段燦燦　裴顯　楊曉偉等

摘要：為比較藍布正（Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle）經3種不同干燥方法處理對沒食子酸含量的影響。采用高效液相色譜法，以Zorbax Extend-C18（4.6×150 mm，5 μm）色譜柱，甲醇-0.1%磷酸溶液（12∶88，V/V）為流動相，比較了藍布正經烘干法、自然曬干法及自然陰干法處理后沒食子酸的含量。結果表明，該測定方法重現性好，自然曬干法、自然陰干法及烘干法的平均含量分別為0.75%、0.78%、0.79%，3種方法干燥后含量差異不大。鑒于貴州氣候環(huán)境多雨陰天，提示烘干法可作為自然干燥法的有效補充，為藍布正的產地干燥提供依據。

關鍵詞：藍布正（Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle）；干燥方法；沒食子酸；高效液相色譜法

中圖分類號：O657.7 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）19-4815-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.19.041

Abstract： To compare the content of gallic acid of Geum japonicum Thunb. var. chinese F.bolle in Guizhou province by three different drying methods. The samples were separated by Zorbax Extend-C18 （4.6×150 mm，5 μm） column with the mobile phase of methanol-water （containing 0.1% phosphoric acid， 12∶88，V/V） by high-performance liquid chromatography （HPLC）. The content of gallic acid in Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle was determined by HPLC after oven drying， drying in the sun and drying in the shade. The results showed that the content of gallic acid in three different methods were 0.75%， 0.78%， 0.79%， respectively. The content method was simple stable and repeatable to determine the content of gallic acid in Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle. In conclusion， in view of the rainy climate in Guizhou，Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle is suitable for oven drying in production place.

Key words： Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle； drying method； gallic acid； HPLC

藍布正為貴州特色民族藥，為2010版《中國藥典》收錄品種之一，其為薔薇科植物柔毛路邊青（Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle）的干燥全草[1]，是日本路邊青（G japonicum Thunb. Fl. Jap.）的一個變種，具益氣健脾、補血養(yǎng)陰、潤肺化痰等功效，民間多用于高血壓等的治療，是苗族、仡佬族、水族、布依族等治療頭暈等的特色用藥，俗稱“眩暈藥”[2]?；A研究表明，藍布正含有的化學成分主要為鞣質多酚類、黃酮類等[3，4]，其中多酚類化合物經鹽酸水解后產生的沒食子酸是2010版《中國藥典》用于質量控制的指標成分。藥典規(guī)定，藍布正的產地加工方法為曬干，是否在各產地均適應，尤其在氣候多雨少陽的貴州地區(qū)，這種自然干燥方法是否更有利于藍布正的貯存，尚缺乏證據，在干燥過程中可能會影響藍布正的質量，其他方法干燥是否可行，根據文獻檢索，尚無相關研究報道。因此采用HPLC法分析烘干、自然曬干、自然陰干3種方法對藍布正中沒食子酸含量的影響，以期為貴州藍布正藥材的優(yōu)質高效的產地加工提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器：Agilent 1100HPLC系統（包括脫氣機、四元泵、VWD檢測器，軟件為Chem Station，美國安捷倫公司）；101-4型電熱鼓風恒溫干燥箱（上海市崇明實驗儀器廠）；DHG-9123A型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；FW177型中藥材粉碎機（天津泰斯特儀器有限公司）；FA2004N型電子天平（上海民橋醫(yī)療器械有限公司）；CPA224S型萬分之一電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司）。

試劑：沒食子酸（中國食品藥品檢定研究院，批號110831-201204）；甲醇（分析純，成都市科龍化工試劑廠）；甲醇（色譜純，美國TEDIA公司）；磷酸（分析純，重慶川東化工有限公司）；鹽酸（分析純，重慶川東化工有限公司）。

樣品：藍布正為2013年10-11月份間采自貴州省遵義縣楓香鎮(zhèn)，均經遵義醫(yī)學院藥學院生藥學教研室聶緒強博士鑒定為柔毛路邊青（Geum japonicum Thunb.var.chinese F.Bolle）的全草。

