種小鼠60只，動物按照“2.3.1”項(xiàng)分組及“2.2.1”項(xiàng)給藥方案。第8天給藥結(jié)束后30min進(jìn)行跳臺訓(xùn)練，訓(xùn)練結(jié)束10min后，除空白組腹腔注射生理鹽水外，其余各組均注射亞硝酸鈉125mg/kg。24h后進(jìn)行鞏固試驗(yàn)，記錄5min內(nèi)小鼠第一次跳下站臺的時(shí)間和5min跳下站臺的次數(shù)。以跳下站臺時(shí)間（逃避潛伏期，escapelatency）和跳下站臺次數(shù)（fault times）為指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用單因素方差分析比較組間差異。

結(jié)果如表5所示，與空白組比較，模型組小鼠潛伏期和錯誤次數(shù)均無明顯變化（P＞0.05），但潛伏期有減少的趨勢。與模型組比較，駱駝蓬子總生物堿對小鼠潛伏期和錯誤次數(shù)無明顯影響。多奈哌齊組亦未見明顯差異。

3　討論

學(xué)習(xí)和認(rèn)知記憶功能體現(xiàn)了腦的高級整合功能，其功能的減退甚至喪失是腦衰老的一個(gè)重要標(biāo)志，也是阿爾茨海默病的核心癥狀。目前測定動物學(xué)習(xí)記憶功能的常用方法主要包括空間學(xué)習(xí)記憶的測定、主動回避條件反射法和被動回避條件反射法（避暗實(shí)驗(yàn)、跳臺法）。后者因其方法簡單，指標(biāo)便于觀察，實(shí)驗(yàn)周期短，所以常被用于藥物的篩選［9，11］。

表5　駱駝蓬子總生物堿對亞硝酸鈉所致記憶鞏固性障礙模型的影響（±s）Tab.5 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on sodium nitrite-induced memory consolidation impairment in m ice（±s）

表5　駱駝蓬子總生物堿對亞硝酸鈉所致記憶鞏固性障礙模型的影響（±s）Tab.5 Effects of total alkaloid extracts from the seeds of P.harmala on sodium nitrite-induced memory consolidation impairment in m ice（±s）

組別動物數(shù)劑量/（mg·kg-1）潛伏期/ s錯誤次數(shù)/次空白組10—207±107 0.3±0.5模型組10—148±109 1.1±1.1多奈哌齊組10 3 179±97 1.1±1.2駱駝蓬子總生物堿組10 7 181±127 0.7±1.1 9 14 153±128 0.6±0.7 10 28 141±137 0.6±0.5

在學(xué)習(xí)記憶的過程中，分為記憶的獲得、鞏固和再現(xiàn)三個(gè)階段，因此可在記憶的不同階段給予不同的干擾，造成不同的記憶損傷模型?；瘜W(xué)性藥物導(dǎo)致的記憶障礙大多是某單一神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙所致，比較有利于初步探討藥物的作用機(jī)制［12］。因此，本實(shí)驗(yàn)采用東茛菪堿、亞硝酸鈉以及30%乙醇造成的記憶損傷模型，從多方面評價(jià)駱駝蓬對記憶的影響。

東莨菪堿為M-膽堿受體阻斷劑，干擾動物學(xué)習(xí)和記憶的獲得，用它來造成記憶獲得性障礙模型較為理想。在避暗實(shí)驗(yàn)和跳臺實(shí)驗(yàn)中，駱駝蓬子總生物堿高劑量組均能顯著增加?xùn)|莨菪堿致記憶獲得障礙小鼠潛伏期，改善東莨菪堿引起的學(xué)習(xí)記憶障礙。因此，推測駱駝蓬子總生物堿促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的作用可能與增強(qiáng)中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)功能有關(guān)。

