姚莉菊 梁軍 周濤 朱漢橋 李文絹 余杰

導讀:鑒于目前出現(xiàn)的農(nóng)產(chǎn)品安全問題以農(nóng)藥殘留最為常見和嚴重的現(xiàn)象，監(jiān)控農(nóng)藥的合理使用，杜絕農(nóng)藥殘留超標產(chǎn)品上市銷售成為農(nóng)產(chǎn)品質量安全工作的重中之重。控制農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量的關鍵環(huán)節(jié)之一就是對農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留量進行及時、準確地分析檢測，因此，在生產(chǎn)、流通領域中加強對農(nóng)殘的快速檢測已成為十分必要的監(jiān)管措施。

農(nóng)產(chǎn)品質量安全事關民眾消費安全和社會穩(wěn)定。近年來，武漢市蔡甸區(qū)以區(qū)農(nóng)檢站為主體，不斷強化監(jiān)管措施，按照統(tǒng)一標準為各街鄉(xiāng)鎮(zhèn)配備了TTNJ-16通道檢測儀器，以提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢測結果的準確性，在使用過程中建議注意以下幾點。

1 試劑配制及保存

1.1 緩沖液

取一包緩沖液，加入500 mL蒸餾水，溶解攪拌均勻后密閉，于避光、陰涼處保存。

1.2 顯色劑

取顯色劑一瓶，加入15 mL緩沖液溶解，4℃冰箱中保存。

1.3 底物

取底物一瓶，加入15 mL蒸餾水，4℃冰箱中保存。

1.4 乙酰膽堿酯酶

取乙酰膽堿酯酶一瓶，加入3 mL緩沖液溶解，4℃冰箱中保存。

2 對照溶液測試

2.1 自動對照的設置

在試管中加入2.5 mL緩沖液，再加入100 μL酶、100 μL顯色劑，搖勻后置于水浴鍋中，在恒溫37.5℃下放置15 min。15 min后再加入100 μL底物搖勻，立即倒入1 cm比色皿，放入儀器比色池中，按“對照”按鈕，儀器開始作對照，3 min后自動對照完成。

2.2 測定

建議測定對照值在0.4～0.8，當對照值在0.3～0.4時盡快使用本試劑盒，同時冷凍保存未使用完的乙酰膽堿酯酶液。當排除溫度、檢測設備等其他因素后，已測定的對照值仍然＜0.3，則應停止使用該瓶乙酰膽堿酯酶液，重新配制一瓶乙酰膽堿酯酶液后，嘗試再次測定對照值，通常情況下僅更換乙酰膽堿酯酶液即可繼續(xù)正常使用本試劑盒。

3 樣品處理

3.1 取樣部位

為了保證取樣具有代表性，葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部；果蔬從不同個體的表皮處取樣。樣品不可用水沖洗，剪成1 cm×1 cm的碎片，稱取樣品2 g，放入燒杯中。

3.2 樣品處理

在裝有樣品的燒杯中加入10 mL緩沖液，振蕩1～2 min后過濾，用移液槍提取2.5 mL過濾后的待測液于試管中，加入 100 μL 酶、100 μL 顯色劑，搖勻。在37.5℃水浴恒溫鍋中放置15 min，放置時間與對照液放置時間一致。

3.3 檢測

15 min后再加入100 μL底物搖勻，此時檢測液開始顯色反應，應立即倒入1 cm比色皿，放入儀器比色池中，按“測量”按鈕，3 min后儀器測量完成，顯示測量結果。當樣品提取液對酶的抑制率小于50%時，樣品為合格；當≥50%時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，即樣品檢測結果為陽性。

4 檢測結果的歸檔

對檢測結果為超標的樣品要重復檢測2次以上，以確保結果的可靠性。應在檢測工作完成后將檢測結果粘貼在記錄本上，同時保存在檢測儀器內，便于存檔、備查等。

5 檢測器皿的清洗

檢測所用的比色皿，必須用洗滌液清洗，后用清水清洗干凈，再晾干。不要用洗潔精之類的清潔劑，以免影響測量，不可用堿液洗滌，也不能用硬布、毛刷刷洗。試管、燒杯、剪刀一定要干凈，操作過程中應分開使用，以免影響檢測結果的準確性。

6 其他需注意的事項

①蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）蔬菜浸泡。對一些葉綠素含量較高的蔬菜，也可采取整株（體）浸泡的方法，減少色素的干擾。

②試劑溶解前冷凍保存的保質期為1年；酶粉溶解后應盡快用完，可短期冷藏保存，如1周不能用完，應冷凍保存，反復冷凍不可超過3次，冷凍保存不超過1個月；底物和顯色劑溶解后冷藏保存，保質期1個月，可冷凍長期保存，配制檢測試劑時請勿劇烈振蕩。

③樣品處理時勿將樣品剪得太碎。

④加入酶試劑必須定量準確，勿將液體滴在玻璃壁上，否則誤差較大。向下操作。

⑤樣品結果抑制率大于50%的需要重復檢驗2次，才能判斷為陽性。

[1]秦桂云.蔬菜農(nóng)藥殘留檢測的方法及原理[EB/OL].（2013-05-17）[2014-02-11].http://www.agrichem.cn/news/2013/3/25/201332514442058255.shtml.

[2]普春，歐陽繼敏.蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法介紹及注意事項[J].云南農(nóng)業(yè)科技，2009（S2）：97-98.