1.2 藍布正的干燥

將采收來的藍布正用水洗凈泥土，濾干水分，分別采用3種方法干燥。其中自然曬干法將洗凈的藍布正鋪在干凈的牛皮紙上，置于室外陽光充足處進行晾曬干燥；自然陰干法將洗凈的藍布正鋪在干凈的牛皮紙上，放于室內陰涼通風處進行陰干干燥。烘干法將藍布正鋪在干凈牛皮紙上，放于烘箱內，為防止溫度過高影響有效成分分解，控溫40～45 ℃，鼓風干燥。干燥終點參照文獻[1]規(guī)定的藍布正含水量應少于11%。

1.3 色譜條件

參考文獻[1]，采用Agilent Zorbax Extend-C18色譜柱（4.6×150 mm，5 μm），流動相A為0.1%磷酸溶液，B為甲醇，等度洗脫：0～30 min（88% A，12%B）；檢測波長為273 nm；流速為1 mL/min；柱溫為25 ℃；進樣量為10 μL。

1.4 供試品溶液的制備

精密稱取藍布正粉末約0.500 0 g（精確至0.000 1），置于具塞錐形瓶中，精密移取4 mol/L鹽酸30 mL，置80 ℃水浴中加熱水解2 h，放冷后再稱定，用4 mol/L鹽酸溶液補足減失的重量，搖勻，用0.22 μm微孔濾膜過濾，取濾液即得。

1.5 對照品溶液的制備

精密稱定沒食子酸對照品5.0 mg，放入25 mL容量瓶中，以50%的甲醇溶液配制成0.200、0.150、0.125、0.100、0.075、0.050、0.025、0.005 mg/mL共8個濃度，用0.22 μm微孔濾膜過濾，取濾液即得。

2 結果與分析

2.1 干燥時間

經自然曬干法、自然陰干法及烘干法干燥的藍布正所需時間分別為5 d、5 d和19 h。

2.2 線性關系考察

取不同濃度的沒食子酸對照品溶液，按“1.3”項下色譜條件，注入色譜儀，記錄色譜圖，以濃度為橫坐標（x），峰面積為縱坐標（y），得回歸方程y=31 812x-84.429，R2=0.999 8，表明所建方法線性良好，且在0.005～0.200 mg/mL內呈良好的線性關系，見圖1。

2.3 重現性試驗

精密稱取藍布正粉末約0.5 g，共6份，按“1.4”方法制備，取10 μL進樣，記錄峰面積，計算得到沒食子酸的平均含量為0.88%，RSD為4.39%，表明此方法重現性好。

2.4 3種干燥方法處理的樣品測定

精密稱取不同干燥方法的藍布正粉末約0.5 g，每種方法取4份，按“1.4”方法制備樣品溶液，以上述色譜條件進樣分析，進行沒食子酸的含量測定，典型的沒食子酸對照品和藍布正樣品的色譜圖見圖2，含量測定結果見表1，自然曬干法、自然陰干法及烘干法的平均含量為0.75%、0.78%、0.79%。3種干燥方法處理的藍布正中沒食子酸含量的差異不大，表明烘干法可作為傳統自然干燥的有力補充。

3 小結與討論

藍布正在貴州分布廣泛，為特色民族藥，民間多用于血虛、頭暈等，療效顯著[5]?，F代藥理研究表明，藍布正水提物具心腦血管保護、抗凝血、降糖及抗應激等活性[6-9]。有文獻表明藍布正水溶性成分多為沒食子酸及其多聚體，具有較好的藥理活性[10]，也是藥典品質評價的指標成分，因此在其干燥中應注意保護此類多酚類成分。

本研究采用HPLC法比較了3種不同干燥方法處理后對藍布正品質的影響，方法簡便，重現性好。為了更快的干燥藍布正，本研究中采取了烘干法，溫度控制在40～45 ℃，在此溫度下對多酚的影響較小。結果表明，烘干法處理的樣品的沒食子酸的含量與常規(guī)自然干燥（曬干法、陰干法）比較，含量差異不明顯，表明烘干法也能更好的保存藍布正中的沒食子酸，鑒于貴州天氣多雨多云的特點，其可作為目前干燥方法的一種有效替代，節(jié)省了干燥時間。

參考文獻：

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