亞硝酸鈉為致缺血缺氧劑，大量的亞硝酸鈉進(jìn)入機(jī)體后，可使正常的血紅蛋白變?yōu)楦哞F血紅蛋白，失去攜氧功能，引起組織缺氧［13-14］。因此，一次性腹腔注射亞硝酸鈉125 mg/kg是造成小鼠記憶鞏固障礙模型的常用方法［15］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果未發(fā)現(xiàn)駱駝蓬子總生物堿具有明顯的抗腦缺氧能力作用。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)對乙醇敏感，隨著進(jìn)入人體內(nèi)的乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，皮層下中樞和小腦活動受到抑制，判斷力受損，可干擾記憶的再現(xiàn)，故在測試前給予30%乙醇會造成記憶再現(xiàn)障礙［16］。本實(shí)驗(yàn)證明駱駝蓬總生物堿高劑量組在避暗實(shí)驗(yàn)和跳臺實(shí)驗(yàn)中均能顯著增加30%乙醇致小鼠記憶再生性障礙小鼠潛伏期，不同劑量均明顯降低小鼠犯錯次數(shù)（P＜0.01），明顯改善30%乙醇引起的小鼠記憶再生性障礙。但記憶再現(xiàn)是一個(gè)復(fù)雜的生理過程，乙醇干擾記憶再現(xiàn)的機(jī)制也較為復(fù)雜［17］，駱駝蓬子總生物堿改善乙醇記憶再現(xiàn)障礙的作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

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Total alkaloids from the seeds of Peganum harmala ameliorating m ice learning ability and memory

HE Dan-dan1， ZHANG Lei1， LIU Li1， WU Xiao-jun1， CHENG Xue-mei2，WANG Chang-hong1，2*
（1.Institute of Chinese Materia Medica，Shanghai Uniυersity of Traditional Chinese Medicine；The MOE Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicinesand Shanghai Key Laboratory of TCM Complex Prescription，Shanghai201203，China；2.ShanghaiR&DCentre for Standardization of Chinese Medicines，Shanghai201203，China）

AIM To screen the effective fractions（total alkaloids and non-alkaloids）from the seeds of Peganum harmala L.on memory behavior in mice with memory impairment.METHODS The passive avoidance test was used to examine the amelioration on learning andmemory of these total alkaloids and non-alkaloids fractions on micemodels ofmemory acquisition impairment and memory retrieval impairment induced by scopolamine and 30% ethanol.The step-down testwas further used to validate the effects of effective fraction on amelioration of learning and memory ofmicemodels ofmemory acquisition impairment，memory retrieval impairmentandmemory consolidation impairment induced by scopolamine，30%ethanol and sodium nitrite.RESULTS The results of passive avoidance test showed that the total alkaloids showed some amelioration effect on disorders of learning and memory induced by scopolamine and the 30%ethanol（significantly prolong the latent period compared with the model group，P＜0.01）.The results of step-down test also proved that high-dose of total alkaloids was effective on the scopolamine-induced micememory acquisition impairment and the 30%ethanol-induced micememory retrieval im-pairment，but no significant effect on the sodium nitrite-induced mice memory consolidation impairment.CONCLUSION The total alkaloids extract is the effective fractions of the seeds of P.harmala on improvementofmice learning and memory.

Peganum harmala L.；total alkaloids；learning and memory impairment；passive avoidance test；step-down test；Alzheimer's disease

R285.5

A

1001-1528（2015）03-0478-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.03.003

2014-10-25

國家自然基金-新疆聯(lián)合基金重點(diǎn)項(xiàng)目（U1130303）；國家自然基金項(xiàng)目（81173119）；國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)（2012ZX0910320-051）；上海市優(yōu)秀學(xué)術(shù)帶頭人計(jì)劃（13XD1403500）資助

何丹丹，女，碩士生，從事藥物制劑與體內(nèi)過程研究。

王長虹，男，研究員，博士生導(dǎo)師，從事中藥新制劑與體內(nèi)過程研究。Tel：（021）51322511，E-mail：wchcxm@163.com